Простой метод мышь интубации легких
Summary
Эта статья описывает striaghforward и эффективный метод интубации мышей для измерения легочной функции или легочной инстилляции, что позволяет мыши, чтобы восстановиться и быть изучен на более позднее время. Процедура включает в себя недорогие волоконно-оптический источник света, который освещает непосредственно в трахею.
Abstract
Простая процедура интубация мышей для измерения легочной функции будет иметь ряд преимуществ в продольных исследованиях с ограниченным числом или дорогих животных. Одной из причин того, что это не будет сделано более регулярно том, что это довольно сложно, несмотря на наличие нескольких опубликованных исследований, которые описывают способы его достижения. В этой статье мы покажем процедура, которая устраняет одно из основных препятствий, связанных с этим интубации, что визуализации трахеи в течение всего времени интубации. Этот подход использует 0,5 мм волоконно-оптический источник света, который служит интродьюсер направить интубации канюли в трахее мыши. Мы показываем, что можно использовать эту процедуру для оценки механики легких в отдельных мышей за время хода по крайней мере, несколько недель. Этот метод может быть установлен с относительно небольшими расходами и опыта, и она может быть выполнена регулярно с относительно небольшой подготовки. Это должно макE возможно в любой лаборатории регулярно проводят эту интубации, тем самым позволяя продольных исследований в отдельных мышей, уменьшая тем самым количество мышей необходима и повышения статистической мощности с помощью мыши, как каждый свой контроль.
Introduction
В 1999 году Браун и др.. Опубликовал статью, описывающую метод интубации легких мыши 1. Такой метод имеет значительный полезный в этом повторные легочные функции или бронхоальвеолярного лаважа в отдельных мышей в продольных исследованиях 2. Так что оригинальная бумага, было несколько других работ, которые описал различные подходы к мыши интубации 3-9. Хотя все эти методы могут быть успешно использованы, они обычно требуют значительной подготовки или затрат. Одним из основных вопросов, с такой интубации в том, что по мере приближения интубации канюли приближается к трахее до вставки, канюли сама блокирует свет и, следовательно, визуализации, где она должна идти. Таким образом, становится слепым вставки в самый критический момент. В этой статье мы покажем, как просто и недорого устранить эту задачу визуализации, обеспечивая тем самым успешное интубации с относительно небольшой подготовки илиопыт.
Protocol
Representative Results
Discussion
Описанная здесь процедура имеет ряд преимуществ. Первое устройство является простым и относительно недорогим .. Изготовление аппарата не требует никаких специальных инструментов или дорогостоящего оборудования. Использование катетера вводится что также является источником света о?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Поддерживается NIH HL-10342.
Materials
| Material | Company | Catalog # | Comment |
| Intubation cannula | BD Insylte, Sparks, MD or Jelco Optiva, Carlsbad, CA | 1-in.-long, 20-gauge intravenous (IV) catheter | |
| Fiber-optic cable | Edmund Optics, Barrington, NJ | #NT02-542 | Approximately 2-ft length of 0.5-mm optical fiber (Communication grade plastic fiber). The edge of the fiber end that is inserted into the trachea should be gently rounded by holding the fiber ≈2 cm from the end and then making small circles while dragging the tip for a few seconds on 1,000-grit emory paper. |
| Light Source | Volpi | NCL-150 | Although we use a 150-W halogen light source, any equivalent light source, even with much lower wattage can be used. |
| Silicone rubber stopper | A #1 silicone rubber stopper fits the light source used in this demonstration. Different light sources may require a different size. | ||
| Small silicone rubber tube | Cole-Palmer | EW-96410-13 | A ≈1.5 cm piece of silicone rubber tubing (0.8 inner diameter, 4 mm outer diameter) |
| Angled support stand | Ours is constucted from plexiglass, but any material to which a thread or wire can be affixed to hold the mouse at an almost vertical angle can be used. |
References
- Brown, R. H., Walters, D. M., Greenberg, R. S., Mitzner, W. A method of endotracheal intubation and pulmonary functional assessment for repeated studies in mice. J. Appl. Physiol. 87, 2362-2365 (1999).
- Walters, D. M., Wills-Karp, M., Mitzner, W. Assessment of cellular profile and lung function with repeated bronchoalveolar lavage in individual mice. Physiol. Genomics. 2, 29-36 (2000).
- Rivera, B., Miller, S., Brown, E., Price, R. A novel method for endotracheal intubation of mice and rats used in imaging studies. Contemporary Topics in Laboratory Animal Science / American Association for Laboratory Animal Science. 44, 52-55 (2005).
- Hamacher, J., et al. Microscopic wire guide-based orotracheal mouse intubation: description, evaluation and comparison with transillumination. Laboratory Animals. 42, 222-230 (2008).
- Spoelstra, E. N., et al. A novel and simple method for endotracheal intubation of mice. Laboratory Animals. 41, 128-135 (2007).
- Zhao, X., et al. A technique for retrograde intubation in mice. Lab Animal. 35, 39-42 (2006).
- Vergari, A., et al. A new method of orotracheal intubation in mice. European Review for Medical and Pharmacological Sciences. 8, 103-106 (2004).
- Vergari, A., Polito, A., Musumeci, M., Palazzesi, S., Marano, G. Video-assisted orotracheal intubation in mice. Laboratory Animals. 37, 204-206 (2003).
- Hastings, R. H., Summers-Torres, D. Direct Laryngoscopy in Mice. Contemporary Topics in Laboratory Animal Science / American Association for Laboratory Animal Science. 38, 33-35 (1999).
- MacDonald, K. D., Chang, H. Y., Mitzner, W. An improved simple method of mouse lung intubation. J. Appl. Physiol. 106, 984-987 (2009).
- Ewart, S. L., Levitt, R. C., Mitzner, W. Respiratory system mechanics in mice measured by end-inflation occlusion. Journal of Applied Physiology. 79, 560-566 (1995).
- MacDonald, K. D., McKenzie, K. R., Mitzner, W., Zeitlin, P. L. Lung Mechanics in Heterozygous CF Mice after Repeated LPS Dosing. Am. J. Respir. Crit. Care Med. 175 (4), A930 (2007).
