Summary

הכנת המוח עכברוש תרבויות מצטבר עבור Neuron ופיתוח מחקרים גליה

Published: September 30, 2009
doi:

Summary

פרוטוקולים עבור מערכת עובריים במוח חולדה המצרפי תרבות מתואר. אבות multipotent ב אגרגטים יכול לפתח להתמיין נוירונים, האסטרוציטים ו oligodendrocytes.

Abstract

במערכת במבחנה כי משחזר את התפתחות והתמיינות של אבות לתוך נוירונים בוגרים ו גליה במערכת העצבים המרכזית (CNS) תספק פלטפורמה חזקה עבור מדעני מוח כדי לחקור axo-גליה אינטראקציות, תכונות והבחנה של אבות multipotent, והתקדמות של oligodendroglial שושלת התאים ברמה תאית ומולקולרית. אנו מתארים כאן CNS תרבות המצרפי המערכת forebrains עוברי חולדה, אשר יכול להישמר בכל מדיום בסרום חופשי עד 3-4 שבועות, והוא משמש במעבדה שלנו כמודל ללמוד נוירון, גליה אינטראקציה myelination CNS. זה סרטון תדגים כיצד לבודד ולגדל אלה CNS תרבויות המצרפי מהמוח E16 חולדה. יתר על כן, מן לנתיחה אותו מוח, מועשר תרבויות קבוע העצבית ניתק ניתן להשיג בקלות המשמש במחקרים שונים על נוירונים במערכת העצבים המרכזית או המשמש שיתוף תרבויות עם תאים אחרים.

Protocol

הכנה לפני הניתוח כלים כירורגיים: לעקר כל מספריים לנתיחה ו מלקחיים על ידי החיטוי Coverslip ניקוי: משרים את כל coverslips (15mm בקוטר של צלחת 24 הי?…

Discussion

מחקרים מוקדמים דיווחו על היווצרות של הסינפסות המיאלין בוגרת ברוטציה בתיווך תרבויות חינם המצרפי צף 1. CNS תרבות המצרפי המערכת המתוארת כאן משלבת סרום ללא צמיחה של ובתאים multipotent בשלושה אגרגטים ממדי עם הנוחות של תרבויות מסורתיות 2D כדי להקל על ניתוח של התפתחות הנדידה…

Acknowledgements

המחקר מומן בחלקו על ידי סטארט כספים טקסס A & M University

References

  1. Matthieu, J. M. Myelination in rat brain aggregating cell cultures. 神经科学. 3, 565-56 (1978).
  2. Chen, Y. i. n. g. Isolation and culture of rat and mouse oligodendrocyte precursor cells. Nat. Protocols. 2, 1044-10 (2007).
  3. Watkins, T. A., Emery, B., Mulinyawe, S., Barres, B. A. Distinct stages of myelination regulated by gamma-secretase and astrocytes in a rapidly myelinating CNS coculture system. Neuron. 60, 555-55 (2008).
  4. Svenningsen, A. F., Shan, W. e. i. -. S. o. n. g., Colman, D. a. v. i. d. R., Pedraza, L. i. l. i. a. n. a. Rapid method for culturing embryonic neuron-glial cell cocultures. Journal of Neuroscience Research. 72, 565-56 (2003).
check_url/cn/1304?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Koito, H., Li, J. Preparation of Rat Brain Aggregate Cultures for Neuron and Glia Development Studies. J. Vis. Exp. (31), e1304, doi:10.3791/1304 (2009).

View Video