En enkel metod för mus Lung Intubation
Summary
Detta dokument beskriver en striaghforward och effektiv metod för intuberande möss för lungfunktion mätningar eller pulmonell instillation som gör att mössen att återhämta sig och studeras vid senare tillfällen. Förfarandet innebär en billig fiberoptisk ljuskälla som direkt belyser luftstrupen.
Abstract
En enkel procedur för att intubera möss för lungfunktion mätningar skulle ha flera fördelar i longitudinella studier med ett begränsat antal eller dyra djur. En av anledningarna till att det inte görs mer rutinmässigt är att det är relativt svårt, trots att det finns flera publicerade studier som beskriver olika sätt att uppnå det. I detta dokument visar vi ett förfarande som eliminerar en av de stora hindren i samband med denna intubationen, som visualisera luftstrupen under hela tiden för intubering. Det tillvägagångssätt använder en 0,5 mm fiberoptiskt ljuskälla som fungerar som ett införingsorgan för att styra intuberingskanyl in musen luftstrupen. Vi visar att det är möjligt att använda detta förfarande för att mäta lungmekanik i individuella möss under ett tidsförlopp för åtminstone flera veckor. Tekniken kan ställas in med relativt liten kostnad och expertis, och det kan rutinmässigt genomföras med relativt lite utbildning. Detta bör makE det möjligt för alla laboratorier att rutinmässigt utföra denna intubation, varigenom longitudinella studier i enskilda möss, vilket minimerar antalet nödvändiga möss och öka den statistiska strömmen med varje mus som sin egen kontroll.
Introduction
Under 1999, publicerade Brown et al. Ett dokument som beskriver en metod för intubation av muslunga 1. En sådan teknik har stor nytta av att göra upprepade lungfunktion eller bronkoalveolär lavage i enskilda möss i longitudinella studier 2. Sedan den ursprungliga papper har det funnits flera andra tidningar som har beskrivit olika metoder för mus intubering 3-9. Även om alla dessa metoder kan användas med framgång, kräver de oftast stora utbildning eller kostnader. En av de viktigaste frågorna med sådan intubering är att eftersom strategierna intuberingskanyl närmar luftstrupen väntan införing blockerar kanylen själv ljuset och därmed visualisering av där den måste gå. Sålunda, blir insättningen blinda vid den mest kritiska tiden. I denna artikel visar hur man enkelt och billigt eliminera detta visualisering problem och därigenom säkerställa framgångsrika intubering med relativt liten utbildning ellererfarenhet.
Protocol
Representative Results
Discussion
Förfarandet beskrivet här har flera fördelar. Först anordningen är enkel och relativt billig .. Tillverkningen av anordningen kräver inte några speciella verktyg eller dyrbar utrustning. Användningen av en kateter införs som också är ljuskällan innebär att man aldrig förlorar ur sikte trakeala öppning som införingsanordningen närmar sig trakeala öppningen. Användningen av en 0,5 mm införare tjänar även till att minimera trauma som kan uppstå med en initial insättning av en större kanyl. Vi noter…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Stöds av NIH HL-10.342.
Materials
| Material | Company | Catalog # | Comment |
| Intubation cannula | BD Insylte, Sparks, MD or Jelco Optiva, Carlsbad, CA | 1-in.-long, 20-gauge intravenous (IV) catheter | |
| Fiber-optic cable | Edmund Optics, Barrington, NJ | #NT02-542 | Approximately 2-ft length of 0.5-mm optical fiber (Communication grade plastic fiber). The edge of the fiber end that is inserted into the trachea should be gently rounded by holding the fiber ≈2 cm from the end and then making small circles while dragging the tip for a few seconds on 1,000-grit emory paper. |
| Light Source | Volpi | NCL-150 | Although we use a 150-W halogen light source, any equivalent light source, even with much lower wattage can be used. |
| Silicone rubber stopper | A #1 silicone rubber stopper fits the light source used in this demonstration. Different light sources may require a different size. | ||
| Small silicone rubber tube | Cole-Palmer | EW-96410-13 | A ≈1.5 cm piece of silicone rubber tubing (0.8 inner diameter, 4 mm outer diameter) |
| Angled support stand | Ours is constucted from plexiglass, but any material to which a thread or wire can be affixed to hold the mouse at an almost vertical angle can be used. |
References
- Brown, R. H., Walters, D. M., Greenberg, R. S., Mitzner, W. A method of endotracheal intubation and pulmonary functional assessment for repeated studies in mice. J. Appl. Physiol. 87, 2362-2365 (1999).
- Walters, D. M., Wills-Karp, M., Mitzner, W. Assessment of cellular profile and lung function with repeated bronchoalveolar lavage in individual mice. Physiol. Genomics. 2, 29-36 (2000).
- Rivera, B., Miller, S., Brown, E., Price, R. A novel method for endotracheal intubation of mice and rats used in imaging studies. Contemporary Topics in Laboratory Animal Science / American Association for Laboratory Animal Science. 44, 52-55 (2005).
- Hamacher, J., et al. Microscopic wire guide-based orotracheal mouse intubation: description, evaluation and comparison with transillumination. Laboratory Animals. 42, 222-230 (2008).
- Spoelstra, E. N., et al. A novel and simple method for endotracheal intubation of mice. Laboratory Animals. 41, 128-135 (2007).
- Zhao, X., et al. A technique for retrograde intubation in mice. Lab Animal. 35, 39-42 (2006).
- Vergari, A., et al. A new method of orotracheal intubation in mice. European Review for Medical and Pharmacological Sciences. 8, 103-106 (2004).
- Vergari, A., Polito, A., Musumeci, M., Palazzesi, S., Marano, G. Video-assisted orotracheal intubation in mice. Laboratory Animals. 37, 204-206 (2003).
- Hastings, R. H., Summers-Torres, D. Direct Laryngoscopy in Mice. Contemporary Topics in Laboratory Animal Science / American Association for Laboratory Animal Science. 38, 33-35 (1999).
- MacDonald, K. D., Chang, H. Y., Mitzner, W. An improved simple method of mouse lung intubation. J. Appl. Physiol. 106, 984-987 (2009).
- Ewart, S. L., Levitt, R. C., Mitzner, W. Respiratory system mechanics in mice measured by end-inflation occlusion. Journal of Applied Physiology. 79, 560-566 (1995).
- MacDonald, K. D., McKenzie, K. R., Mitzner, W., Zeitlin, P. L. Lung Mechanics in Heterozygous CF Mice after Repeated LPS Dosing. Am. J. Respir. Crit. Care Med. 175 (4), A930 (2007).
