Une méthode simple d'intubation poumon de souris
Summary
Le présent document décrit une méthode striaghforward et efficace de l'intubation des souris pour les mesures de la fonction pulmonaire ou l'instillation pulmonaire, qui permet aux souris de récupérer et être étudié à temps postérieurs. La procédure implique une source de lumière à fibre optique peu coûteux qui éclaire directement la trachée.
Abstract
Une procédure simple pour intuber souris pour les mesures de la fonction pulmonaire aurait plusieurs avantages dans les études longitudinales avec un nombre limité d'animaux ou coûteux. Une des raisons pour lesquelles cela n'est pas fait de façon plus routinière, c'est qu'il est relativement difficile, malgré l'existence de plusieurs études publiées qui décrivent les moyens pour y parvenir. Dans cet article, nous démontrons une procédure qui élimine l'un des obstacles majeurs associés à ce intubation, qui permet de visualiser la trachée pendant toute la durée de l'intubation. La méthode utilise une source de lumière à fibre optique 0,5 mm qui sert d'introduction pour diriger la canule d'intubation dans la trachée de souris. Nous montrons qu'il est possible d'utiliser cette procédure pour mesurer la mécanique du poumon chez les souris individuelles sur un parcours de temps d'au moins plusieurs semaines. La technique peut être mis en place avec relativement peu de frais et d'expertise, et il peut être systématiquement réalisé avec relativement peu de formation. Cela devrait make il possible pour tout laboratoire réalise ce intubation, ce qui permet des études longitudinales chez des souris individuelles, ce qui réduit le nombre de souris nécessaires et en augmentant la puissance statistique en utilisant chaque souris comme son propre témoin.
Introduction
En 1999, Brown et al. Publié un article décrivant une méthode pour l'intubation du poumon 1 souris. Une telle technique a une utilité considérable en faisant fonction de répétition ou lavage broncho-alvéolaire pulmonaire chez la souris individuelles dans les études longitudinales 2. Depuis que le papier d'origine, il ya eu plusieurs autres documents qui ont décrit les différentes approches à 3-9 intubation souris. Bien que toutes ces méthodes peuvent être utilisées avec succès, ils exigent habituellement une formation considérable ou de coût. Un des principaux problèmes avec intubation par exemple, c'est que l'approche de la canule d'intubation se rapproche de la trachée attente d'insertion, la canule elle-même bloque la lumière et donc la visualisation de l'endroit où il doit aller. Ainsi, l'insertion devient aveugle au moment le plus critique. Dans cet article, nous montrons comment simple et peu coûteuse d'éliminer ce problème de visualisation, assurant ainsi une intubation réussie avec relativement peu de formation ouexpérience.
Protocol
Representative Results
Discussion
La procédure décrite ici présente plusieurs avantages. D'abord l'appareil est simple et relativement peu coûteux .. La fabrication de l'appareil ne nécessite pas d'outils spéciaux ou de l'équipement coûteux. L'utilisation d'un cathéter introduit qui est également la source de lumière signifie que l'on ne perd jamais de vue l'ouverture de la trachée comme l'introducteur s'approche de l'ouverture trachéale. L'utilisation d'un dispositif d'introductio…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Soutenu par le NIH HL-10342.
Materials
| Material | Company | Catalog # | Comment |
| Intubation cannula | BD Insylte, Sparks, MD or Jelco Optiva, Carlsbad, CA | 1-in.-long, 20-gauge intravenous (IV) catheter | |
| Fiber-optic cable | Edmund Optics, Barrington, NJ | #NT02-542 | Approximately 2-ft length of 0.5-mm optical fiber (Communication grade plastic fiber). The edge of the fiber end that is inserted into the trachea should be gently rounded by holding the fiber ≈2 cm from the end and then making small circles while dragging the tip for a few seconds on 1,000-grit emory paper. |
| Light Source | Volpi | NCL-150 | Although we use a 150-W halogen light source, any equivalent light source, even with much lower wattage can be used. |
| Silicone rubber stopper | A #1 silicone rubber stopper fits the light source used in this demonstration. Different light sources may require a different size. | ||
| Small silicone rubber tube | Cole-Palmer | EW-96410-13 | A ≈1.5 cm piece of silicone rubber tubing (0.8 inner diameter, 4 mm outer diameter) |
| Angled support stand | Ours is constucted from plexiglass, but any material to which a thread or wire can be affixed to hold the mouse at an almost vertical angle can be used. |
References
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