드로소필라 인 비보 칼슘 이미징: 신경 활동의 기능적 이미징 방법

Abstract

출처: 핸콕, C. E., 외. 드로소필라 멜라노가스터에서학습 유도 시냅스 가소성의 생체 내 광학 칼슘 이미징. J. 비스 익스펙. (2019).

이 비디오는 GCaMP를 사용하여 Drosophila 뉴런에서 생체 내 칼슘 이미징에서 설명합니다. 추천 프로토콜 클립 후각 컨디셔닝 실험 중 버섯 신체 뉴런에서 GCaMP 형광의 변화를 기록하는 방법을 보여줍니다.

Protocol

이 프로토콜은 핸콕 외에서 발췌, 드로소필라 멜라노가스터에서 학습 유도 시냅스 가소성의생체 내 광학 칼슘 이미징, J. Vis. Exp. (2019).  1. 생체 내 칼슘 이미징 적외선 레이저와 진동 격리 테이블에 설치된 물 침지 목표(재료 표참조)가 장착된 다광 현미경을 사용합니다. GFP 기반 칼슘 지표의 시각화를 위해 레이저를 920 nm의 난분 파장?…

Materials

1-Octen-3-ol	Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA	O5284	Chemical used as odorant
3-Octanol	Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA	218405	Chemical used as odorant
4-Methylcyclohexanol	Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA	153095	Chemical used as odorant
Bandpass filter for EGFP (525/50 nm)	Carl Zeiss Microscopy GmbH, Jena, Germany
Mineral oil	Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA	M8410	Used as diluent for odorants
Mode-locked Ti-Sapphire laser Chameleon Vision 2	Coherent Inc., Santa Clara, CA, USA		Tunable infrared femtosecond laser
Multiphoton Microscope LSM 7MP equipped with BiG detectors	Carl Zeiss Microscopy GmbH, Jena, Germany		Multiphoton microscope, multiple companies provide similar devices.
Plan-Apochromat 20x (NA = 1.0) water immersion objective	Carl Zeiss Microscopy GmbH, Jena, Germany	421452-9900-000	Objective W "Plan-Apochromat" 20x/1.0 DIC M27 70mm
Visual Basics of Applicatons (VBA) software to receive a trigger from the odor-delivery device and the electric shock application device (power supply) to interact with the ZEN software from Zeiss that controls the microscope	Custom-written and available upon request	n.a.	n.a.