دروسوفيلا في فيفو تصوير الكالسيوم: طريقة للتصوير الوظيفي لنشاط الخلايا العصبية

Abstract

المصدر: هانكوك، C. E.، وآخرون في التصوير البصري للكالسيوم فيفو من اللدونة المتشابكة الناجمة عن التعلم في Drosophila melanogaster. ج. فيس إكسب. (2019).

يصف هذا الفيديو في تصوير الكالسيوم في الجسم الحي في الخلايا العصبية Drosophila باستخدام GCaMP. مقطع بروتوكول واردة يوضح كيفية تسجيل التغيرات في مضان GCaMP من الخلايا العصبية الجسم الفطر خلال تجربة تكييف الشم.

Protocol

هذا البروتوكول هو مقتطف من هانكوك وآخرون ،في تصوير الكالسيوم البصريفي فيفو لللدونة المتشابكة الناجمة عن التعلم في Drosophila melanogaster ، J. Vis. Exp. (2019).  1. في تصوير الكالسيوم في الجسم الحي استخدم مجهرا متعدد الفوتون مجهزا بالليزر بالأشعة تحت الحمراء وهدف غمر الما?…

Materials

1-Octen-3-ol	Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA	O5284	Chemical used as odorant
3-Octanol	Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA	218405	Chemical used as odorant
4-Methylcyclohexanol	Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA	153095	Chemical used as odorant
Bandpass filter for EGFP (525/50 nm)	Carl Zeiss Microscopy GmbH, Jena, Germany
Mineral oil	Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA	M8410	Used as diluent for odorants
Mode-locked Ti-Sapphire laser Chameleon Vision 2	Coherent Inc., Santa Clara, CA, USA		Tunable infrared femtosecond laser
Multiphoton Microscope LSM 7MP equipped with BiG detectors	Carl Zeiss Microscopy GmbH, Jena, Germany		Multiphoton microscope, multiple companies provide similar devices.
Plan-Apochromat 20x (NA = 1.0) water immersion objective	Carl Zeiss Microscopy GmbH, Jena, Germany	421452-9900-000	Objective W "Plan-Apochromat" 20x/1.0 DIC M27 70mm
Visual Basics of Applicatons (VBA) software to receive a trigger from the odor-delivery device and the electric shock application device (power supply) to interact with the ZEN software from Zeiss that controls the microscope	Custom-written and available upon request	n.a.	n.a.