植物激素在应激反应监测

Summary

提供一个简单的方法是，允许小组织样本的多种植物激素的快速提取和分析。该程序使用气相萃取庄严的纯化步骤。 GC / MS化学电离主要生产（M +1）+离子的样品进行了分析。

Abstract

在植物响应各种环境刺激和压力调节植物激素和相关的信令化合物发挥了重要作用。其中最严重的应力是昆虫的取食，病原体的感染，干旱胁迫。对于其中的每一个讲一套特定的激素和/或组合被称为微调的反应，从而保证植物的生存。在这些反应的调控涉及的主要激素是茉莉酸（JA），水杨酸（SA）和脱落酸（ABA）。为了更好地理解个人激素的作用以及他们潜在的相互作用在这些反应，这是必要的，在一个时间以及空间的方式来监测其丰度的变化。对于这些和其他信号的化合物容易，灵敏度高，重现性好量化，我们开发了基于汽相萃取和气相色谱/质谱（GC / MS）分析（1，2，3，4）的方法。这些化合物从植物组织中提取的酸性水溶液后，1 – 丙醇与二氯甲烷混合羧酸化合物的甲基化，高温下挥发，在高分子吸水收集。后成样品瓶洗脱分析物是通过气相色谱分离和化学电离质谱检测。然后使用适当的内部标准，允许有关分析物和内标峰面积的简单量化。

Protocol

首先，我们需要准备提取2毫升螺丝帽小瓶：加入400ul提取缓冲液（1 – 丙醇：水：浓盐酸2:1:0.002卷/体积/体积）和10μL各自的内部标准（10ng/μl ）一小瓶。在液氮中冷冻，然后添加的陶瓷珠。 添加植物材料（50至200毫克），而小瓶仍然定位在液氮。需要注意的是要估计的进一步处理之前，以便精确量化，这是基于对鲜重后，添加植物材料的重量。 确保所有的液氮蒸发前紧紧地关闭第小瓶。请注意?…

Discussion

这里介绍的方法已被证明了植物信号的大小和被提取，甲基化，而蒸发的化合物的化学性质并不妨碍它的化合物广泛可靠的工作。此外，甲基化过程，因为它是本文所述，是不是衍生化的唯一途径。 Silyllation和乙酰化的替代方法和协议，可以很容易地在网上找到。

如果不能够监测记录在运行过程中应仅限于从过程中排除太多不必要的离子质量范围内的单离子质谱仪。例如，?…