Een eenvoudige methode van de Muis van Lung intubatie
Summary
Dit artikel beschrijft een striaghforward en efficiënte methode van intubatie muizen voor longfunctie metingen of pulmonale instillatie, die het mogelijk maakt de muizen om te herstellen en studeerde worden op latere tijdstippen. Deze procedure houdt een goedkope optische vezel lichtbron die direct verlicht de luchtpijp.
Abstract
Een eenvoudige procedure aan muizen gedurende longfunctie metingen intuberen zouden verscheidene voordelen in longitudinale studies waar weinig of dure dier. Een van de redenen dat dit niet meer routinematig gedaan is dat het relatief moeilijk, hoewel er een aantal gepubliceerde onderzoeken die manieren om dit te bereiken beschrijven. In dit artikel tonen een procedure die een van de belangrijkste hindernissen bij dit intubatie dat het visualiseren van de trachea gedurende de gehele tijd van intubatie elimineert. De methode gebruikt een 0,5 mm vezeloptische lichtbron die dient als een introducer de intubatiecanule direct in de muis trachea. We tonen aan dat het mogelijk is met deze procedure long mechanica in individuele muizen meten over een tijdsverloop van ten minste verscheidene weken. De techniek kan worden ingesteld met relatief weinig kosten en expertise, en het kan routinematig worden bereikt met relatief weinig training. Dit moet MAKE het mogelijk voor elk laboratorium om routinematig uitvoeren van deze intubatie, waardoor longitudinale studies in individuele muizen, om zo het aantal benodigde muizen en het verhogen van de statistische power met behulp van elke muis als zijn eigen controle.
Introduction
In 1999, Brown et al.. Artikel gepubliceerd beschrijft een werkwijze voor intubatie van de muizenlong 1. Een dergelijke techniek heeft veel nut in het doen van herhaalde longfunctie of broncho-alveolaire lavage in individuele muizen in longitudinale studies 2. Sinds die originele papieren, zijn er verschillende andere papieren die verschillende benaderingen beschreven om de muis intubatie 3-9. Terwijl al deze methoden kunnen met succes worden gebruikt, ze vereisen doorgaans aanzienlijke training of kosten. Een van de belangrijkste problemen met dergelijke intubatie is dat als de intubatiecanule benaderingen van de luchtpijp in afwachting inbrengen nadert, de canule zelf blokkeert het licht en daarmee de visualisatie van waar het moet gaan. Zo is de invoeging wordt blind op de meest kritieke tijd. In dit artikel laten we zien hoe eenvoudig en goedkoop deze visualisatie probleem te elimineren, waardoor wordt gewaarborgd succesvolle intubatie met relatief weinig training ofbieden.
Protocol
Representative Results
Discussion
De hier beschreven procedure heeft verschillende voordelen. Eerst de inrichting is eenvoudig en relatief goedkoop .. De fabricage van de inrichting vereist geen speciaal gereedschap of dure apparatuur. Het gebruik van een katheter introduceert die ook de lichtbron betekent dat men nooit uit het oog van de tracheale opening als de inbrenger de tracheale opening nadert verliest. Het gebruik van een 0,5 mm introducer dient ook te minimaliseren trauma die zich kunnen voordoen met een initiële insertie van een grotere canul…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Ondersteund door NIH HL-10342.
Materials
| Material | Company | Catalog # | Comment |
| Intubation cannula | BD Insylte, Sparks, MD or Jelco Optiva, Carlsbad, CA | 1-in.-long, 20-gauge intravenous (IV) catheter | |
| Fiber-optic cable | Edmund Optics, Barrington, NJ | #NT02-542 | Approximately 2-ft length of 0.5-mm optical fiber (Communication grade plastic fiber). The edge of the fiber end that is inserted into the trachea should be gently rounded by holding the fiber ≈2 cm from the end and then making small circles while dragging the tip for a few seconds on 1,000-grit emory paper. |
| Light Source | Volpi | NCL-150 | Although we use a 150-W halogen light source, any equivalent light source, even with much lower wattage can be used. |
| Silicone rubber stopper | A #1 silicone rubber stopper fits the light source used in this demonstration. Different light sources may require a different size. | ||
| Small silicone rubber tube | Cole-Palmer | EW-96410-13 | A ≈1.5 cm piece of silicone rubber tubing (0.8 inner diameter, 4 mm outer diameter) |
| Angled support stand | Ours is constucted from plexiglass, but any material to which a thread or wire can be affixed to hold the mouse at an almost vertical angle can be used. |
References
- Brown, R. H., Walters, D. M., Greenberg, R. S., Mitzner, W. A method of endotracheal intubation and pulmonary functional assessment for repeated studies in mice. J. Appl. Physiol. 87, 2362-2365 (1999).
- Walters, D. M., Wills-Karp, M., Mitzner, W. Assessment of cellular profile and lung function with repeated bronchoalveolar lavage in individual mice. Physiol. Genomics. 2, 29-36 (2000).
- Rivera, B., Miller, S., Brown, E., Price, R. A novel method for endotracheal intubation of mice and rats used in imaging studies. Contemporary Topics in Laboratory Animal Science / American Association for Laboratory Animal Science. 44, 52-55 (2005).
- Hamacher, J., et al. Microscopic wire guide-based orotracheal mouse intubation: description, evaluation and comparison with transillumination. Laboratory Animals. 42, 222-230 (2008).
- Spoelstra, E. N., et al. A novel and simple method for endotracheal intubation of mice. Laboratory Animals. 41, 128-135 (2007).
- Zhao, X., et al. A technique for retrograde intubation in mice. Lab Animal. 35, 39-42 (2006).
- Vergari, A., et al. A new method of orotracheal intubation in mice. European Review for Medical and Pharmacological Sciences. 8, 103-106 (2004).
- Vergari, A., Polito, A., Musumeci, M., Palazzesi, S., Marano, G. Video-assisted orotracheal intubation in mice. Laboratory Animals. 37, 204-206 (2003).
- Hastings, R. H., Summers-Torres, D. Direct Laryngoscopy in Mice. Contemporary Topics in Laboratory Animal Science / American Association for Laboratory Animal Science. 38, 33-35 (1999).
- MacDonald, K. D., Chang, H. Y., Mitzner, W. An improved simple method of mouse lung intubation. J. Appl. Physiol. 106, 984-987 (2009).
- Ewart, S. L., Levitt, R. C., Mitzner, W. Respiratory system mechanics in mice measured by end-inflation occlusion. Journal of Applied Physiology. 79, 560-566 (1995).
- MacDonald, K. D., McKenzie, K. R., Mitzner, W., Zeitlin, P. L. Lung Mechanics in Heterozygous CF Mice after Repeated LPS Dosing. Am. J. Respir. Crit. Care Med. 175 (4), A930 (2007).
