스트레스 응답하는 동안 식물 호르몬을 모니터링
Summary
간단한 방법이 작은 조직 샘플에서 여러 식물 호르몬의 급격한 추출 및 분석을위한 허용 제공됩니다. 절차는 엄숙한 정화 단계로 증기 위상 추출을 사용합니다. 샘플은 GC / 주로 생산하는 화학 이온화 (M +1)과 MS + 이온에 의해 분석됩니다.
Abstract
식물 호르몬 및 관련 신호 화합물은 다양한 환경 자극과 스트레스에 식물 반응의 조절에 중요한 역할을한다. 가장 심각한 스트레스 중 곤충 herbivory, 병원체 감염과 가뭄 스트레스 있습니다. 이러한 각함으로써 식물의 생존을 보장 그것의 조정 반응하는 것으로 알려져 있습니다 특정 호르몬의 설정 및 / 또는 조합을 강조하십시오. 이러한 반응의 규정에 관련된 주요 호르몬은 jasmonic 산성 (JA), 살리실산 (SA), 그리고 아브 산성 (ABA)입니다. 더 시간적뿐만 아니라 공간적 패션 그들의 풍부한 변화를 모니터링하는 개인 호르몬뿐만 아니라 그것이 필요합니다 이러한 반응 중에 잠재적인 상호 작용의 역할을 이해한다. 이러한 다른 신호 화합물의 쉬운 민감한 및 재현성 부량 위해 우리는 증기 위상 추출 및 가스 크로마 토그래피 / 질량 분석계 (GC / MS) 분석 (1, 2, 3, 4)에 따라 방법을 개발했습니다. 산성 수성하여 식물 조직에서 이러한 화합물을 추출 후 1 프로파놀는 dichloromethane와 혼합 카르복실산 함유 화합물은, methylated 열 아래 volatilized 및 고분자 흡착제에서 수집하고 있습니다. 샘플 약병에 용출 후 analytes는 가스 크로마 토그래피로 구분되며 화학적 이온화 질량 분광법에 의해 감지. 적절한 내부 표준의 사용은 다음 analyte 및 내부 표준의 최대 영역을 관련된하여 간단한 부량 수 있도록합니다.
Protocol
Discussion
방법은 크기와 화합물의 화학적 특성이 추출 methylated, 그리고 증발되지 않도록하지 않습니다 제공하는 식물 신호 화합물의 다양한위한 안정적으로 작동하도록 입증되었습니다 여기를 발표했다. 또한, 그것이 본 설명으로 methylation 절차는 derivatization의 유일한 방법은 아니다. Silyllation 및 아세틸화 대체 방법과 프로토콜을하는 것은 쉽게 온라인으로 찾을 수 있습니다.
질…
References
- Schmelz, E. A., Engelberth, J., Tumlinson, J. H., Alborn, H. T. The use of vapor phase extraction in metabolic profiling of phytohormones and other metabolites. Plant Journal. 39, 790-808 (2004).
- Engelberth, J., Alborn, H. T., Schmelz, E. A., Tumlinson, J. H. Airborne signals prime plants against insect herbivore attack. PNAS. 101, 1781-1785 (2004).
- Schmelz, E. A., Engelberth, J., Alborn, H. T., O´, D. o. n. n. e. l., Sammons, P., Toshima, M., H, J. H. T. u. m. l. i. n. s. o. n. Simultaneous analysis of phytohormones, phytotoxins, and volatile organic compounds in plants. PNAS. 100, 10552-10557 (2003).
- Engelberth, J., Schmelz, E. A., Alborn, H., Cardoza, Y. J., Huang, J., Tumlinson, J. H. Simultaneous Quantification of Jasmonic acid and Salicylic acid by Vapor Phase Extraction and Gas Chromatography – Chemical Ionization-Mass Spectrometry. Analytical Biochemistry. 312, 242-250 (2003).
