Summary

Подготовка мозга крысы Совокупный культур для Нейрон и исследований Глия развития

Published: September 30, 2009
doi:

Summary

Протоколы для эмбрионального системы головного мозга крыс культуры агрегат описано. Мультипотентные прародителей в агрегаты могут развиваться и дифференцироваться в нейроны, астроциты и олигодендроциты.

Abstract

В пробирке системы, которая повторяет развитие и дифференциацию предшественников в зрелые нейроны и глия в центральной нервной системе (ЦНС) обеспечит мощную платформу для нейробиологов для расследования аксо-глиальных взаимодействий, свойства и дифференцировки мультипотентных предшественников, и прогрессирование олигодендроглиальных линии клеток при клеточном и молекулярном уровне. Мы описываем здесь культура ЦНС агрегатной системы из эмбриональных forebrains крыса, который может быть реализован в свободной от сыворотки среде до 3-4 недель, и используется в нашей лаборатории в качестве модели для изучения нейронных-глии взаимодействия и ЦНС миелинизации. Этот видеоклип будет показано, как изолировать и выращивать эти культуры ЦНС совокупности с E16 мозга крыс. Кроме того, из того же вскрытия головного мозга, обогащенного регулярные диссоциированных нейронов культуры могут быть легко получены и используются для различных исследований на ЦНС нейроны или использовать для со-культуры с другими клетками.

Protocol

Подготовка к диссекции Хирургические инструменты: стерилизовать все рассечение ножницами и щипцами в автоклаве Покровное очистки: Замочить всех покровных (15 мм в диаметре для 24-луночного планшета) в 1 л стакан травы на 33% HCl, по крайней мере…

Discussion

В ранних исследованиях сообщалось образование синапсов и зрелые миелина в ротации опосредованного свободное плавание культур совокупности 1. Культуры ЦНС совокупности системы, описанной здесь сочетаются бессывороточной роста мультипотентных клеток-предшественников в трехме?…

Acknowledgements

Это исследование было частично финансируется стартовый капитал из Техаса & M University

References

  1. Matthieu, J. M. Myelination in rat brain aggregating cell cultures. 神经科学. 3, 565-56 (1978).
  2. Chen, Y. i. n. g. Isolation and culture of rat and mouse oligodendrocyte precursor cells. Nat. Protocols. 2, 1044-10 (2007).
  3. Watkins, T. A., Emery, B., Mulinyawe, S., Barres, B. A. Distinct stages of myelination regulated by gamma-secretase and astrocytes in a rapidly myelinating CNS coculture system. Neuron. 60, 555-55 (2008).
  4. Svenningsen, A. F., Shan, W. e. i. -. S. o. n. g., Colman, D. a. v. i. d. R., Pedraza, L. i. l. i. a. n. a. Rapid method for culturing embryonic neuron-glial cell cocultures. Journal of Neuroscience Research. 72, 565-56 (2003).

Play Video

Cite This Article
Koito, H., Li, J. Preparation of Rat Brain Aggregate Cultures for Neuron and Glia Development Studies. J. Vis. Exp. (31), e1304, doi:10.3791/1304 (2009).

View Video