Herstellung von Ratten-Gehirn-Aggregate Kulturen für Neuron und Glia Development Studies
Summary
A-Protokolle für eine embryonale Rattenhirn Aggregat-Kultur-System beschrieben wird. Multipotente Vorläuferzellen in die Aggregate entwickeln können und differenzieren sich in Neuronen, Astrozyten und Oligodendrozyten.
Abstract
Eine In-vitro-System, rekapituliert die Entwicklung und Differenzierung von Vorläuferzellen zu reifen Neuronen und Gliazellen im zentralen Nervensystem (ZNS), wäre eine leistungsstarke Plattform für Neurowissenschaftler liefern zu axo-gliale Interaktionen, Eigenschaften und Differenzierung von multipotenten Vorläuferzellen, und das Fortschreiten der oligodendroglialen untersuchen Linie Zellen auf zellulärer und molekularer Ebene. Wir beschreiben hier eine ZNS-Aggregat-Kultur-System aus embryonalen Ratte Vorderhirn, die in einem Serum-freiem Medium gehalten werden können bis zu 3-4 Wochen und ist in unserem Labor als Modell zu Neuron-Glia-Interaktion und ZNS Myelinisierung Studie verwendet. Dieses Video wird gezeigt, wie zu isolieren und zu wachsen diese CNS aggregierten Kulturen aus E16 Rattenhirn. Ferner ist aus dem gleichen Gehirn Dissektion kann hochangereichertes regelmäßigen dissoziierten neuronalen Kulturen leicht erhalten werden und für verschiedene Studien über ZNS-Neuronen oder für Co-Kulturen mit anderen Zellen.
Protocol
Discussion
Frühe Studien berichteten Bildung von Synapsen und reife Myelin in Rotation vermittelte frei schwebenden aggregierten Kulturen 1. Das ZNS Aggregat-Kultur hier beschriebene System vereint serumfreies Wachstum von multipotenten Vorläuferzellen in dreidimensionalen Aggregaten mit dem Komfort der traditionellen 2D-Kulturen auf Analysen der Zell-Entwicklung, Migration und Differenzierung in vitro zu erleichtern. Das System kann modifiziert und für neurale Vorläuferzellen verwendet werden Stam…
Acknowledgements
Diese Studie wurde teilweise durch eine Anschubfinanzierung von der Texas A & M University finanziert
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