שיטה פשוטה של אינטובציה ריאות המאוסות
Summary
מאמר זה מתאר שיטת striaghforward ויעילה של intubating עכברים למדידת תפקוד הריאתי או החדרה ריאתי, שמאפשרת לעכברים להתאושש ולהיחקר בתקופות מאוחרות יותר. ההליך כרוך מקור אור סיב אופטי יקר שמאיר ישירות לקנה נשימה.
Abstract
הליך פשוט לצנרר עכברים למדידת תפקוד ריאתי הייתי כמה יתרונות במחקרים ארוכי טווח עם מספרים מוגבלים או בעלי חיים יקרים. אחת הסיבות לכך שזה לא נעשה באופן שגרתי יותר הוא שזה קשה יחסית, למרות שקיים מספר מחקרים שפורסם שמתארים דרכים להשגתה. במאמר זה אנו מדגימים הליך שמבטל אחד המכשולים העיקריים הקשורים באינטובציה זה, כי מלדמיין את קנה הנשימה במשך כל הזמן של אינטובציה. הגישה משתמשת במקור אור סיב אופטי 0.5 מ"מ המשמש כintroducer לכוון את הצינורית לקנה נשימת אינטובציה העכבר. אנחנו מראים שאפשר להשתמש בהליך זה כדי למדוד מכניקת ריאות בעכברים בודדים לאורך מסלול זמן של לפחות מספר שבועות. הטכניקה יכולה להיות מוגדרת עם חשבון ומומחיות יחסית קטנים, וזה יכול להיות באופן שגרתי הושג עם הכשרה מועטת יחסית. זה צריך MAKדואר מאפשר לכל מעבדה לשגרה לבצע אינטובציה זו, ובכך לאפשר מחקרים ארוכים טווח בעכברים בודדים, ובכך לצמצם את מספר העכברים הנדרשים ולהגדיל את הכח הסטטיסטי באמצעות כל עכבר כשליטה שלו.
Introduction
בשנת 1999, בראון ואח'. פרסם מאמר המתאר שיטה לאינטובציה של ריאת 1 עכבר. כגון טכניקה יש תועלת רבה בתפקוד הריאתי עושה חוזר או שטיפת רונכואלוואולרית בעכברים בודדים במחקרים ארוכי טווח 2. מאז אותו המאמר מקורי, יש כבר כמה עיתונים אחרים שתארו גישות שונות לאינטובציה העכבר 3-9. בעוד כל השיטות האלה יכולות לשמש בהצלחה, הם בדרך כלל דורשים הכשרה או בעלות ניכרת. אחד הנושאים העיקריים עם אינטובציה כזו היא שככל שמתקרבת לגישות צינורית אינטובציה החדרה ממתינה קנה הנשימה, הצינורית עוצמה חוסמת את האור ולכן ההדמיה של בו הוא צריך ללכת. לפיכך, ההכנסה הופכת לעיוורת בזמן הקריטי ביותר. במאמר זה אנו מראים כיצד פשוט וזולים למיגור בעיה להדמיה זו, ובכך להבטיח אינטובציה המוצלחת עם אימונים או מועטים יחסיתניסיון.
Protocol
Representative Results
Discussion
ההליך המתואר כאן יש מספר יתרונות. ראשית המנגנון הוא פשוט וזול יחסית .. הייצור של המכשיר אינו דורש שום כלים מיוחדים או ציוד יקר. השימוש בקטטר שמציג גם הוא מקור האור אומר שלעולם אינו רואה את פתיחת קנה הנשימה כintroducer מתקרב פתיחת קנה הנשימה. השימוש בintroducer 0.5 מ"מ משמש גם כד?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
נתמך על ידי NIH HL-10342.
Materials
| Material | Company | Catalog # | Comment |
| Intubation cannula | BD Insylte, Sparks, MD or Jelco Optiva, Carlsbad, CA | 1-in.-long, 20-gauge intravenous (IV) catheter | |
| Fiber-optic cable | Edmund Optics, Barrington, NJ | #NT02-542 | Approximately 2-ft length of 0.5-mm optical fiber (Communication grade plastic fiber). The edge of the fiber end that is inserted into the trachea should be gently rounded by holding the fiber ≈2 cm from the end and then making small circles while dragging the tip for a few seconds on 1,000-grit emory paper. |
| Light Source | Volpi | NCL-150 | Although we use a 150-W halogen light source, any equivalent light source, even with much lower wattage can be used. |
| Silicone rubber stopper | A #1 silicone rubber stopper fits the light source used in this demonstration. Different light sources may require a different size. | ||
| Small silicone rubber tube | Cole-Palmer | EW-96410-13 | A ≈1.5 cm piece of silicone rubber tubing (0.8 inner diameter, 4 mm outer diameter) |
| Angled support stand | Ours is constucted from plexiglass, but any material to which a thread or wire can be affixed to hold the mouse at an almost vertical angle can be used. |
References
- Brown, R. H., Walters, D. M., Greenberg, R. S., Mitzner, W. A method of endotracheal intubation and pulmonary functional assessment for repeated studies in mice. J. Appl. Physiol. 87, 2362-2365 (1999).
- Walters, D. M., Wills-Karp, M., Mitzner, W. Assessment of cellular profile and lung function with repeated bronchoalveolar lavage in individual mice. Physiol. Genomics. 2, 29-36 (2000).
- Rivera, B., Miller, S., Brown, E., Price, R. A novel method for endotracheal intubation of mice and rats used in imaging studies. Contemporary Topics in Laboratory Animal Science / American Association for Laboratory Animal Science. 44, 52-55 (2005).
- Hamacher, J., et al. Microscopic wire guide-based orotracheal mouse intubation: description, evaluation and comparison with transillumination. Laboratory Animals. 42, 222-230 (2008).
- Spoelstra, E. N., et al. A novel and simple method for endotracheal intubation of mice. Laboratory Animals. 41, 128-135 (2007).
- Zhao, X., et al. A technique for retrograde intubation in mice. Lab Animal. 35, 39-42 (2006).
- Vergari, A., et al. A new method of orotracheal intubation in mice. European Review for Medical and Pharmacological Sciences. 8, 103-106 (2004).
- Vergari, A., Polito, A., Musumeci, M., Palazzesi, S., Marano, G. Video-assisted orotracheal intubation in mice. Laboratory Animals. 37, 204-206 (2003).
- Hastings, R. H., Summers-Torres, D. Direct Laryngoscopy in Mice. Contemporary Topics in Laboratory Animal Science / American Association for Laboratory Animal Science. 38, 33-35 (1999).
- MacDonald, K. D., Chang, H. Y., Mitzner, W. An improved simple method of mouse lung intubation. J. Appl. Physiol. 106, 984-987 (2009).
- Ewart, S. L., Levitt, R. C., Mitzner, W. Respiratory system mechanics in mice measured by end-inflation occlusion. Journal of Applied Physiology. 79, 560-566 (1995).
- MacDonald, K. D., McKenzie, K. R., Mitzner, W., Zeitlin, P. L. Lung Mechanics in Heterozygous CF Mice after Repeated LPS Dosing. Am. J. Respir. Crit. Care Med. 175 (4), A930 (2007).
