Трансдукция на этикетку PDX Опухолевые клетки: Введение лентивируса Экспрессия флуоресцентного маркера в опухолевых клеток в пробирке
Published: April 30, 2023
Abstract
Источник: Ханна, C., и др. Маркировка рака молочной железы пациента полученных Xenografts с отслеживаемыми репортерами для роста опухоли и метастазирования исследований. J. Vis. Exp. (2016).
Следующее видео описывает метод трансдукции для обозначения (пациент полученных ксенотрансплантов) опухолевых клеток PDX, который используется для введения лентивируса, выражающих зелено-флуоресцентный белок и люциферазы репортеров в опухолевых клетках in vitro.
Protocol
1. Трансдукция опухолевых клеток, полученных из PDX Центрифуга размежевыв опухолевые клетки при 300 г х 5 мин и ресуспен в 2 мл маммосферных средств массовой информации. Подсчитайте жизнеспособные клетки, используя trypan голубое исключение (Resuspend переваренные клетки в буфере мытья 5 мл и …
Representative Results
Рисунок 1: Отслеживание эффективности трансдукции в диссоциированных клетках PDX. A) PDX-диссоциированные клетки, обогащенные для эпителиальных клеток человека (истощение Лине) через 24 часа после трансдукции с pSIH1-H1-copGFP-T2A-puro le…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Materials
| DMEM/F12 (1:1) | Hyclone | SH30023.01 | |
| bFGF | BD Biosciences | 354060 | |
| EGF | BD Biosciences | 354001 | |
| Heparin | Sigma | H4784 | |
| B27 | Gibco/Thermo Fisher | 17504-44 | |
| Anti-fungi-antibiotics | Hyclone | SV30010 | |
| HBSS Red Ca2+/Mg2+ free | Hyclone | SH30031.02 | |
| Hepes | |||
| Cultrex | Cultrex | 3433-005-01 | Basement Matrix Extract (BME) |
| 30 °C shaker | NewBrunswick Scientific CO. INC | Series 25 Incubator Shaker |
Citar este artículo
Transduction to Label PDX Tumor Cells: Introducing Lentivirus Expressing Fluorescent Marker into the Tumor Cell In Vitro. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20214, doi: (2023).