一个简单的方法小鼠肺插管
Summary
本文介绍了一种striaghforward和有效的方法，插管小鼠肺功能测量或肺灌注，使小鼠恢复，并在以后的时间进行研究。该过程涉及一种廉价的光纤光源直接照射的气管。
Abstract
插管小鼠肺功能测量一个简单的程序有几个优势，在纵向研究数量有限，昂贵的动物。没有这样做，这是更常规的原因之一是，它是比较困难的，尽管有几个已发表的研究描述的方法来实现它。在本文中，我们展示了一个过程，消除插管与此相关联的主要障碍之一，就是在整个可视化的气管插管时。该方法使用一个0.5毫米的光纤光源，作为介绍人直接的小鼠气管插管插入气管插管。我们表明，它是可以使用此过程测量在个别小鼠的肺力学过程中，至少几个星期的时间。这项技术可以被设置以相对较少的费用和专门知识，它可以常规完成以相对较少的培训。这应该麦E – 这是任何实验室定期进行气管插管，从而使小鼠个体的纵向研究中，通过使用每个鼠标作为自己的控制，从而最大限度地减少所需的老鼠的数量和提高统计能力。
Introduction
布朗等人在1999年发表了一篇论文，描述小鼠肺1气管插管的方法。这种技术具有相当的实用，在做重复肺功能或支气管肺泡灌洗在纵向研究中的单个小鼠2。从那时起，原来的文件，已经有好几篇文章，描述了不同的方法对小鼠气管插管3-9。虽然所有这些方法，可以成功地使用，它们通常需要大量的训练或成本。如气管插管的主要问题之一是，接近气管待插入气管插管插管方法，插管本身阻止光的可视化，因此，它需要去的地方。因此，在最关键的时候插入变得盲目。在本文中，我们将展示如何简单，廉价消除这种可视化的问题，从而确保以相对较少的培训或气管插管成功经验。
Protocol
1。准备程序必须先取得并准备以下物品： 插管，气管插管20-35克小鼠，我们使用了1或1.5英寸长，20号静脉导管（BD Insylte，火花，MD或Jelco OPTIVA，卡尔斯巴德，加利福尼亚州）。一个新的无菌导管可以用于各小鼠，但也可以重复使用导管的灭菌后，通过在70％乙醇中浸泡过夜。虽然无论是咽也不是无菌的气管鼠标适当的清洁程序，包括使用无菌手套和工具?…
Representative Results
作为评价的方法，我们使用了4个20周龄雄性BALB / c小鼠的平均体重（±SEM）27.7±0.40克的。他们连续五周进行了研究，其中的肺阻力的测定是使用如前面所述的一个系统11。每只小鼠用氯胺酮（100微克/克体重）和甲苯噻嗪（15微克/克体重）在盐水中通过IP注射麻醉。然后，他们被插管如上所述。如果有任何疑问，是否是在气管和食道插管，这可以使用一个小的牙科镜验证。保持镜像冷冻箱中?…
Discussion
这里介绍的方法具有几个优点。首先，该装置是简单的和相对便宜的..制造该装置不需要任何特殊工具或昂贵的设备。用导管引入的光源也意味着，一个不能忽视的气管开口，介绍人靠近气管的开口。使用0.5毫米导引也供应，以尽量减少创伤，可能会出现的一个更大的套管的初始插入。这里我们注意到，类似的光学探针是从商业供应商（布伦特里科学，旅游Braintree，MA）。他们的移动设备使用一个…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
支持由NIH HL-10342。
Materials
| Material | Company | Catalog # | Comment |
| Intubation cannula | BD Insylte, Sparks, MD or Jelco Optiva, Carlsbad, CA | 1-in.-long, 20-gauge intravenous (IV) catheter | |
| Fiber-optic cable | Edmund Optics, Barrington, NJ | #NT02-542 | Approximately 2-ft length of 0.5-mm optical fiber (Communication grade plastic fiber). The edge of the fiber end that is inserted into the trachea should be gently rounded by holding the fiber ≈2 cm from the end and then making small circles while dragging the tip for a few seconds on 1,000-grit emory paper. |
| Light Source | Volpi | NCL-150 | Although we use a 150-W halogen light source, any equivalent light source, even with much lower wattage can be used. |
| Silicone rubber stopper | A #1 silicone rubber stopper fits the light source used in this demonstration. Different light sources may require a different size. | ||
| Small silicone rubber tube | Cole-Palmer | EW-96410-13 | A ≈1.5 cm piece of silicone rubber tubing (0.8 inner diameter, 4 mm outer diameter) |
| Angled support stand | Ours is constucted from plexiglass, but any material to which a thread or wire can be affixed to hold the mouse at an almost vertical angle can be used. |
References
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Cite This Article
Das, S., MacDonald, K., Chang, H. S., Mitzner, W. A Simple Method of Mouse Lung Intubation. J. Vis. Exp. (73), e50318, doi:10.3791/50318 (2013).