الهرمونات النباتية خلال رصد استجابات التوتر
Summary
وهناك طريقة بسيطة تسمح لاستخراج السريعة وتحليل الهرمونات النباتية متعددة من عينات الأنسجة الصغيرة. يستخدم الإجراء استخراج بخار المرحلة كخطوة تنقية الرسمي. ويتم تحليل العينات بواسطة أيونات + GC / MS مع التأين الكيميائية التي تنتج أساسا (M +1).
Abstract
الهرمونات النباتية والمركبات المتصلة يشير تلعب دورا هاما في تنظيم استجابات النبات للمحفزات البيئية المختلفة والضغوط. بين الضغوط الشديدة والحشرات بالأعشاب ، وعدوى للمرض ، والإجهاد الجفاف. لكل من هذه الضغوط مجموعة معينة من الهرمونات و / أو خليط منها ومن المعروف أن ردود صقل ، وبالتالي ضمان بقاء النبات. الهرمونات الرئيسية المشاركة في تنظيم هذه الردود هي حمض jasmonic (JA) ، وحمض الصفصاف (SA) ، وحمض الأبسيسيك (ABA). إلى فهم أفضل لدور الهرمونات الفردية ، وكذلك تفاعلها المحتملة خلال هذه الاستجابات من الضروري رصد التغيرات في وفرة في زمنية وكذلك بطريقة المكانية. لالكمي سهلة وحساسة واستنساخه من هذه الإشارات وغيرها من المركبات طورنا طريقة القائمة على استخراج مرحلة البخار واللوني للغاز / قياس الطيف الكتلي (GC / MS) التحليل (1 ، 2 ، 3 ، 4). بعد استخراج هذه المركبات من الأنسجة النباتية المائية الحمضية 1 – بروبانول مختلطة مع ثنائي كلورو ميثان حمض الكربوكسيلية هي المحتوية على مركبات ميثليته ، تتطاير تحت حرارة ، والتي تم جمعها على الماصة البوليمرية. بعد شطف إلى قارورة العينة يتم فصل analytes اللوني بواسطة الغاز والكشف عنها بواسطة التأين الكيميائي مطياف الكتلة. استخدام المعايير الداخلية المناسبة ثم يسمح لتقدير بسيط من المجالات المتعلقة ذروة قياسية الحليلة والداخلية.
Protocol
Discussion
قدم الأسلوب هنا ثبت للعمل بشكل صحيح لمجموعة واسعة من المركبات النباتية إشارة بشرط أن يكون حجم وطبيعة المواد الكيميائية للمركب لا يمنع من استخراج ، ميثليته ، وتبخيرها. أيضا ، فإن الإجراء مثيلة كما هو وصفها هنا ليست الطريقة الوحيدة لderivatization. ويمكن Silyllation أستلة من الطرق…
References
- Schmelz, E. A., Engelberth, J., Tumlinson, J. H., Alborn, H. T. The use of vapor phase extraction in metabolic profiling of phytohormones and other metabolites. Plant Journal. 39, 790-808 (2004).
- Engelberth, J., Alborn, H. T., Schmelz, E. A., Tumlinson, J. H. Airborne signals prime plants against insect herbivore attack. PNAS. 101, 1781-1785 (2004).
- Schmelz, E. A., Engelberth, J., Alborn, H. T., O´, D. o. n. n. e. l., Sammons, P., Toshima, M., H, J. H. T. u. m. l. i. n. s. o. n. Simultaneous analysis of phytohormones, phytotoxins, and volatile organic compounds in plants. PNAS. 100, 10552-10557 (2003).
- Engelberth, J., Schmelz, E. A., Alborn, H., Cardoza, Y. J., Huang, J., Tumlinson, J. H. Simultaneous Quantification of Jasmonic acid and Salicylic acid by Vapor Phase Extraction and Gas Chromatography – Chemical Ionization-Mass Spectrometry. Analytical Biochemistry. 312, 242-250 (2003).
