Questo articolo presenta un protocollo semplificato per stabilire un modello di pulpite nei topi utilizzando un innovativo bavaglio orale, seguito da una successiva analisi istologica.
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Articolo metodologico
Istituzione di un modello di esposizione alla polpa murina con un nuovo bavaglio orale per la ricerca sulla pulpite
In questo articolo
Sommario
Abstract
La pulpite, una causa comune di perdita naturale dei denti, porta alla necrosi e alla perdita di bioattività nella polpa dentale infiammata. Svelare i meccanismi alla base della pulpite e il suo trattamento efficace è un obiettivo costante della ricerca endodontica. Pertanto, comprendere il processo infiammatorio all'interno della polpa dentale è fondamentale per migliorare la conservazione della polpa. Rispetto ad altri esperimenti in vitro , un modello di pulpite murina offre un contesto più autentico e geneticamente diversificato per osservare la progressione patologica della pulpite. Tuttavia, l'uso dei topi, nonostante la loro economicità e accessibilità, pone difficoltà a causa delle loro piccole dimensioni, scarsa coordinazione e bassa tolleranza, complicando le procedure intraorali e dentistiche. Questo protocollo introduce un nuovo design e l'applicazione di un bavaglio per esporre la polpa di topo, facilitando procedure intraorali più efficienti. Il bavaglio, composto da un'arcata dentale prontamente disponibile per la maggior parte dei dentisti, può accelerare notevolmente la preparazione chirurgica, anche per le prime procedure. La micro-CT, la colorazione con ematossilina-eosina (HE) e la colorazione in immunofluorescenza sono state utilizzate per identificare i cambiamenti nella morfologia e nell'espressione cellulare. Lo scopo di questo articolo è quello di aiutare i ricercatori a stabilire una procedura più riproducibile e meno impegnativa per la creazione di un modello di infiammazione della polpa utilizzando questo nuovo bavaglio.
Introduzione
La polpa dentale, parte integrante del dente, è responsabile di molteplici funzioni essenziali come l'apporto di nutrienti, la formazione della dentina, la funzione sensoriale e le reazioni di difesa1. Tuttavia, la polpa dentale, circondata da tessuto duro, è suscettibile di lesioni e danni da carie profonde, pulpiti, traumi o terapie successive 2,3. L'assenza di polpa dentale funzionale aumenta il rischio di fragilità dei denti4. Inoltre, la perdita di vitalità della polpa nei denti permanenti giovani può influire negativamente sulla maturazione dei denti e le a....
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Protocollo
Le procedure sperimentali in questo studio sono state approvate dal comitato etico della West China School of Stomatology, Sichuan University (WCHSIRB-D-2021-125). I topi adulti C57BL/6 sono stati ottenuti dalla Gempharmatech Experimental Animals Company, Chengdu, Cina. L'intera corona del primo molare mascellare erutta 21 giorni dopo la nascita. I topi per l'intervento chirurgico dovrebbero avere più di 21 giorni con una vitalità normale11. Qui, per la modellazione venivano utilizzati topi di età compresa tra 6 e 8 settimane. La Figura 1 è un diagramma di flusso che mostra il protocollo utilizzato.
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Risultati
La procedura sopra descritta è stata eseguita sul primo molare mascellare destro di topi C57BL/6 di 3, 6-8 settimane, mentre i primi molari mascellari sinistri sono stati conservati come controllo. Per la dimostrazione sono stati utilizzati i risultati istologici e di immunofluorescenza del controllo in bianco, campioni di pulpite di 12 ore e pulpite di 24 ore.
Seguendo il protocollo di analisi TC di Goldman et al.15, l'esposizione alla polpa è stata confermata attraver.......
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Discussione
Essendo il tessuto molle solitario all'interno dei denti, la polpa dentale svolge un ruolo cruciale nel mantenimento della bioattività del dente, ma rimane altamente sensibile. La conservazione di questa polpa vitale è diventata l'approccio iniziale preferito nei recenti trattamenti endodontici, richiedendo una comprensione completa dei meccanismi infiammatori della polpa dentale16. La fluttuazione spazio-temporale del microambiente infiammatorio e le interazioni tra i tipi di cellule residenti ne.......
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Dichiarazioni
Gli autori dichiarano di non avere alcun conflitto di interessi.
Ringraziamenti
Questo studio è stato finanziato da sovvenzioni della National Natural Science Foundation of China U21A20368 (L. Y.), 82101000 (H. W.) e 82100982 (F. L.) e dal Sichuan Science and Technology Program 2023NSFSC1499 (H. W.). Tutti i dati e le immagini originali sono inclusi in questo documento.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Animale | |||
| C57/B6J topi | Gempharmatech Experimental Animals Company | C57/B6J | Per l'istituzione dell'esposizione alla polpa |
| Attrezzatura | |||
| 1 mL siringa | Chengdu Xinjin Shifeng Medical Apparatus & Strumenti Co. LTD. | SB1-074 (IV) | Applicare in iniezione di farmaci. |
| 8# C+ file | Readysteel | 0010047 | applicare nell'esposizione del tetto della camera pulpare. |
| Soluzione di miscela | 10% ketamina cloridrato + 5% xilazina + 85% soluzione salina isotonica sterile. | ||
| Soluzione colorante DAPI | Beyotime | C1005 | Applicare in colorazione in immunofluorescenza per la controcolorazione del nucleo. |
| Manipolo dentale dentale ad alta velocità | Jing yuan tecnologia di commercio elettronico | WJ-422 | Applicare nell'esposizione della polpa. |
| Tronchese pesante | Jirui Medical Instrument Co., Ltd. | nessuno | Applicare il taglio ad arco. |
| Kit per coloranti di ematossilina ed eosina | Biosharp | BL700B | Per l'analisi istologica dei vetrini. |
| Anticorpo IL-6 | Novus | NBP2-89149 | Applicare nella colorazione in immunofluorescenza per rilevare l'infiammazione della polpa dentale. |
| Ketamina (ketamina cloridrato) | Vet One, Boise, Idaho, USA | C3N VT1 | 100mg / kg, IP. Applicare nella nidificazione. |
| Rubinetto medico | 3M | 1530 | Applicare nell'immobilizzazione dei topi. |
| Filo dell'arco ortodontico | Shanghai Wei Rong Medical Apparatus Co., LTD. | K417 | Diametro di 8µ m |
| Fresa dentale rotonda (0,6 mm) | Shofu global | 072208 | Applicare per rimuovere lo smalto e lo strato superficiale di dentina. |
| Pinza piegatrice ad anello giovane | Jirui Medical Instrument Co., Ltd. | nessuno | Si applica nella piegatura ad arco. |
Riferimenti
- Kleinert, A., Kleinert, L., Ozimirska, M., Chałas, R. Endodontium - together or separately. Folia Morphol. 77 (3), 409-415 (2018).
- Dhillon, H., Kaushik, M., Sharma, R. Regenerative endodontics-Creating new horizons. J Biomed Mater Res B Appl Biomater. 104 (4), 676-685 (2016). ....
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Ristampe e permessi
