جيل من الماموسفير الأولية: تقنية لتحديد قوة الخلية
Published: April 30, 2023
Abstract
المصدر: لومباردو وآخرون.، ماموسفير تشكيل المقايسة من أنسجة سرطان الثدي البشري وخطوط الخلية. (2015).
يصف هذا الفيديو عزل الخلايا الجذعية السرطانية عن خطوط خلايا سرطان الثدي. نحن نزرع هذه الخلايا الجذعية السرطانية لتوليد الماموسفير الأولي لتقييم التجديد الذاتي وحساب كفاءة تشكيل الكرة ، مما يسمح بالمقارنة عبر كثافات البذر المختلفة.
Protocol
1. جيل من الماموسفير الأولية من خطوط خلايا سرطان الثدي البشري ملاحظة: تنفيذ الخطوات التالية تحت غطاء محرك السيارة ثقافة معقمة. إعداد وسائل الإعلام الماموسفير التي تحتوي على DMEM/F12 تكملها مع 2 MM L-الجلوتامين, 100 U/ml البنسلين, 100 U/ml streptomycin. إعداد وسائل الإعلام كاملة م?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| DMEM/F12 | Lonza | CC-3151 | |
| 2 mM L-glutamine | Sigma Aldrich | G8540 | |
| 100 U/ml Penicillin & Streptomycin | Sigma Aldrich | P4083 | |
| 20 ng/ml Recombinant human epidermal growth factor (EGF) | Sigma Aldrich | E9644 | |
| 20 ng/ml Recombinant human basic fibroblast growth factor (bFGF) | R&D systems | 233-FB-025 | |
| 1x B27 supplement | Invitrogen | 17504-044 | |
| Phosphate buffered saline (PBS) | Thermo Scientific | 12399902 | |
| 0.5% trypsin/0.2% EDTA | Sigma Aldrich | 59418C | |
| Fetal calf serum | First Link UK | 02-00-850 | |
| Trypan blue | Sigma Aldrich | 93595 | |
| Low attachment 6-well plates | Corning | CLS3814 |
Cite This Article
Generation of Primary Mammospheres: A Technique to Determine Cell Potency. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20211, doi: (2023).