הערכה תפקודית של תנועתיות מעיים ודלקת דופן מעי במכרסמים: ניתוח בדגם סטנדרטי של מניפולצית מעיים
Summary
ileus לאחר הניתוח (POI) הוא סיבוך של ניתוח בטן מוביל לתחלואה ואשפוז ממושך. בגלל אסטרטגיות מניעות או טיפול חסרות מחקר התעצם הוא הכרחי. לכן הקמנו מודל עכבר סטנדרטי וריאלי כדי לחקור את הפתופיזיולוגיה של POI וללמוד אפשרויות טיפוליות פוטנציאליות.
Abstract
דלקת של מערכת העיכול היא סיבה נפוצה עבור מגוון רחב של מחלות בבני אדם. מודלים מחקריים בבעלי החיים הם קריטיים בחקירה מורכבת תאיים ומולקולרי של פתולוגיה במעיים. למרות שרירית Tunica היא לעתים קרובות את האיבר של עניין במחלות דלקתיות רבות, עבודות אחרונות הוכיחו כי הידבקות muscularis (ME) היא גם איבר immunocompetent מאוד שטומן רשת צפופה של immunocytes התושבים. 1,2 עבודות אלה בוצעו תוך טופל מודל של מניפולצית מעיים (IM) שמוביל לדלקת של קיר המעי, מוגבל בעיקר לME. מבחינה קלינית לדלקת זו גורמת לdysmotility הממושך במעיים, המכונה ileus לאחר ניתוח (POI) שהנו סיבוך שכיח ובלתי נמנע לאחר ניתוח בטן. 3 הדלקת מאופיינת בשחרור של מתווכים מעודדים דלקת כגון IL-6 4 או נוירוטרנסמיטורים IL-1β או מעכבות כמו nitriג תחמוצת (NO). 5 לאחר מכן, מספרים עצומים של immunocytes extravasate אליי, שנשלט על ידי נויטרופילים polymorphonuclear (PMN) ומונוציטים ולבסוף לשמור על נקודת עניין. 2 שנמשכים במשך ימים, שיתוק מעי זו מוביל לסיכון מוגבר לשאיפה, טרנסלוקציה חיידקים וסיבוכים זיהומיות עד לאלח דם וקריסת מערכות רבה וגורמים לניטל כלכלי גבוה. 6
בכתב היד הזה אנחנו מדגימים את המודל הסטנדרטי של הודעות מיידיות ולהערכת vivo של מעבר מזון במעיים (git) ומעבר מעי גס. יתר על כן אנו מדגימים שיטה להפרדה שלי מרירית Tunica אחרי ניתוח חיסוני, שהיא חיונית להבחין בין התגובות הדלקתיות בשני תאי קיר מעי immunoactive מאוד אלו. כל הניתוחים בקלות להעברה לכל דגמי מחקר אחרים, המשפיע על תפקוד מערכת עיכול.
Protocol
Discussion
מחקר השוואתי ניתוח רמות שונות של מסרים מיידיים (eventration המעי הדק למשך 10 דקות לעומת עדינות בדיקה של המעי הדק באמצעות שני applicators כותנה לעומת IM עם פינוי של תוכן מעי דק לcecum) גילה קשר בין המידה של מניפולציה וPOI כירורגית. בהשוואה לקבוצות האחרות IM הראה כמות הגבוהה ביותר של לויק…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
עבודה זו נתמכה על ידי מענקים מForschungsgemeinschaft דויטשה (KA1270/3-1/2) וBONFOR (O-112.0040).
Materials
| Name of the reagent/Equipment | Company | Catalogue number |
| Ethilon 5/0 | Ethicon | 1666H |
| Cotton applicators | MaiMed | 71010 |
| arterial catheter | Vygon | 115-798 |
| 96 well plate (black) | Greiner Bio One | 655096 |
| glass ball (2 mm diameter) | Worf | available on request |
| Insect pins | Fine Science Tools | 26000-25 |
| Hanker Yates Reagent | Polyscience | 560694 |
| Aquatek | Merck | HC109850 |
| DMEM | Lonza | BE12-604 F |
| FITC-dextran (MW 70000) | Sigma Aldrich | 46945-500MG-F |
References
- Wehner, S., Behrendt, F. F., Lyutenski, B. N., Lysson, M., Bauer, A. J., Hirner, A., Kalff, J. C. Inhibition of macrophage function prevents intestinal inflammation and postoperative ileus in rodents. Gut. 56, 176-185 (2007).
- Kalff, J. C., Schwarz, N. T., Walgenbach, K. J., Schraut, W. H., Bauer, A. J. Leukocytes of the intestinal muscularis: their phenotype and isolation. J. Leukoc. Biol. 63, 683-691 (1998).
- Kehlet, H. Postoperative ileus. Gut. 47, iv85-iv86 (2000).
- Wehner, S., Schwarz, N. T., Hundsdoerfer, R., Hierholzer, C., Tweardy, D. J., Billiar, T. R., Bauer, A. J., Kalff, J. C. Induction of IL-6 within the rodent intestinal muscularis after intestinal surgical stress. Surgery. 137, 436-446 (2005).
- Kalff, J. C., Schraut, W. H., Billiar, T. R., Simmons, R. L., Bauer, A. J. Role of inducible nitric oxide synthase in postoperative intestinal smooth muscle dysfunction in rodents. Gastroenterology. 118, 316-327 (2000).
- Iyer, S., Saunders, W. B., Stemkowski, S. Economic burden of postoperative ileus associated with colectomy in the United States. J. Manag. Care Pharm. 15, 485-494 (2009).
- Miller, M. S., Galligan, J. J., Burks, T. F. Accurate measurement of intestinal transit in the rat. J. Pharmacol. Methods. 6, 211-217 (1981).
- Kalff, J. C., Schraut, W. H., Simmons, R. L., Bauer, A. J. Surgical manipulation of the gut elicits an intestinal muscularis inflammatory response resulting in postsurgical ileus. Ann. Surg. 228, 652-663 (1998).
- Wehner, S., Straesser, S., Vilz, T. O., Pantelis, D., Sielecki, T., de lC, V., Hirner, A., Kalff, J. C. Inhibition of p38 mitogen-activated protein kinase pathway as prophylaxis of postoperative ileus in mice. Gastroenterology. 136, 619-629 (2009).
- Konigsrainer, I., Turck, M. H., Eisner, F., Meile, T., Hoffmann, J., Kuper, M., Zieker, D., Glatzle, J. The Gut is not only the Target but a Source of Inflammatory Mediators Inhibiting Gastrointestinal Motility During Sepsis. Cell Physiol. Biochem. 28, 753-760 (2011).
- Schwarz, N. T., Kalff, J. C., Turler, A., Speidel, N., Grandis, J. R., Billiar, T. R., Bauer, A. J. Selective jejunal manipulation causes postoperative pan-enteric inflammation and dysmotility. Gastroenterology. 26, 159-169 (2004).
- Engel, D. R., Koscielny, A., Wehner, S., Maurer, J., Schiwon, M., Franken, L., Schumak, B., Limmer, A., Sparwasser, T., Hirner, A. T helper type 1 memory cells disseminate postoperative ileus over the entire intestinal tract. Nat. Med. , (2010).
- Stoffels, B., Schmidt, J., Nakao, A., Nazir, A., Chanthaphavong, R. S., Bauer, A. J. Role of interleukin 10 in murine postoperative ileus. Gut. 58, 648-660 (2009).
