Bağırsak Manipülasyon bir Standart Model Analizleri: Kemirgenler Barsak Motilite ve Gut Duvar İnflamasyon İşlevsel Değerlendirilmesi
Summary
Postoperatif ileus (POI) artmış morbidite ve uzamış hastanede kalış yol abdominal cerrahi bir komplikasyonudur. Profilaktik veya terapötik stratejiler yoğunlaştırılmış araştırma yokluğu nedeniyle gereklidir. Bu nedenle İÇN patofizyolojisi araştırmak ve olası tedavi seçenekleri incelemek için bir standart ve uygulanabilir fare modeli kurulmuştur.
Abstract
Gastrointestinal sistemin iltihaplanması, insan hastalıklarının bir dizi için yaygın nedenlerinden biridir. Hayvan araştırma modelleri intestinal patoloji hücresel karmaşık ve moleküler soruşturmada kritik önem taşımaktadır. Tunika mukoza muskularis eksterna (ME) ayrıca, yerleşik immunocytes yoğun bir ağ barındırdığı bir çok immün organı olduğunu genellikle birçok inflamatuar hastalıklar, ortaya yeni eserler ilgi organlardan biri olmasına rağmen. 1,2 Bu eserler standardize içinde yapıldı ağırlıklı ME sınırlı, barsak duvarında inflamasyona neden olur bağırsak manipülasyon modeli (IM). Inflamasyon IL-6 4 veya IL-1β veya inhibitör nörotransmitter gibi proinflamatuar mediatörlerin kurtuluşu ile karakterize klinik bu iltihap karın cerrahisi sonrası sık ve kaçınılmaz bir komplikasyondur postoperatif ileus (POI) olarak bilinen uzun süreli bağırsak dismotilite,. 3 yol açar nitri gibic oksit (NO). 5 Akabinde, immunocytes muazzam sayıda polimorfonükleer nötrofiller (PMN) ve monositler tarafından hakim, ME içine extravasate ve nihayet POI korumak. gün süren 2, bu bağırsak felci aspirasyonu riski, bakteriyel translokasyon yol açar ve sepsis ve multi organ yetmezliğine kadar komplikasyonlar enfeksiyon ve yüksek bir ekonomik yük getirmektedir. 6
Bu yazıda IM ve gastrointestinal geçiş (GYTE) ve kolonik transit vivo değerlendirilmesinde standart modelini göstermektedir. Ayrıca biz bu son derece immunoactive barsak duvarında bölümlerinde hem inflamatuvar yanıtları ayırt etmek önemlidir immünolojik analizi takiben tunika mukoza gelen ME ayrılması için bir yöntem gösterilmektedir. Tüm analizler gastrointestinal fonksiyon etkileyen, kolayca herhangi bir diğer araştırma modelleri devredilemez.
Protocol
Discussion
IM (10 dk karşı yavaşça çekum içine ince bağırsak içeriğinin boşaltılması ile IM karşı iki pamuk aplikatör kullanarak ince barsak muayene için ince barsak evantrasyonu) farklı düzeylerde analiz karşılaştırmalı bir çalışmada cerrahi manipülasyon ve İÇN ölçüde arasında bir korelasyon saptandı. IM uzun süreli ve şiddetli POI sonuçlanan ME (PNMs, makrofajlar ve mast hücreleri) lökositlerin yüksek miktarda gösterdi. 8 diğer gruplar ile karşılaştırıldığında.
<p…Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Bu çalışma Deutsche Forschungsgemeinschaft (KA1270/3-1/2) ve BONFOR (O-112,0040) hibe tarafından desteklenmiştir.
Materials
| Name of the reagent/Equipment | Company | Catalogue number |
| Ethilon 5/0 | Ethicon | 1666H |
| Cotton applicators | MaiMed | 71010 |
| arterial catheter | Vygon | 115-798 |
| 96 well plate (black) | Greiner Bio One | 655096 |
| glass ball (2 mm diameter) | Worf | available on request |
| Insect pins | Fine Science Tools | 26000-25 |
| Hanker Yates Reagent | Polyscience | 560694 |
| Aquatek | Merck | HC109850 |
| DMEM | Lonza | BE12-604 F |
| FITC-dextran (MW 70000) | Sigma Aldrich | 46945-500MG-F |
References
- Wehner, S., Behrendt, F. F., Lyutenski, B. N., Lysson, M., Bauer, A. J., Hirner, A., Kalff, J. C. Inhibition of macrophage function prevents intestinal inflammation and postoperative ileus in rodents. Gut. 56, 176-185 (2007).
- Kalff, J. C., Schwarz, N. T., Walgenbach, K. J., Schraut, W. H., Bauer, A. J. Leukocytes of the intestinal muscularis: their phenotype and isolation. J. Leukoc. Biol. 63, 683-691 (1998).
- Kehlet, H. Postoperative ileus. Gut. 47, iv85-iv86 (2000).
- Wehner, S., Schwarz, N. T., Hundsdoerfer, R., Hierholzer, C., Tweardy, D. J., Billiar, T. R., Bauer, A. J., Kalff, J. C. Induction of IL-6 within the rodent intestinal muscularis after intestinal surgical stress. Surgery. 137, 436-446 (2005).
- Kalff, J. C., Schraut, W. H., Billiar, T. R., Simmons, R. L., Bauer, A. J. Role of inducible nitric oxide synthase in postoperative intestinal smooth muscle dysfunction in rodents. Gastroenterology. 118, 316-327 (2000).
- Iyer, S., Saunders, W. B., Stemkowski, S. Economic burden of postoperative ileus associated with colectomy in the United States. J. Manag. Care Pharm. 15, 485-494 (2009).
- Miller, M. S., Galligan, J. J., Burks, T. F. Accurate measurement of intestinal transit in the rat. J. Pharmacol. Methods. 6, 211-217 (1981).
- Kalff, J. C., Schraut, W. H., Simmons, R. L., Bauer, A. J. Surgical manipulation of the gut elicits an intestinal muscularis inflammatory response resulting in postsurgical ileus. Ann. Surg. 228, 652-663 (1998).
- Wehner, S., Straesser, S., Vilz, T. O., Pantelis, D., Sielecki, T., de lC, V., Hirner, A., Kalff, J. C. Inhibition of p38 mitogen-activated protein kinase pathway as prophylaxis of postoperative ileus in mice. Gastroenterology. 136, 619-629 (2009).
- Konigsrainer, I., Turck, M. H., Eisner, F., Meile, T., Hoffmann, J., Kuper, M., Zieker, D., Glatzle, J. The Gut is not only the Target but a Source of Inflammatory Mediators Inhibiting Gastrointestinal Motility During Sepsis. Cell Physiol. Biochem. 28, 753-760 (2011).
- Schwarz, N. T., Kalff, J. C., Turler, A., Speidel, N., Grandis, J. R., Billiar, T. R., Bauer, A. J. Selective jejunal manipulation causes postoperative pan-enteric inflammation and dysmotility. Gastroenterology. 26, 159-169 (2004).
- Engel, D. R., Koscielny, A., Wehner, S., Maurer, J., Schiwon, M., Franken, L., Schumak, B., Limmer, A., Sparwasser, T., Hirner, A. T helper type 1 memory cells disseminate postoperative ileus over the entire intestinal tract. Nat. Med. , (2010).
- Stoffels, B., Schmidt, J., Nakao, A., Nazir, A., Chanthaphavong, R. S., Bauer, A. J. Role of interleukin 10 in murine postoperative ileus. Gut. 58, 648-660 (2009).
