Summary

وظيفية تقييم الحركة المعوية والتهاب الأمعاء الجدار في القوارض: التحليلات في نموذج موحد من التلاعب المعوية

Published: September 11, 2012
doi:

Summary

علوص ما بعد الجراحة (POI) هي مضاعفات عملية جراحية في البطن مما يؤدي إلى زيادة معدلات الاعتلال والبقاء في المستشفى لفترات طويلة. لأن استراتيجيات وقائية أو علاجية تعاني من نقص البحوث المكثفة ضرورية. أنشئت لذلك لدينا نموذج الفأر موحدة وقابلة للتحقيق في الفيزيولوجيا المرضية لPOI ودراسة الخيارات العلاجية المحتملة.

Abstract

التهاب القناة الهضمية هو السبب الشائع لمجموعة متنوعة من الأمراض التي تصيب الإنسان. نماذج البحوث الحيوانية حاسمة في التحقيق في مجمع الخلوية والجزيئية علم الأمراض المعوية. على الرغم من أن الغشاء المخاطي الغلالة وغالبا ما يكون الجهاز من الاهتمام في العديد من الأمراض الالتهابية، والأعمال الأخيرة أثبتت أن الظاهرة العضلية (ME) هو أيضا جهازا مناعيا للغاية التي تؤوي شبكة كثيفة من immunocytes المقيمين. 1،2 أجريت هذه الأعمال ضمن موحدة نموذج للتلاعب المعوية (IM) الذي يؤدي إلى التهاب في جدار الأمعاء، وتقتصر أساسا إلى ME. سريريا هذا الالتهاب يؤدي إلى الأمعاء لفترة طويلة dysmotility، والمعروفة باسم علوص ما بعد الجراحة (POI) والذي هو اختلاط متكررة والتي لا يمكن تجنبها بعد عملية جراحية في البطن. 3 ويتميز التهاب تحرير سطاء proinflammatory مثل IL-6 4 أو الناقلات العصبية IL-1β أو المثبطة مثل nitriج أكسيد (NO) .. 5 وفي وقت لاحق، وأرقام هائلة من immunocytes يتسرب إلى ME، التي يسيطر عليها العدلات النوى (السوداء) وحيدات والحفاظ أخيرا POI .. 2 دائم لعدة أيام، وهذا يؤدي إلى شلل الأمعاء زيادة خطر الطموح، إزفاء البكتيرية والمضاعفات المعدية حتى تعفن الدم والفشل العضوي المتعدد ويسبب عبئا عالية الاقتصادية .. 6

في هذا المخطوط أن نبرهن على نموذج موحد للتقييم في IM والجسم الحي العبور المعوي (GIT) والعبور القولون. وعلاوة على ذلك نحن يبرهن على وجود طريقة لفصل لي من الغشاء المخاطي تليها الغلالة تحليل المناعية، وهو أمر حاسم للتمييز بين الاستجابات الالتهابية في كل من هذه المقصورات immunoactive غاية جدار الامعاء. جميع التحليلات بسهولة نقلها إلى أي نماذج بحثية أخرى، مما يؤثر على وظيفة الجهاز الهضمي.

Protocol

1. الحيوانات تم الحصول على الذكور C57Bl6 / J الفئران مع متوسط ​​وزن 25 غ من فينكلمان من هارلان (Borchen، ألمانيا). أجريت جميع التجارب وفقا للقانون الاتحادي بشأن حماية الحيوانات. وتلت مبادئ الرعاية الحيوانية المعملية. واستمرت الحيوانات على …

Discussion

كشفت دراسة مقارنة وتحليل مستويات مختلفة من IM (صغير اندحاق الامعاء لمدة 10 دقيقة مقابل بلطف التفتيش في الأمعاء الدقيقة باستخدام القطن تطبيقها مقابل اثنين IM مع إخلاء محتوى الأمعاء الدقيقة في الأعور) وجود علاقة بين مدى التلاعب الجراحية وPOI. مقارنة مع المجموعات الأخرى IM أ…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

وأيد هذا العمل من المنح المقدمة من جمعية الألمانية للبحوث (KA1270/3-1/2) وBONFOR (O-112.0040).

Materials

Name of the reagent/Equipment Company Catalogue number
Ethilon 5/0 Ethicon 1666H
Cotton applicators MaiMed 71010
arterial catheter Vygon 115-798
96 well plate (black) Greiner Bio One 655096
glass ball (2 mm diameter) Worf available on request
Insect pins Fine Science Tools 26000-25
Hanker Yates Reagent Polyscience 560694
Aquatek Merck HC109850
DMEM Lonza BE12-604 F
FITC-dextran (MW 70000) Sigma Aldrich 46945-500MG-F

References

  1. Wehner, S., Behrendt, F. F., Lyutenski, B. N., Lysson, M., Bauer, A. J., Hirner, A., Kalff, J. C. Inhibition of macrophage function prevents intestinal inflammation and postoperative ileus in rodents. Gut. 56, 176-185 (2007).
  2. Kalff, J. C., Schwarz, N. T., Walgenbach, K. J., Schraut, W. H., Bauer, A. J. Leukocytes of the intestinal muscularis: their phenotype and isolation. J. Leukoc. Biol. 63, 683-691 (1998).
  3. Kehlet, H. Postoperative ileus. Gut. 47, iv85-iv86 (2000).
  4. Wehner, S., Schwarz, N. T., Hundsdoerfer, R., Hierholzer, C., Tweardy, D. J., Billiar, T. R., Bauer, A. J., Kalff, J. C. Induction of IL-6 within the rodent intestinal muscularis after intestinal surgical stress. Surgery. 137, 436-446 (2005).
  5. Kalff, J. C., Schraut, W. H., Billiar, T. R., Simmons, R. L., Bauer, A. J. Role of inducible nitric oxide synthase in postoperative intestinal smooth muscle dysfunction in rodents. Gastroenterology. 118, 316-327 (2000).
  6. Iyer, S., Saunders, W. B., Stemkowski, S. Economic burden of postoperative ileus associated with colectomy in the United States. J. Manag. Care Pharm. 15, 485-494 (2009).
  7. Miller, M. S., Galligan, J. J., Burks, T. F. Accurate measurement of intestinal transit in the rat. J. Pharmacol. Methods. 6, 211-217 (1981).
  8. Kalff, J. C., Schraut, W. H., Simmons, R. L., Bauer, A. J. Surgical manipulation of the gut elicits an intestinal muscularis inflammatory response resulting in postsurgical ileus. Ann. Surg. 228, 652-663 (1998).
  9. Wehner, S., Straesser, S., Vilz, T. O., Pantelis, D., Sielecki, T., de lC, V., Hirner, A., Kalff, J. C. Inhibition of p38 mitogen-activated protein kinase pathway as prophylaxis of postoperative ileus in mice. Gastroenterology. 136, 619-629 (2009).
  10. Konigsrainer, I., Turck, M. H., Eisner, F., Meile, T., Hoffmann, J., Kuper, M., Zieker, D., Glatzle, J. The Gut is not only the Target but a Source of Inflammatory Mediators Inhibiting Gastrointestinal Motility During Sepsis. Cell Physiol. Biochem. 28, 753-760 (2011).
  11. Schwarz, N. T., Kalff, J. C., Turler, A., Speidel, N., Grandis, J. R., Billiar, T. R., Bauer, A. J. Selective jejunal manipulation causes postoperative pan-enteric inflammation and dysmotility. Gastroenterology. 26, 159-169 (2004).
  12. Engel, D. R., Koscielny, A., Wehner, S., Maurer, J., Schiwon, M., Franken, L., Schumak, B., Limmer, A., Sparwasser, T., Hirner, A. T helper type 1 memory cells disseminate postoperative ileus over the entire intestinal tract. Nat. Med. , (2010).
  13. Stoffels, B., Schmidt, J., Nakao, A., Nazir, A., Chanthaphavong, R. S., Bauer, A. J. Role of interleukin 10 in murine postoperative ileus. Gut. 58, 648-660 (2009).
check_url/4086?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Vilz, T. O., Overhaus, M., Stoffels, B., Websky, M. v., Kalff, J. C., Wehner, S. Functional Assessment of Intestinal Motility and Gut Wall Inflammation in Rodents: Analyses in a Standardized Model of Intestinal Manipulation. J. Vis. Exp. (67), e4086, doi:10.3791/4086 (2012).

View Video