Функциональная оценка моторики кишечника и воспаление стенки кишечника у грызунов: Анализы в стандартной модели Кишечные Манипуляции
Summary
Послеоперационная кишечная непроходимость (POI) является осложнением абдоминальной хирургии приводит к увеличению заболеваемости и длительного пребывания в больнице. Потому профилактических или терапевтических стратегий не хватает активизировались исследования необходимы. Поэтому мы установили стандартизированных и возможности мышь модель для изучения патофизиологии POI и изучить потенциальные терапевтические возможности.
Abstract
Воспаление желудочно-кишечного тракта является общей причиной различных заболеваний человека. Исследования на животных моделях имеют решающее значение в расследовании комплекс клеточных и молекулярных кишечной патологии. Хотя слизистой оболочки часто является органом интерес во многих воспалительных заболеваний, последние работы показали, что мышечной наружная (ME) также высоко иммунокомпетентных орган, который таит в себе густую сеть резидентов иммуноцитов. 1,2 Эти работы были выполнены в рамках стандартизированного Модель кишечного манипуляции (IM), что приводит к воспалению стенки кишечника, в основном, ограничивается ME. Клинически это воспаление приводит к длительной кишечной моторики, известный как послеоперационная кишечная непроходимость (POI), который является частым и неизбежных осложнений после абдоминальной хирургии. 3 воспаление характеризуется освобождением провоспалительных медиаторов, таких как IL-6 4 или IL-1β или тормозных нейромедиаторов как нитриС азота (NO) 5. Впоследствии огромное количество иммуноцитов вытекать из сосудов в ткань в ME, преобладают полиморфноядерные нейтрофилы (ПМН) и моноцитов и, наконец, сохранить POI. 2 длятся по нескольку дней, это кишечная паралич приводит к увеличению риска аспирации, бактериальная транслокация и инфекционных осложнений до сепсиса и несколько органной недостаточности и приводит к высоким экономическим бременем 6.
В этой рукописи мы демонстрируем стандартизированной модели IM и в естественных условиях оценка желудочно-кишечный тракт (ЖКТ) и толстой транзита. Кроме того мы демонстрируем метод для разделения меня от слизистой оболочки следует иммунологического анализа, которая имеет решающее значение для различия между воспалительной реакции в эти оба очень иммуноактивные отсеков стенки кишечника. Все анализы легко переносятся на любой другой модели исследования, затрагивающие желудочно-кишечного функции.
Protocol
Discussion
Сравнительное исследование анализом различных уровней IM (небольшие эвентрация кишечника в течение 10 мин по сравнению с нежно осмотр тонкой кишки с помощью двух аппликаторов хлопка по сравнению с IM с эвакуацией небольшого содержания кишечника в слепой кишке) показали корреляцию между…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Эта работа была поддержана грантами от Deutsche Forschungsgemeinschaft (KA1270/3-1/2) и BONFOR (O-112,0040).
Materials
| Name of the reagent/Equipment | Company | Catalogue number |
| Ethilon 5/0 | Ethicon | 1666H |
| Cotton applicators | MaiMed | 71010 |
| arterial catheter | Vygon | 115-798 |
| 96 well plate (black) | Greiner Bio One | 655096 |
| glass ball (2 mm diameter) | Worf | available on request |
| Insect pins | Fine Science Tools | 26000-25 |
| Hanker Yates Reagent | Polyscience | 560694 |
| Aquatek | Merck | HC109850 |
| DMEM | Lonza | BE12-604 F |
| FITC-dextran (MW 70000) | Sigma Aldrich | 46945-500MG-F |
References
- Wehner, S., Behrendt, F. F., Lyutenski, B. N., Lysson, M., Bauer, A. J., Hirner, A., Kalff, J. C. Inhibition of macrophage function prevents intestinal inflammation and postoperative ileus in rodents. Gut. 56, 176-185 (2007).
- Kalff, J. C., Schwarz, N. T., Walgenbach, K. J., Schraut, W. H., Bauer, A. J. Leukocytes of the intestinal muscularis: their phenotype and isolation. J. Leukoc. Biol. 63, 683-691 (1998).
- Kehlet, H. Postoperative ileus. Gut. 47, iv85-iv86 (2000).
- Wehner, S., Schwarz, N. T., Hundsdoerfer, R., Hierholzer, C., Tweardy, D. J., Billiar, T. R., Bauer, A. J., Kalff, J. C. Induction of IL-6 within the rodent intestinal muscularis after intestinal surgical stress. Surgery. 137, 436-446 (2005).
- Kalff, J. C., Schraut, W. H., Billiar, T. R., Simmons, R. L., Bauer, A. J. Role of inducible nitric oxide synthase in postoperative intestinal smooth muscle dysfunction in rodents. Gastroenterology. 118, 316-327 (2000).
- Iyer, S., Saunders, W. B., Stemkowski, S. Economic burden of postoperative ileus associated with colectomy in the United States. J. Manag. Care Pharm. 15, 485-494 (2009).
- Miller, M. S., Galligan, J. J., Burks, T. F. Accurate measurement of intestinal transit in the rat. J. Pharmacol. Methods. 6, 211-217 (1981).
- Kalff, J. C., Schraut, W. H., Simmons, R. L., Bauer, A. J. Surgical manipulation of the gut elicits an intestinal muscularis inflammatory response resulting in postsurgical ileus. Ann. Surg. 228, 652-663 (1998).
- Wehner, S., Straesser, S., Vilz, T. O., Pantelis, D., Sielecki, T., de lC, V., Hirner, A., Kalff, J. C. Inhibition of p38 mitogen-activated protein kinase pathway as prophylaxis of postoperative ileus in mice. Gastroenterology. 136, 619-629 (2009).
- Konigsrainer, I., Turck, M. H., Eisner, F., Meile, T., Hoffmann, J., Kuper, M., Zieker, D., Glatzle, J. The Gut is not only the Target but a Source of Inflammatory Mediators Inhibiting Gastrointestinal Motility During Sepsis. Cell Physiol. Biochem. 28, 753-760 (2011).
- Schwarz, N. T., Kalff, J. C., Turler, A., Speidel, N., Grandis, J. R., Billiar, T. R., Bauer, A. J. Selective jejunal manipulation causes postoperative pan-enteric inflammation and dysmotility. Gastroenterology. 26, 159-169 (2004).
- Engel, D. R., Koscielny, A., Wehner, S., Maurer, J., Schiwon, M., Franken, L., Schumak, B., Limmer, A., Sparwasser, T., Hirner, A. T helper type 1 memory cells disseminate postoperative ileus over the entire intestinal tract. Nat. Med. , (2010).
- Stoffels, B., Schmidt, J., Nakao, A., Nazir, A., Chanthaphavong, R. S., Bauer, A. J. Role of interleukin 10 in murine postoperative ileus. Gut. 58, 648-660 (2009).
