ニューロンとグリアの開発研究ラットの脳の集計文化の調製

Summary

胎児ラット脳の集合体の培養系のためのプロトコルが記述されています。凝集体の多能性前駆細胞は、開発し、神経細胞、アストロサイト、オリゴデンドロサイトに分化することができる。

Abstract

中枢神経系（CNS）における成熟した神経細胞とグリア細胞への反復する前駆細胞の発生や分化は、軸索 – グリア相互作用、多能性前駆細胞の性質と分化、およびオリゴデンドログリアの進行を調査する神経科学者のための強力なプラットフォームを提供することをin vitroの系細胞および分子レベルでの系統細胞。ここでは3-4週間に無血清培地に維持することができるとニューロン – グリア相互作用と中枢神経系の髄鞘形成を研究するモデルとして我々の研究室で使用されているラット胚のforebrains、からCNSの集合体培養系を説明します。このビデオクリップは、E16ラット脳からこれらのCNSの集合体の文化を分離し、成長させる方法を紹介します。さらに、同じ脳の解剖から、高濃縮レギュラー解離ニューロン培養を容易に得ることができると、様々な研究に使用CNSニューロンや他の細胞との共培養に使用されます。

Protocol

解剖前の準備 手術器具：オートクレーブによるすべての解剖はさみや鉗子を滅菌 カバーのクリーニング： 少なくとも24時間、33％塩酸で1L草のビーカー内のすべてのカバースリップを（24ウェルプレート用の直径15mm）をソークすべての残留HClを除去するために時折揺れで10分間流水で洗うミリポア水で洗い流してく?…

Discussion

初期の研究は、シナプスと回転を介したフリーフローティング集約文化¹の成熟したミエリンの形成を報告した。ここで説明CNSの集合体の培養系は、細胞の開発、マイグレーションおよびin vitroでの分化の解析を容易にするために、従来の2D文化の利便性を持つ三次元凝集体における多能性前駆細胞の無血清成長を兼ね備えています。システムは、神経前駆体のために修正…