Summary

Eine einfache Methode der Maus Lung Intubation

Published: March 21, 2013
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Summary

Dieses Papier beschreibt eine striaghforward und effiziente Methode zur Intubation Mäusen Lungenfunktion Messungen oder pulmonale Instillation, dass die Mäuse sich zu erholen und zu späteren Zeitpunkten untersucht werden können. Das Verfahren beinhaltet eine kostengünstige LWL-Lichtquelle, die direkt beleuchtet die Luftröhre.

Abstract

Ein einfaches Verfahren, um Mäuse für Lungenfunktion Messungen intubieren hätte mehrere Vorteile in Längsschnittstudien mit einer begrenzten oder teure Tier. Einer der Gründe, dass dies nicht geschieht routinemäßig mehr ist, dass es relativ schwierig ist, obwohl es mehrere veröffentlichte Studien, die Wege dies zu erreichen beschreiben. In diesem Papier zeigen wir ein Verfahren, das eine der größten Hürden mit dieser Intubation assoziiert, dass der Visualisierung die Luftröhre während der gesamten Zeit der Intubation beseitigt. Der Ansatz nutzt eine 0,5 mm LWL-Lichtquelle, die als Einführer die Intubation Kanüle in die Luftröhre Maus lenken dient. Wir zeigen, dass es möglich ist, dieses Verfahren zu verwenden, um Lungenmechanik in einzelnen Mäusen über einen Zeitverlauf von mindestens mehreren Wochen zu messen. Die Technik kann mit relativ geringem Aufwand und Erfahrung eingestellt werden, und es kann routinemäßig mit relativ wenig Ausbildung erreicht werden. Dies sollte makê es jedem Labor routinemäßig Durchführung dieses Intubation, wodurch Längsschnittstudien in einzelnen Mäusen, wodurch eine Minimierung der Anzahl von Mäusen benötigt und Erhöhen der statistische unter Verwendung jeder Maus als seine eigene Kontrolle.

Introduction

In 1999 veröffentlichte Brown et al. Ein Papier beschreibt eine Methode zur Intubation der Mauslunge 1. Eine solche Technik hat erhebliche Utility dabei wiederholen Lungenfunktion oder Bronchalveolarlavages in einzelnen Mäusen in Längsschnittstudien 2. Seit diesem ursprünglichen Papier, gab es mehrere andere Papiere, die verschiedene Ansätze beschrieben haben, um mit der Maus Intubation 3-9. Während all dieser Verfahren erfolgreich verwendet werden kann, sie in der Regel nur mit erheblichem Ausbildung oder einsehbar. Eines der Hauptprobleme bei solchen Intubation ist, dass die Intubationskanüle Ansätze nähert sich die Luftröhre anstehenden Insertion, sperrt die Kanüle selbst das Licht und damit die Visualisierung von wo es gehen muss. Somit wird das Einführen blinden am meisten kritischen Zeitpunkt. In diesem Papier zeigen wir, wie einfach und kostengünstig zu beseitigen diese Visualisierung Problem, wodurch eine erfolgreiche Intubation mit relativ wenig Training oderErfahrung.

Protocol

Ein. Vorbereitung für die Vorgehensweise Man muss zuerst erhalten und bereiten die folgenden Elemente: Die Kanüle. Für Intubation von 20-35 g Mäusen, verwenden wir eine 1 oder 1,5 Zoll lang, 20 Gauge IV-Katheter (BD Insylte, Sparks, MD oder Jelco Optiva, Carlsbad, CA). Ein neuer steriler Katheter kann für jede Maus verwendet werden, aber Kathetern können auch nach der Sterilisation durch Einweichen in 70% Ethanol über Nacht wiederverwendet werden. Obwohl we…

Representative Results

Als Bewertung des Verfahrens verwendeten wir vier 20 Wochen alte männliche BALB / c-Mäuse mit einem durchschnittlichen Gewicht (± SEM) von 27,7 ± 0,40 g auf. Sie wurden auf fünf aufeinanderfolgende Wochen untersucht, wobei die Lungenwiderstand wurde unter Verwendung eines Systems, wie zuvor beschrieben 11. Jede Maus wurde mit Ketamin (100 ug / g BW) und Xylazin (15 ug / g BW) in Kochsalzlösung über IP-Injektion. Sie wurden dann intubiert wie oben beschrieben. Wenn es irgendeinen Zweifel, ob die Kanüle…

Discussion

Das hier beschriebene Verfahren hat mehrere Vorteile. Zunächst wird die Vorrichtung ist einfach und relativ kostengünstig .. Die Herstellung des Gerätes erfordert keine speziellen Werkzeuge oder teure Ausrüstung. Die Verwendung eines Katheters führt, daß auch die Lichtquelle bedeutet, daß man nie verliert der Trachealöffnung als die Einführeinrichtung die Trachealöffnung nähert. Die Verwendung eines 0,5 mm Einführungsvorrichtung dient auch dazu, Trauma, das mit einem anfänglichen Einsetzen eines größeren …

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Unterstützt durch NIH HL-10342.

Materials

Material Company Catalog # Comment
Intubation cannula BD Insylte, Sparks, MD or Jelco Optiva, Carlsbad, CA   1-in.-long, 20-gauge intravenous (IV) catheter
Fiber-optic cable Edmund Optics, Barrington, NJ #NT02-542 Approximately 2-ft length of 0.5-mm optical fiber (Communication grade plastic fiber). The edge of the fiber end that is inserted into the trachea should be gently rounded by holding the fiber ≈2 cm from the end and then making small circles while dragging the tip for a few seconds on 1,000-grit emory paper.
Light Source Volpi NCL-150 Although we use a 150-W halogen light source, any equivalent light source, even with much lower wattage can be used.
Silicone rubber stopper     A #1 silicone rubber stopper fits the light source used in this demonstration. Different light sources may require a different size.
Small silicone rubber tube Cole-Palmer EW-96410-13 A ≈1.5 cm piece of silicone rubber tubing (0.8 inner diameter, 4 mm outer diameter)
Angled support stand     Ours is constucted from plexiglass, but any material to which a thread or wire can be affixed to hold the mouse at an almost vertical angle can be used.

References

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Cite This Article
Das, S., MacDonald, K., Chang, H. S., Mitzner, W. A Simple Method of Mouse Lung Intubation. J. Vis. Exp. (73), e50318, doi:10.3791/50318 (2013).

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