Summary

D'évaluation fonctionnelle de la motilité intestinale et inflammation de la paroi intestinale chez les rongeurs: analyses dans un modèle standardisé de la manipulation intestinale

Published: September 11, 2012
doi:

Summary

Iléus postopératoire (POI) est une complication de la chirurgie abdominale conduisant à une morbidité accrue et un séjour prolongé à l'hôpital. Parce que les stratégies prophylactiques ou thérapeutiques font défaut intensification de la recherche est nécessaire. Par conséquent, nous avons établi un modèle de souris standard et possible d'étudier la physiopathologie de POI et d'étudier les options possibles thérapeutiques.

Abstract

L'inflammation du tube digestif est un motif fréquent pour une variété de maladies humaines. Modèles de recherche animale sont essentielles dans l'étude du complexe cellulaire et moléculaire de la pathologie intestinale. Bien que la muqueuse est souvent l'organe d'intérêt dans de nombreuses maladies inflammatoires, des travaux récents ont montré que la musculeuse externe (ME) est également un organe hautement immunocompétent qui abrite un réseau dense de immunocytes résidents. 1,2 Ces travaux ont été effectués au sein de l'standardisé modèle de manipulation intestinale (GI) qui mène à l'inflammation de la paroi intestinale, essentiellement limitée à la ME. Sur le plan clinique, cette inflammation entraîne troubles de la motilité intestinale prolongée, connu sous le nom iléus postopératoire (POI), qui est une complication fréquente et inévitable après une chirurgie abdominale. 3 L'inflammation est caractérisée par la libération de médiateurs pro-inflammatoires telles que l'IL-6 4 ou d'IL-1β neurotransmetteurs inhibiteurs ou comme nitric azote (NO). 5 Par la suite, un nombre considérable de immunocytes s'extravaser dans le ME, dominé par les polynucléaires neutrophiles (PMN) et les monocytes et enfin maintenir POI 2. durable pendant des jours, cette paralysie intestinale conduit à un risque accru d'aspiration, la translocation bactérienne infectieuses et les complications allant jusqu'à la septicémie et une défaillance organique multiple et provoque une forte charge économique 6.

Dans ce manuscrit, nous démontrons le modèle standard de la messagerie instantanée et évaluation in vivo de transit gastro-intestinal (TGI) et de transit colique. En outre, nous démontrons une méthode pour la séparation de la ME de la muqueuse suivie d'une analyse immunologique, ce qui est essentiel de faire la distinction entre les réponses inflammatoires dans ces deux compartiments très immunoactifs paroi intestinale. Toutes les analyses sont facilement transférables à toutes les autres modèles de recherche, affectant la fonction gastro-intestinale.

Protocol

1. Animaux Mâles C57BL6 / J souris avec un poids moyen de 25 g ont été obtenus auprès de Harlan Winkelmann (Borchen, Allemagne). Toutes les expériences ont été effectuées en conformité avec la loi fédérale sur la protection des animaux. Les principes des soins des animaux de laboratoire ont été suivies. Les animaux ont été maintenus sur une lumière de 12 h cycle jour / nuit et muni rongeurs disponible dans le commerce chow et à volonté du robinet de l'eau ad….

Discussion

Une étude comparative analysant les différents niveaux de GI (éventration intestin grêle pendant 10 minutes par rapport doucement l'inspection de l'intestin grêle au moyen de deux applicateurs en coton par rapport à la messagerie instantanée avec évacuation du contenu de l'intestin grêle dans le caecum) a révélé une corrélation entre l'ampleur de la manipulation chirurgicale et POI. En comparaison avec les autres groupes IM a montré la plus grande quantité de leucocytes dans le ME (PNM, le…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Ce travail a été soutenu par des subventions de la Deutsche Forschungsgemeinschaft (KA1270/3-1/2) et BONFOR (O-112.0040).

Materials

Name of the reagent/Equipment Company Catalogue number
Ethilon 5/0 Ethicon 1666H
Cotton applicators MaiMed 71010
arterial catheter Vygon 115-798
96 well plate (black) Greiner Bio One 655096
glass ball (2 mm diameter) Worf available on request
Insect pins Fine Science Tools 26000-25
Hanker Yates Reagent Polyscience 560694
Aquatek Merck HC109850
DMEM Lonza BE12-604 F
FITC-dextran (MW 70000) Sigma Aldrich 46945-500MG-F

References

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Cite This Article
Vilz, T. O., Overhaus, M., Stoffels, B., Websky, M. v., Kalff, J. C., Wehner, S. Functional Assessment of Intestinal Motility and Gut Wall Inflammation in Rodents: Analyses in a Standardized Model of Intestinal Manipulation. J. Vis. Exp. (67), e4086, doi:10.3791/4086 (2012).

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