Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Immunology and Infection
Click here for the English version

Immunology and Infection

Terapeutisk utvärdering av fekal mikrobiotatransplantation i en interleukin 10-bristfällig musmodell

Published: April 6, 2022 doi: 10.3791/63350
Automatic Translation
1,2, 1, 2, 1
1Division of Gastroenterology, Department of Internal Medicine, University of Texas Medical Branch at Galveston, 2Department of Gastroenterology, Xiangya Hospital of Central South University

Summary

Samspelet mellan genetisk mottaglighet, slemhinneimmunitet och tarmmikroekologisk miljö är involverad i patogenesen av inflammatorisk tarmsjukdom (IBD). I denna studie tillämpade vi fekal mikrobiotatransplantation på IL-10-bristfälliga möss och undersökte dess inverkan på koloninflammation och hjärtfunktion.

Abstract

Med utvecklingen av mikroekologi de senaste åren har förhållandet mellan tarmbakterier och inflammatorisk tarmsjukdom (IBD) väckt stor uppmärksamhet. Ackumulerande bevis tyder på att dysbiotisk mikrobiota spelar en aktiv roll för att utlösa eller förvärra den inflammatoriska processen vid IBD och att fekal mikrobiotatransplantation (FMT) är en attraktiv terapeutisk strategi eftersom överföring av en hälsosam mikrobiota till IBD-patient kan återställa lämplig värd-mikrobiotakommunikation. De molekylära mekanismerna är dock oklara, och effekten av FMT har inte varit särskilt väl etablerad. Därför är ytterligare studier i djurmodeller av IBD nödvändiga. I denna metod tillämpade vi FMT från vildtyp C57BL / 6J-möss till IL-10-bristfälliga möss, en allmänt använd musmodell av kolit. Studien utarbetar insamling av fekala pellets från donatormössen, gör fekallösningen / suspensionen, administrerar fekallösningen och övervakar sjukdomen. Vi fann att FMT signifikant mildrade hjärtförsämringen hos IL-10 knockout-möss, vilket understryker dess terapeutiska potential för IBD-hantering.

Introduction

Det mänskliga tarmmikroekosystemet är extremt komplext, med mer än 1000 arter av bakterier i tarmen hos en frisk person1. Tarmfloran är involverad i att upprätthålla tarmens normala fysiologiska funktioner och immunsvaret och har ett oskiljaktigt förhållande till människokroppen. Ackumulerande bevis tyder på att tarmmikrobiomet utgör det sista mänskliga organet, som är en del av människokroppen, inte bara en grupp parasiter2. Ett "hälsosamt" symbiotiskt förhållande mellan tarmmikrobiotan, deras metaboliter och värdimmunsystemet som etablerades tidigt i livet är avgörande för att upprätthålla tarmhomeostas. Vid vissa onormala tillstånd som kronisk inflammation stör förändringar i kroppens inre och yttre miljö allvarligt tarmhomeostasen, vilket resulterar i en ihållande obalans i tarmens mikrobiella samhälle, som heter dysbios3. Faktum är att exponering för flera miljöfaktorer, inklusive kost, läkemedel och patogener, kan leda till förändringar i mikrobiotan.

Dysbios är associerad med patogenesen av en mängd olika tarmsjukdomar, såsom inflammatorisk tarmsjukdom (IBD), irritabelt tarmsyndrom (IBS) och pseudomembranös enterit, liksom en växande lista över extra-tarmsjukdomar, inklusive hjärt-kärlsjukdom, fetma och allergi4. Mikrobiotaprofilering avslöjade att patienter med IBD har en dramatisk minskning av bakteriediversiteten, liksom markanta förändringar i populationerna av vissa specifika bakteriestammar 5,6. Dessa studier visade mindre Lachnospiraceae och Bacteroidetes men mer Proteobacteria och Actinobacteria hos IBD-patienter. Man tror att patogenesen av IBD är relaterad till olika patogena faktorer, inklusive onormal tarmflora, dysreglerat immunsvar, miljöutmaningar och genetiska varianter7. Rikliga bevis tyder på att tarmbakterier spelar en roll i initierings- och appliceringsfaserna av IBD8,9, vilket indikerar att korrigering av tarmdysbios kan representera ett nytt tillvägagångssätt för behandling och / eller underhållsbehandling av IBD.

Prototypen av fekal mikrobiotatransplantation (FMT) började i forntida Kina10. År 1958 behandlade Dr. Eiseman och hans kollegor framgångsrikt fyra fall av svår pseudomembranös enterit med fekal materia från friska givare via lavemang, vilket öppnade ett nytt kapitel i modern västerländsk medicin med mänsklig avföring för att behandla mänskliga sjukdomar11. Clostridium difficile-infektion (CDI) har visat sig vara den främsta orsaken till pseudomembranös enterit12 och FMT är mycket effektivt vid behandling av CDI. Under de senaste åtta åren har FMT blivit en standardbehandling för behandling av återkommande CDI13, vilket föranleder ytterligare studier som undersöker FMT: s roll vid andra sjukdomar, såsom IBD. Under de senaste tjugo åren har många fallrapporter och kohortstudier dokumenterat användningen av FMT hos patienter med IBD14. En metaanalys, inklusive 12 studier, visade att 62% av patienterna med Crohns sjukdom (CD) uppnådde klinisk remission efter FMT, och 69% av CD-patienterna hade kliniskt svar15. Trots dessa uppmuntrande resultat är FMT: s roll i hanteringen av IBD fortfarande osäker, och mekanismerna genom vilka FMT förbättrar tarminflammation är dåligt förstådda. Ytterligare utredning är nödvändig innan FMT kan ansluta sig till det nuvarande beväpningen av behandlingsalternativ för IBD på klinikerna.

I detta protokoll tillämpade vi FMT på IL-10-/- möss, som utvecklar kolit spontant efter avvänjning och har fungerat som en guldstandard för att spegla den multifaktoriella karaktären hos IBD16,17,18. IL-10−/− möss har använts i stor utsträckning för att dissekera IBD-etiologi eftersom de uppvisar liknande molekylära och histologiska egenskaper som IBD-patienter, och liksom patienter kan sjukdomen förbättras med anti-TNFα-terapi16. Åldrande IL10−/− möss (>9 månaders ålder) har en ökad hjärtstorlek och nedsatt hjärtfunktion jämfört med åldersmatchade vildtypsmöss19, vilket gör det till en utmärkt modell för att studera kolitinducerade hjärtsjukdomar. Andra murina modeller av kolit, såsom dextrannatriumsulfatmodellen och T-cellinducerad kolitmodell, kan dock också användas. Vi administrerade fekal suspension via oral sondmatning, vilket visat sig vara en effektiv och bättre väg än lavemang hos människor20.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Alla procedurer som utfördes på djur godkändes av Institutional Animal Care and Use Committee vid University of Texas Medical Branch i Galveston (protokoll # 1512071A).

1. Samling av färska fekala pellets

  1. Förbered sterila pappershanddukar, trubbiga pincett och 50 ml koniska rör.
    1. Lägg några pappershanddukar och pincett i separata autoklavpåsar och autoklavera dem vid 180 °C i torr värme i 30 minuter. Använd också sterila koniska rör. Väg de koniska rören och skriv ner deras vikt på rören.
  2. Slå på biosäkerhetsskåpet i djurrummet.
  3. Ta en autoklaverad ren musbur utan sängkläder och placera den i biosäkerhetsskåpet. Ta bort locket och matstället och placera dem inuti skåpet.
  4. Lägg några sterila pappershanddukar på botten av buret och placera tillbaka metallstället ovanpå buren.
  5. Identifiera åldersmatchade fekala donatorer och placera musburen i biosäkerhetsskåpet. Öppna buren och ta försiktigt en donatormus (C57BL/6J) i svansen och placera den på metallstället ovanpå den rena buren.
  6. Placera burskyddet ovanpå stället och vänta tills djuret /djuren har avföring.
    OBS: Lägg några muskullar på stället samtidigt.
  7. Samla fekalpellets och lägg dem i ett sterilt 50 ml koniskt rör. Slå ihop pelletsen efter kön. Blanda inte fekala pellets som samlats in från män och kvinnor.
  8. Vikt röret igen och beräkna vikten av fekala pellets.

2. Beredning av fekal suspension

  1. Förbered en steril lösning (10% glycerol i normal saltlösning).
  2. Tillsätt 10 ml 10% glycerol / normal saltlösning till det koniska röret för varje gram fekala pellets.
    OBS: Öka lösningsvolymen till 20 ml om det behövs. Denna studie använde också 1 ml lösning för varje pellet (5-10 mg).
  3. Homogenisera blandningen med låg hastighet med en bänkhomogenisator eller en mixer inuti en dragskåp för att återsuspendera avföringen (3 X 30 s).
  4. Filtrera fekalsuspensionen genom 2 lager steril bomullsgas (10,2 cm x 10,2 cm). Förvara filtratet tillfälligt i kylskåp i upp till 6 timmar eller förpacka det i sterila kryogena injektionsflaskor och förvara det i en frys på -80 °C.
  5. Rengör homogenisatorn eller mixern noggrant enligt ett standardförfarande.

3. Administrering av fekal suspension genom oral sondmatning

  1. Tina den frysta fekala suspensionen på is om du använder frysta prover. Blanda den tinade fekala suspensionen genom virvel.
  2. Överför den färska eller tinade fekala suspensionen till 1 ml sprutor.
    OBS: Varje mus kommer att få totalt 200 μL fekal suspension, och varje IL-10-/- mus i kontrollgruppen får 200 μL 10% glycerol / normal saltlösning17.
  3. Väg mössen och välj rätt sondmatningsnålstorlek och maximal doseringsvolym.
    OBS: För möss med en kroppsvikt mellan 20-25 gram, använd en 20 G 3,81 cm böjd sondnål med en 2,25 mm boll. Se gavageneedle.com för mer information.
  4. Testa sondnålen genom att mäta längden från musspetsen till xiphoidprocessen (botten av bröstbenet). Fyll sprutan med 10% glycerol/saltlösning eller fekal suspension och ta bort luftbubblor inuti sprutan och nålen.
    OBS: Om nålen är längre än längden, sätt ett märke på nålaxeln / slangen i nosnivån. För inte nålen/slangen genom djuret förbi den punkten för att förhindra gastrisk perforering.
  5. Placera en musbur i biosäkerhetsskåpet, ta bort plastburskyddet och lämna metallstället på plats.
  6. Ta en mus i svansen och lägg den på metallstället. Håll musen i svansen med ena handen och använd tummen och långfingrarna på en annan hand för att hålla fast djuret genom att ta tag i huden över axlarna. På så sätt sträcks frambenen ut åt sidan, vilket förhindrar att framfötterna skjuter ut nålen. Sträck försiktigt djurets huvud bakåt och håll huvudet på plats med en hand.
    OBS: Öva mushantering tills experimenteraren har fullt förtroende innan du fortsätter till experimentet.
  7. Placera sondnålen ovanpå tungan inuti munnen. Gå försiktigt längs övre gommen tills nålen når matstrupen. För nålen smidigt i en rörelse. Tvinga inte nålen om något motstånd känns. Ta ut nålen och försök igen.
  8. När nålen är ordentligt placerad och verifierad, administrera långsamt materialet genom att trycka på sprutan som är fäst vid nålen. Rotera inte nålen eller tryck nålen framåt, vilket kan brista matstrupen. Efter dosering, dra försiktigt ut nålen.
  9. Sätt tillbaka musen till sin hembur. Övervaka djuret i 5-10 minuter genom att leta efter tecken på ansträngd andning eller nöd. Övervaka mössen igen mellan 12-24 h efter FMT.

4. Sjukdomsövervakning och eutanasi

  1. Övervaka mössen i längdriktningen för IBD-debut med ockult fekalt blod och/eller koloskopi21. Utvärdera hjärtfunktionen genom trans-thorax ekokardiografi22,23.
  2. Avliva djuren genom halshuggning under ett djupt anestesiplan med isofluran (1%-4%).
  3. Samla blodet i mikrocentrifugrör med antikoagulantia och centrifugera vid 1000-2000 x g i 10 min i en kyld centrifug (4 °C). Spara supernatanten, avsedd plasma i en frys på -80 °C.
  4. Vid avlivning, förbered muskolon med hjälp av Swiss-roll-tekniken24 för histopatologisk analys (H&E-färgning)25.
  5. Mät B-typ natriuretisk peptid (BNP) i plasma med hjälp av en enzymimmunanalys (EIA) kit23.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Vi utförde friska donator FMT 3 gånger (en gång i månaden i 3 månader) på 2 månader gamla C57BL/6J wild type (WT) och IL-10 knockout möss. Åldersmatchade C57BL/6J-möss (åldersskillnaden bör vara <2 månader) fungerade som fekaldonatorer och färska fekala pellets användes varje gång. EIA-analyser visade att BNP var markant förhöjt i plasma hos möss med IL-10-brist och att friska donator-FMT signifikant mildrade ökningen av BNP-nivåer (figur 1A, n = 5, p < 0,05). Ekokardiografi detekterade en signifikant minskning av vänster ventrikelutkastningsfraktion (LVEF) hos IL-10-/- mössen, jämfört med WT-mössen ; minskningen upphävdes signifikant av FMT (figur 1B, n = 5, p < 0,05). Dessa fynd tyder på att friska donator FMT mildrade kolitinducerad hjärtnedsättning.

Figure 1
Figur 1. BNP-uppreglering och LVEF-nedreglering mildrades genom fekal mikrobiotatransplantation (FMT) hos IL-10 knockout-möss. A) BNP-koncentration i plasma (pg/ml) i möss av vild typ (WT) och IL-10 knockout (KO) som behandlats med vehikel (Veh) eller FMT. B) LVEF för WT- och IL-10 KO-möss som behandlats med/utan FMT. Resultaten presenterades som medelvärde ± SD (n = 5). * p < 0,05 jämfört med WT-möss behandlade med vehikel (Veh). # p < 0,05 vs. IL-10 KO möss behandlade med Veh. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Som en innovativ prövningsbehandling har FMT blivit ett hett ämne vid behandling av olika störningar de senaste åren eftersom dysbios av den kommensala mikrobioten är inblandad i patogenesen av flera mänskliga sjukdomar, inklusive IBD, fetma, diabetes mellitus, autism, hjärtsjukdomar och cancer26. Även om mekanismen inte har fastställts, tror man att FMT fungerar genom att bygga en ny biologisk flora och förhindra förlust av kvarvarande bakterier. Den metod som presenteras här antog oral sondmatning som leveransväg, vilket har visat sig vara effektivt27. Vi valde den orala vägen eftersom oral administrering är den mest praktiska och ekonomiska och föredras av de flesta patienter. Dessutom har FMT av orala kapslar visat sig vara ett effektivt tillvägagångssätt för behandling av återkommande CDI i kliniska prövningar28. Andra vanliga övre GI-leveransvägar är nasogastriskt rör, nasojejunalrör, jejunostomirör och esophagogastroduodenoskopi. De vanliga lägre GI-leveransvägarna inkluderar koloskopi, kolontransendoskopisk enteral slang (TET) och rektal lavemang. Den optimala sträckningen för FMT är dock fortfarande osäker20. För närvarande anses övre GI-administrering vara mest lämplig29, men det finns ingen idealisk väg som passar alla patienter.

Verktygen och behållarna som används vid uppsamlingen av fekala pellets bör vara sterila för att förhindra korskontaminering. Fekala pellets som samlas in från män och kvinnor bör inte blandas på grund av könsskillnader i immunitet. I djurmodeller och människor finns det skillnader i mikrobiota mellan könen30. Dessa könsskillnader resulterar ofta i könsberoende förändringar i lokal GI-inflammation, värdimmunitet och mottaglighet för en serie inflammatoriska störningar31. Fekalpellets kan homogeniseras i steril fosfatbuffrad saltlösning eller 10-50% glycerol / normal saltlösning, och 10% glycerol har antagits allmänt29. I denna studie användes 10%, 20% och 50% glycerol / saltlösning, och de erbjöd alla god bakteriekonservering under frysförhållanden. Homogenisering bör göras med låg hastighet och inuti en rökhuv för att minimera exponeringen för respirabla aerosoler som produceras i denna process. Fekalsuspensionen ska filtreras genom två lager steril gasväv eller ett 20 μm nylonfilter för att bli av med stora partiklar som kan blockera sondnålar. Den filtrerade fekala suspensionen för omedelbar användning ska placeras i kylskåp och resten kan alikvoteras och förvaras i en frys på -80 °C. Frysning är särskilt nödvändig om fekalmaterialet erhålls från mänskliga givare. Metaanalys har visat att fryst FMT är lika effektivt som färsk FMT hos patienter med återkommande CDI32,33,34. observerade också att vid 6 månader efter FMT var svarsfrekvensen 26,7% högre hos CD-patienter i gruppen färska fekala bakterier än i gruppen frysta fekala bakterier35, vilket tyder på att färsk FMT är ett bättre val än fryst FMT i vissa fall.

Den optimala dosen och frekvensen av FMT-infusion förblir okänd i detta skede. Studier har visat att varaktigheten av kliniskt svar på enstaka FMT-behandling är övergående och otillräcklig för att inducera grundläggande förändringar i mottagarens tarmflora, och sekventiell FMT-behandling behövs för att upprätthålla CD-remission36,37. Vi utförde FMT en gång i månaden under 3 månader i rad, och våra data visade god terapeutisk effekt. I en pågående studie utför vi månatlig FMT i en grupp IL-10-bristfälliga möss i 12 månader och kommer att utvärdera tarmmikrobiota, tarminflammation och hjärtfunktion i slutet av studien. Vi förväntar oss att sekventiell FMT visar bättre terapeutisk effekt än enstaka FMT.

Medan FMT erbjuder en enorm potential att reparera störd tarmmikrobiota och säkerhetsdata växer fram38,39, saknas det fortfarande medicinska bevis för säkerhet, administreringssätt, bakteriedos, administreringsfrekvens och långsiktig prognos för FMT för behandling av mänskliga sjukdomar. Den 12 mars 2020 utfärdade FDA en säkerhetsvarning om att FMT är förknippat med en potentiell risk för allvarliga eller livshotande infektioner40. Infektionerna orsakades av enteropatogena E. coli och Shiga toxinproducerande E. coli, och FMT-produkten levererades av ett avföringsbankföretag baserat i USA. Således krävs ytterligare mekanistiska studier och långsiktiga observationer på djur fortfarande för att verkligen förstå användningen av FMT som behandlingsmodalitet hos patienter. FMT hos gnagare kommer att förbli ett kraftfullt verktyg inom mikrobiomforskning, vilket så småningom kan göra FMT-förfarandet till en lättillgänglig behandling med lägre toxicitet än andra syntetiska droger.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Författarna förklarar att de inte har några konkurrerande intressen.

Acknowledgments

Detta arbete stöddes delvis av bidrag från National Institutes of Health (R01 HL152683 och R21 AI126097 till Q. Li) och av American Heart Association Grant-in-Aid 17GRNT33460395 (till Q. Li) (heart.org).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
BD Syringe, 1 mL Fisher Scientific 14-829-10F
Blunt end forceps Knipex 926443
Brain natriuretic peptide EIA kit Sigma RAB0386
C57BL/6J mice Jackson Lab 000664
Centrifuge Eppendorf 5415R
Conical tubes ThermoFisher 339650
Curved feeding Needles Kent Scientific FNC-20-1.5-2
GLH-115 homogenizer Omni International GLH-115
Glycerol MilliporeSigma G5516
IL-10 knockout mice Jackson Lab 004366
Isoflurane Piramal Critical care NDC66794-017-10
USP normal saline Grainger 6280
Vaporizer Euthanex Corp. EZ-108SA

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. D'Argenio, V., Salvatore, F. The role of the gut microbiome in the healthy adult status. Clinica Chimica Acta. 451, Pt A 97-102 (2015).
  2. Baquero, F., Nombela, C. The microbiome as a human organ. Clinical Microbiology and Infection. 18, Suppl 4 2-4 (2012).
  3. Hawrelak, J. A., Myers, S. P. The causes of intestinal dysbiosis: a review. Alternative Medcine Review. 9 (2), 180-197 (2004).
  4. Carding, S., Verbeke, K., Vipond, D. T., Corfe, B. M., Owen, L. J. Dysbiosis of the gut microbiota in disease. Microbial Ecology in Health and Disease. 26 (1), 26191 (2015).
  5. Ma, H. Q., Yu, T. T., Zhao, X. J., Zhang, Y., Zhang, H. J. Fecal microbial dysbiosis in Chinese patients with inflammatory bowel disease. World Journal of Gastroenterology. 24 (13), 1464-1477 (2018).
  6. Chu, Y., et al. Specific changes of enteric mycobiota and virome in inflammatory bowel disease. Journal of Digestive Diseases. 19 (1), 2-7 (2018).
  7. Manichanh, C., Borruel, N., Casellas, F., Guarner, F. The gut microbiota in IBD. Nature reviews Gastroenterology and Hepatology. 9 (10), 599-608 (2012).
  8. Podolsky, D. K. Inflammatory bowel disease. The New England Journal of Medicine. 347 (6), 417-429 (2002).
  9. Tamboli, C. P., Neut, C., Desreumaux, P., Colombel, J. F. Dysbiosis in inflammatory bowel disease. Gut. 53 (1), 1-4 (2004).
  10. Shi, Y. C., Yang, Y. S. Fecal microbiota transplantation: Current status and challenges in China. JGH Open: An Open Access Journal of Gastroenterology and Hepatology. 2 (4), 114-116 (2018).
  11. Markley, J. C., Carson, R. P., Holzer, C. E. Pseudomembranous enterocolitis: A clinico pathologic study of fourteen cases with a common etiologic factor. AMA Archives of Surgery. 77 (3), 452-461 (1958).
  12. Wilcox, M. H. Clostridium difficile infection and pseudomembranous colitis. Best Practice and Research Clinical Gastroenterology. 17 (3), 475-493 (2003).
  13. Kelly, C. R., de Leon, L., Jasutkar, N. Fecal microbiota transplantation for relapsing Clostridium difficile infection in 26 patients: methodology and results. Journal of Clinical Gastroenterology. 46 (2), 145-149 (2012).
  14. Borody, T. J., Warren, E. F., Leis, S., Surace, R., Ashman, O. Treatment of ulcerative colitis using fecal bacteriotherapy. Journal of Clinical Gastroenterology. 37 (1), 42-47 (2003).
  15. Cheng, F., Huang, Z., Wei, W., Li, Z. Fecal microbiota transplantation for Crohn's disease: a systematic review and meta-analysis. Techniques in Coloproctology. 25 (5), 495-504 (2021).
  16. Scheinin, T., Butler, D. M., Salway, F., Scallon, B., Feldmann, M. Validation of the interleukin-10 knockout mouse model of colitis: antitumour necrosis factor-antibodies suppress the progression of colitis. Clinical and Experimental Immunology. 133 (1), 38-43 (2003).
  17. Keubler, L. M., Buettner, M., Hager, C., Bleich, A. A multihit model: Colitis lessons from the interleukin-10-deficient mouse. Inflammatory Bowel Diseases. 21 (8), 1967-1975 (2015).
  18. Kiesler, P., Fuss, I. J., Strober, W. Experimental models of inflammatory bowel diseases. Cellular and Molecular Gastroenterology and Hepatology. 1 (2), 154-170 (2015).
  19. Sikka, G., et al. Interleukin 10 knockout frail mice develop cardiac and vascular dysfunction with increased age. Experimental Gerontology. 48 (2), 128-135 (2013).
  20. Fecal microbiota transplantation-standardization study group. Nanjing consensus on methodology of washed microbiota transplantation. Chinese Medical Journal (Engl). 133 (19), 2330-2332 (2020).
  21. Kodani, T., et al. Flexible colonoscopy in mice to evaluate the severity of colitis and colorectal tumors using a validated endoscopic scoring system). Journal of Visualized Experiments: JoVE. (80), e50843 (2013).
  22. Cheng, H. -W., et al. Assessment of right ventricular structure and function in mouse model of pulmonary artery constriction by transthoracic echocardiography. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (84), e51041 (2014).
  23. Tang, Y., et al. Chronic colitis upregulates microRNAs suppressing brain-derived neurotrophic factor in the adult heart. PLoS One. 16 (9), 0257280 (2021).
  24. Orner, G. A., et al. Suppression of tumorigenesis in the Apc(min) mouse: down-regulation of beta-catenin signaling by a combination of tea plus sulindac. Carcinogenesis. 24 (2), 263-267 (2003).
  25. Kline, K. T., et al. Neonatal injury increases gut permeability by epigenetically suppressing E-Cadherin in adulthood. The Journal of Immunology. 204 (4), 980-989 (2020).
  26. DeGruttola, A. K., Low, D., Mizoguchi, A., Mizoguchi, E. Current understanding of dysbiosis in disease in human and animal models. Inflammatory Bowel Diseases. 22 (5), 1137-1150 (2016).
  27. Chevalier, G., et al. Effect of gut microbiota on depressive-like behaviors in mice is mediated by the endocannabinoid system. Nature Communications. 11 (1), 6363 (2020).
  28. Kao, D., et al. Effect of oral capsule- vs colonoscopy-delivered fecal microbiota transplantation on recurrent clostridium difficile infection: A randomized clinical trial. JAMA. 318 (20), 1985-1993 (2017).
  29. Cammarota, G., et al. International consensus conference on stool banking for faecal microbiota transplantation in clinical practice. Gut. 68 (12), 2111-2121 (2019).
  30. Vemuri, R., et al. The microgenderome revealed: sex differences in bidirectional interactions between the microbiota, hormones, immunity and disease susceptibility. Seminar Immunopathology. 41 (2), 265-275 (2019).
  31. Wilkinson, N. M., Chen, H. -C., Lechner, M. G., Su, M. A. Sex differences in immunity. Annual Review of Immunology. , (2022).
  32. Lee, C. H., et al. Frozen vs fresh fecal microbiota transplantation and clinical resolution of diarrhea in patients with recurrent clostridium difficile infection: A randomized clinical trial. JAMA. 315 (2), 142-149 (2016).
  33. Hamilton, M. J., Weingarden, A. R., Sadowsky, M. J., Khoruts, A. Standardized frozen preparation for transplantation of fecal microbiota for recurrent clostridium difficile infection. American Journal of Gastroenterology. 107 (5), 761-767 (2012).
  34. Tang, G., Yin, W., Liu, W. Is frozen fecal microbiota transplantation as effective as fresh fecal microbiota transplantation in patients with recurrent or refractory Clostridium difficile infection: A meta-analysis. Diagnostic Microbiology and Infectious Disease. 88 (4), 322-329 (2017).
  35. Cui, B., et al. Fecal microbiota transplantation through mid-gut for refractory Crohn's disease: safety, feasibility, and efficacy trial results. Journal of Gastroenterology and Hepatology. 30 (1), 51-58 (2015).
  36. Li, P., et al. Timing for the second fecal microbiota transplantation to maintain the long-term benefit from the first treatment for Crohn's disease. Applied Microbiology and Biotechnology. 103 (1), 349-360 (2019).
  37. Moayyedi, P. Update on fecal microbiota transplantation in patients with inflammatory bowel disease. Gastroenterology and Hepatology. 14 (5), 319 (2018).
  38. Saha, S., Mara, K., Pardi, D. S., Khanna, S. Long-term safety of fecal microbiota transplantation for recurrent clostridioides difficile infection. Gastroenterology. 160 (6), 1961-1969 (2021).
  39. Perler, B. K., et al. Long-term efficacy and safety of fecal microbiota transplantation for treatment of recurrent clostridioides difficile infection. Journal of Clinical Gastroenterology. 54 (8), 701-706 (2020).
  40. Safety alert regarding use of fecal microbiota for transplantation and risk of serious adverse events likely due to transmission of pathogenic organisms. FDA. , Available from: https://www.fda.gov/vaccines-blood-biologics/safety-availability-biologics/safety-alert-regarding-use-fecal-microbiota-tramsplantation-and-risk-serious-adverse-events-likely (2020).

Tags

Immunologi och infektion utgåva 182 inflammatorisk tarmsjukdom fekal mikrobiotatransplantation ulcerös kolit Crohns sjukdom dysbios interleukin 10
Terapeutisk utvärdering av fekal mikrobiotatransplantation i en interleukin 10-bristfällig musmodell
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Xiao, Y., Zhong, X. S., Liu, X., Li, … More

Xiao, Y., Zhong, X. S., Liu, X., Li, Q. Therapeutic Evaluation of Fecal Microbiota Transplantation in an Interleukin 10-Deficient Mouse Model. J. Vis. Exp. (182), e63350, doi:10.3791/63350 (2022).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter