النقل إلى تسمية خلايا الورم PDX: إدخال فيروس العدسة التعبير عن علامة الفلورسنت في الخلية السرطانية في المختبر
Published: April 30, 2023
Abstract
المصدر: حنا، ج.، وآخرون. وضع العلامات على Xenografts المشتقة من سرطان الثدي مع المراسلين يمكن تتبعها لنمو الورم ودراسات الانبثاث. ج. فيس إكسب. (2016).
يصف الفيديو التالي تقنية النقل لتسمية (xenografts المشتقة من المريض) خلايا الورم PDX ، والتي تستخدم لإدخال الفيروس العدسي الذي يعبر عن البروتين الأخضر الفلوري ومراسلي لوسيفيراز في الخلية السرطانية في المختبر.
Protocol
1. تحويل خلايا الورم المشتقة من PDX فصل الطرد المركزي الخلايا السرطانية في 300 غرام × 5 دقائق وإعادة الإنفاق في 2 مل وسائل الإعلام ماموسفير. عد الخلايا القابلة للحياة باستخدام استبعاد تريبان الأزرق (Resuspend هضم الخلايا في 5 مل غسل العازلة والعد على حد سواء خلايا قابلة للحياة وغير قابلة للحيا?…
Representative Results
الشكل 1: تتبع كفاءة النقل في خلايا PDX المفككة. أ) الخلايا PDX-فصل المخصب للخلايا الظهارية البشرية (لين + استنفاد) 24 ساعة بعد النقل مع pSIH1-H1-copGFP-T2A-puro الجسيمات العدسية. ب) PDX-فصل الخلايا من تجربة منفصلة، دون إثراء الخلايا ال?…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Materials
| DMEM/F12 (1:1) | Hyclone | SH30023.01 | |
| bFGF | BD Biosciences | 354060 | |
| EGF | BD Biosciences | 354001 | |
| Heparin | Sigma | H4784 | |
| B27 | Gibco/Thermo Fisher | 17504-44 | |
| Anti-fungi-antibiotics | Hyclone | SV30010 | |
| HBSS Red Ca2+/Mg2+ free | Hyclone | SH30031.02 | |
| Hepes | |||
| Cultrex | Cultrex | 3433-005-01 | Basement Matrix Extract (BME) |
| 30 °C shaker | NewBrunswick Scientific CO. INC | Series 25 Incubator Shaker |
Citar este artículo
Transduction to Label PDX Tumor Cells: Introducing Lentivirus Expressing Fluorescent Marker into the Tumor Cell In Vitro. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20214, doi: (2023).