حقن الذباب Drosophila الكبار: طريقة لتسليم المركب أو التسمية

Abstract

المصدر: نازاريو تول, A. E., وو, L. P. تقييم الاستجابة المناعية الخلوية للذبابة الفاكهة, Drosophila melanogaster, باستخدام في فيفو Phagocytosis المقايسة. ج. فيس إكسب. (2019).

يصف هذا الفيديو كيفية إجراء حقنة من الذباب البالغ الحي ويتضمن بروتوكولا نموذجيا يتم فيه حقن الجسيمات المسماة والمثقب الأزرق في بطن الذبابة لتقصي داء البلعوس.

Protocol

هذا البروتوكول هو مقتطف من نازاريو تول وو ، وتقييم الاستجابة المناعية الخلوية لذبابة الفاكهة ، Drosophila melanogaster، باستخدام اختبار في Vivo Phagocytosis ، J. Vis. Exp. (2019). 1. إعداد جزيئات الفلورسين للحقن إعادة تشكيل 10 ملغ من جزيئات البكتيريا المتاحة تجاريا، قتل الحرارة الم…

Materials

5430-10 PicoNozzle Kit	World Precision Instruments	5430-10	Holder for 1.0mm pipette
E. coli (K-12 Strain) BioParticles, Fluorescein conjugate	Invitrogen	E2861	Killed E. coli labeled with FITC (Fluorescein). Use to test phagocyte recogntion and uptake of gram-negative bacteria. (~494/~518 nm)
Needle Pipette Puller	David Kopf Instruments	Model 725
Pneumatic PicoPump PV820	World Precision Instruments	SYS-PV820	The World Precision Instruments Pneumatic PicoPump PV820 uses differential pressures to hold liquid in the glass needle between injections. The user manually controls short bursts of gas pressure to expel the liquid – allowing delivery of sub-nanoliter volumes. The amount of liquid delivered depends on two main variables – the size of the glass needle opening and the amount of time injection pressure is applied. set the instrument to 100 ms "TIMED" mode.
Thin Wall Glass Capillaries	World Precision Instruments	TW100F-3	Needles for injection. OD = 1.0 mm
Trypan Blue Solution (0.4%)	Sigma	T8154	Used to quench extracellular fluorescence of Fluorescein, Alexa Fluor, or Texas Red labeled particles.