Summary

制备大鼠脑组织神经元和神经胶质发展研究总结文化

Published: September 30, 2009
doi:

Summary

胚胎大鼠脑组织总文化系统的一个协议描述。在聚集的多能祖细胞可以发展和分化成神经元,星形胶质细胞和少突胶质细胞。

Abstract

在体外系统概括了发展和祖细胞分化为成熟的神经元和神经胶质细胞在中枢神经系统(CNS)的,将提供一个强大的神经学家平台,调查轴突胶质细胞相互作用,性能和多能祖细胞的分化,少突胶质细胞的进展在细胞和分子水平的细胞系细胞。我们在这里介绍从胚胎大鼠forebrains,在无血清培养基可维持3-4周,并在我们的实验室用来作为模型来研究神经元的神经胶质细胞的相互作用和中枢神经系统的髓鞘的中枢神经系统的总的培养体系。本短片将展示如何隔离和成长E16大鼠脑组织中的中枢神经系统的总文化。此外,从相同的大脑解剖,经常游离神经文化高度浓缩,可随时获得和使用各种研究,对中枢神经系统神经元或用于与其他细胞共培养。

Protocol

前夹层的制备 手术工具:由高压灭菌消毒清扫剪刀和镊子 盖玻片清洁: 在1L草烧杯中33%的盐酸中浸泡至少24小时的所有盖玻片(直径为24孔板15毫米) 偶尔晃动的水10分钟,清除所有残留的盐酸洗用微孔水冲洗排水关闭在95-98%的乙醇浸泡盖玻片用干净的纸巾将盖玻片上平板和空气干燥的盖玻片<l…

Discussion

早期的研究报告突触介导的转自由浮动总文化的成熟髓鞘的形成。这里描述的中枢神经系统的总文化系统在三个维聚集,与传统的2D文化便利,以促进细胞的发育,迁移和体外分化的分析相结合的无血清多能祖细胞的生长,可以修改系统和神经前体细胞神经胶质细胞相互作用的调查研究和。例如,如少突胶质祖细胞的转基因细胞5月2日被添加到总文化。如小胶质细胞和巨噬细胞或神?…

Acknowledgements

这项研究是由部分启动资金,从得克萨斯A&M大学

References

  1. Matthieu, J. M. Myelination in rat brain aggregating cell cultures. 神经科学. 3, 565-56 (1978).
  2. Chen, Y. i. n. g. Isolation and culture of rat and mouse oligodendrocyte precursor cells. Nat. Protocols. 2, 1044-10 (2007).
  3. Watkins, T. A., Emery, B., Mulinyawe, S., Barres, B. A. Distinct stages of myelination regulated by gamma-secretase and astrocytes in a rapidly myelinating CNS coculture system. Neuron. 60, 555-55 (2008).
  4. Svenningsen, A. F., Shan, W. e. i. -. S. o. n. g., Colman, D. a. v. i. d. R., Pedraza, L. i. l. i. a. n. a. Rapid method for culturing embryonic neuron-glial cell cocultures. Journal of Neuroscience Research. 72, 565-56 (2003).
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Cite This Article
Koito, H., Li, J. Preparation of Rat Brain Aggregate Cultures for Neuron and Glia Development Studies. J. Vis. Exp. (31), e1304, doi:10.3791/1304 (2009).

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