マウスモデルにおける腸のティッシュエンジニアリング
Summary
この記事とそれに付随するビデオはオルガノイドユニットオン足場のアプローチを使用して、マウスにおける組織工学腸を生成するための我々のプロトコルを提示します。
Abstract
組織工学小腸（TESI）が正常に40日以内に術前の重みに戻り、その結果、大量の小腸切除後のルイスラットを救出するために使用されてきました。ヒトでは1、巨大小腸切除は、短腸症候群になる可能性があり、機能的な吸収不良非経口栄養依存性、肝不全や肝硬変、multivisceral臓器移植の必要性を含む重要な罹患率、死亡率、医療費を付与する。2本論文では状態、我々はマウスモデルにおける組織工学腸を作成するための我々のプロトコルを記述し、文書化多細胞オルガノイドユニットオン足場アプローチ。オルガノイドユニットは粘膜と間葉の両方の要素を含む腸由来の多細胞集合体、3腸管幹細胞ニッチを維持している間に関係があります。進行中および今後の研究では4日に私たちの技術の変遷マウスは、この種で利用可能なトランスジェニックのツールを利用することによってTESI形成の間に関与するプロセスの調査が可能になります。免疫不全マウス系統の5可用性はまた、私たちは人間の腸組織への技術を適用し、人間のTESIの形成を最適化することを許可しますヒトへの移行前にマウス異種移植。我々の手法は、すでに人間の患者での使用が承認された適正製造基準（GMP）の試薬および材料を採用していますので、脱細胞化された動物の組織に頼るのアプローチに比べて大きな利点を提供しています。このメソッドの究極の目標は、短腸症候群に対する再生医療の治療戦略としてのヒトへの翻訳である。
Protocol
Representative Results
Discussion
我々はオルガノイドユニットオン足場のアプローチを用いて、マウスにおける組織工学腸を製造するためのプロトコルを提示。最も重要なステップは、オルガノイドユニットの準備のものです。ケアを十分に清掃し、機械的に組織を処理するために注意しなければなりませんが、消化が行われた後、平等なケアを行う（ステップ1.11）オルガノイドユニットをoverdigestまたはovertriturateない?…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
トレイシーC. Grikscheit、エリック·R·バーセル、フレデリック·G·サラは、カリフォルニア再生医療研究所（CIRM）、助成番号RN2-00946から1（TCG）とTG2-01168（ERB、FGS）によってサポートされています。アリソン·L·シュペーアは大学外科エチコン学者の協会です。 Yashuhiro Torashimaは小児病院ロサンゼルスサバン研究所研究キャリア開発奨学金によって賄われています。
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
| HBSS | Gibco | 114170-112 | |
| Antibiotic-Antimycotic 100X | Invitrogen | 15240-062 | |
| Dispase | Gibco | 17105-041 | |
| Collagenase Type 1 | Worthington | LS004194 | |
| DMEM High Glucose 1X | Gibco | 11995-065 | |
| Heat inactivated FBS | Invitrogen | 16140-071 | |
| Biofelt 100% PGA | Concordia Medical | FELT01-1005 | For polymer preparation as in Ref. 4 |
| Poly-L-lactic acid | Durect | B6002-1 | For polymer preparation as in Ref. 4 |
| Type I Collagen, rat tail | Sigma-Aldrich | C3867-1VL | For polymer preparation as in Ref. 4 |
| Ketoprofen 100 mg/ml | Fort Dodge Animal Health | 71-KETOI-100-50 | |
| LabDiet 5001 rodent chow | LabDiet | 5001 | |
| Septra 200 mg / 40 mg per 5 ml, USP | Hi-Tech Pharmacal | 50383-824-16 | |
| Isoflurane, USP | Phoenix Pharmaceuticals | 57319-507-06 |
References
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