توصيف الأنسجة بعد طريقة جديدة تصنيفها فيما يتعلق الجلد الصغرى الطعوم الجيل
Summary
يصف بروتوكول طريقة جديدة لتفصيل الأنسجة البشرية وخلق ذاتي الطعوم الدقيقة التي، جنبا إلى جنب مع الإسفنج الكولاجين، وتؤدي إلى الحيوي المجمعات البشرية جاهزة للاستخدام في علاج آفات الجلد. وعلاوة على ذلك، فإن هذا النظام يحافظ على بقاء الخلية الطعوم الدقيقة في أوقات مختلفة بعد التقسيم الميكانيكية.
Abstract
وقد وضعت عدة أساليب جديدة في مجال التكنولوجيا الحيوية للحصول على تعليق الخلوية ذاتي أثناء الجراحة، من أجل توفير العلاجات خطوة واحدة للآفات الجلدية الحادة والمزمنة. وعلاوة على ذلك، فإن إدارة الجروح الحادة المزمنة ولكن أيضا الناجم عن الصدمات النفسية، ومرض السكري والالتهابات وأسباب أخرى، لا يزال تحديا. في هذه الدراسة وصفنا طريقة جديدة لخلق ذاتي الطعوم الصغيرة من الأنسجة الجلدية للمريض واحد وتطبيقاتها السريرية. وعلاوة على ذلك، كما أجريت في المختبر توصيف البيولوجي للأنسجة الجلدية المستمدة من الجلد، والأدمة-epidermized دي (ديد) والأدمة متعددة الجهاز و / أو الجهات المانحة متعددة الأنسجة. تم تصنيف جميع الأنسجة هذا البروتوكول الجديد، مما يتيح لنا الحصول قابلة للتطبيق الطعوم الدقيقة. على وجه الخصوص، وذكرت أن هذا البروتوكول مبتكرة قادرة على إنشاء المجمعات الحيوية ألحان ذاتي الطعوم الدقيقة والإسفنج الكولاجين جاهزة ليتم تطبيقها على الآفات الجلدية. وكلينيوذكرت تطبيق كال من ذاتي المجمعات الحيوية على آفة الساق أيضا، أظهرت حدوث تحسن في كل عملية إعادة epitalization ونعومة الآفة. بالإضافة إلى ذلك، أظهر لنا في المختبر النموذج الذي بقاء الخلية بعد التقسيم الميكانيكية مع هذا النظام هو الحفاظ على مر الزمن لمدة تصل إلى سبعة (7) أيام من الثقافة. لاحظنا أيضا، من خلال تحليل التدفق الخلوي، الذي يتكون من مجموعة من الخلايا التي تم الحصول عليها من تصنيف العديد من أنواع الخلايا، بما في ذلك الخلايا الجذعية الوسيطة، التي تمارس دورا رئيسيا في عمليات تجديد الأنسجة وإصلاحها، لإمكانات التجدد العالية. وأخيرا، أثبتنا في المختبر أن هذا الإجراء يحافظ على عقم الطعوم الدقيقة عندما مثقف في أطباق أجار. وباختصار، فإننا نستنتج أن هذا النهج التجديدي الجديد يمكن أن يكون أداة واعدة بالنسبة للأطباء للحصول على في خطوة واحدة قابلة للحياة، معقمة وجاهزة للاستخدام الطعوم الدقيقة التي يمكن تطبيقها وحدها أو بالاشتراك مع معظم scaffo البيولوجية المشتركةلدس.
Introduction
في السنوات الأخيرة، وقد وضعت عدة أساليب جديدة في مجال التكنولوجيا الحيوية للحصول على تعليق الخلوية ذاتي أثناء الجراحة من أجل تقديم العلاج خطوة واحدة للآفات الجلدية الحادة والمزمنة. وعلاوة على ذلك، فإن إدارة الجروح الحادة ولكن المزمنة أساسا الناجمة عن الصدمات النفسية، ومرض السكري، والالتهابات، وغيرها من الأسباب، لا يزال تحديا. وهناك أدلة متزايدة على أن الجروح المزمنة أصبحت مشكلة صحية عالمية خطيرة، مما تسبب عبئا ماليا هائلا على أنظمة الرعاية الصحية في جميع أنحاء العالم 1.
لزيادة نسبة النجاح في علاج آفات الجلد، وعدم وجود تلاعب واسعة النطاق (بما في ذلك تعزيز الخلوي) والحفاظ على ظروف معقمة ضرورية، من أجل خلق تعليق الخلوية التي يمكن تطبيقها على الفور على المنطقة المتضررة من المرضى، وبالتالي تجنب تجهيز أطول في غرف الأبحاث مثل مصانع الخلية. شارعarting من خزعات الجلد الصغيرة، والطحن، الطرد المركزي وطرق الفصل أخرى (على سبيل المثال، الأنزيمية أو الميكانيكية)، كثيرا ما تستخدم للحصول على تعليق الخلوية، التي يمكن تربيتها في وسط النمو. كل من هذه الأساليب تحتاج عادة إلى فترة طويلة من التنفيذ، مشددا على هياكل الخلية، ويؤدي إلى الحد من بقاء الخلية. الجانب المهم الآخر هو الحصول على تعليق الخلوي الذاتي على استعداد لاستخدامها من قبل الأطباء، على سبيل المثال، لإصلاح المناطق المتضررة. وعلاوة على ذلك، فإنه من الثابت أيضا أن ترقيع الأنسجة ذاتي البقاء على قيد الحياة إجراءات نقل البقاء على قيد الحياة في نهاية المطاف في موقع المتلقي بمبادئ الاستقراء والتوصيل 2 و 3. وينبغي أن تكون الأنسجة الكسب غير المشروع مثالية متاحة بسهولة ويكون منخفض استضداد والجهات المانحة موقع الاعتلال 4.
على أساس هذه الأدلة، كان الهدف الأول من هذه الدراسة هو خلق ذاتي المجمعات الحيوية المناسبة لالتطبيق السريري في إصلاح الأنسجة. لهذا الغرض، ونحن تصف طريقة جديدة للحصول على ذاتي الطعوم الدقيقة بدءا من الأنسجة الجلدية التي كانت مصنفة حسب هذا البروتوكول. كما يوصف عرض القضية هنا بمثابة التطبيق السريري لذاتي الطعوم الدقيقة التي حصلت عليها هذا البروتوكول في تركيبة مع الإسفنج الكولاجين. وقد سبق وذكرت هذا النهج لتكون فعالة في تصنيف الميكانيكي للأنسجة البشرية 5 و تم استخدامه سريريا لترقيع وتجديد الأنسجة الجلدية 6،7 فضلا عن علاجات التجدد الأنسجة الضامة في جراحة الفم-الفكين 8-10 .
وبالإضافة إلى ذلك، كان الهدف الثاني من هذه الدراسة توصيف البيولوجي للأنسجة الجلدية بعد التقسيم من خلال هذا البروتوكول. لهذا الغرض، وعينات مثلي مختلفة من الأنسجة الجلدية المستمدة من منطقة جذع مختلف الأعضاء المتعددةوتمت معالجة / أو الجهات المانحة متعددة الأنسجة التالية قوانين الوطنية على حصاد ومعالجة وتوزيع الأنسجة للزرع (CNT 2013) في بنك الجلد إميليا رومانيا الإقليمي.
حالة عرض تقديمي:
وقد اعترف المريضة البالغة من العمر 35 عاما تظهر الصدمة معقدة بسبب حادث سيارة إلى وحدة العناية المركزة في مستشفى أنكونا. أظهر المريض التهاب في الساق بسبب جرح مفتوح وكسر مركب استقر مع تثبيت خارجي. تم تنفيذ اثنين التنضير جذري وعندما أصبح الجرح نظيفة بعد العلاج الضغط السلبي (العلاج VAC) والسمحاق ظهر صحية، وتطبيق البروتوكول بعد شهرين من الانتعاش. بعد التقسيم مع هذا النظام، تم استخدام الطعوم الدقيقة التي تم الحصول عليها لإنشاء المجمعات الحيوية مع اسفنجة الكولاجين التي تم زرعها في وقت لاحق من أجل تحقيق فعاليتها على إصلاح الآفة.
Protocol
Representative Results
Discussion
وأظهرت هذه الدراسة الأولية أن الطعوم الدقيقة التي حصلت عليها هذا البروتوكول يمكن الجمع مع الإسفنج الكولاجين، كما سبق أن ذكرت في التطبيقات السريرية الأخرى، لتحسين فعالية زرع الجزئي الطعوم 9 و 10. وعلى وجه الخصوص، وذكرت هذه الدراسة قدرة الحيوية -complexes، مكونة من ال…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
الكتاب نود أن شكر الدكتور فيديريكا Zanzottera للمساهمة في دراسة أداء تحليل التدفق الخلوي.
Materials
| Rigenera Machine | Human Brain Wave | 79210R | |
| Rigeneracons | Human Brain Wave | 79450S | |
| MTT | Roche Diagnostic GmbH | 11465007001 | |
| RPMI medium | PBI International | 733-2292 | |
| DMEM medium | PBI International | F 0415 | |
| Antibiotics | Biological Industries PBI | 03-038-1 | |
| Antibodies for FACS Analysis | eBiosciences | code 12-1469 for CD146-P; code 17-0349 for CD34-APC | |
| Columbia agar | BioMerieux Company | 43041 | |
| Condress® | Abiogen Pharma | collagen sponge used for bio-complexes | |
| DMSO | Bioniche Pharma USA LLC, Lake Forest, IL | ||
| NaCl solution | Fresenius Kabi, Bad Homburg, Germany | ||
| Xylene | Carlo Erba |
References
- Sen, C. K., et al. Human skin wounds: a major and snowballing threat to public health and the economy. Wound Repair Regen. 17, 763-771 (2009).
- Ellis, E., Sinn, D. Use of homologous bone grafts in maxillofacial surgery. J Oral Maxillofac Surg. 51, 1181-1193 (1993).
- Nguyen, A., Pasyk, K. A., Bouvier, T. N., Hassett, C. A., Argenta, L. C. Comparative study of survival of autologous adipose tissue taken and transplanted by different techniques. Plast Reconstr Sur. 85, 378-389 (1990).
- Abuzeni, P. Z., Alexander, R. W. Enhancement of Autologous Fat Transplantation With Platelet Rich Plasma. AJCS. 18 (2), 59-70 (2001).
- Trovato, L., et al. A New Medical Device Rigeneracons Allows to Obtain Viable Micro-Grafts from Mechanical Disaggregation of Human Tissues. J Cell Physiol. , (2015).
- Zanzottera, F., Lavezzari, E., Trovato, L., Icardi, A., Graziano, A. Adipose Derived Stem Cells and Growth Factors Applied on Hair Transplantation Follow-Up of Clinical Outcome. JCDSA. 4 (4), 268-274 (2014).
- Giaccone, M., Brunetti, M., Camandona, M., Trovato, L., Graziano, A. A New Medical Device, Based on Rigenera Protocol in the Management of Complex Wounds. J Stem Cells Res, Rev & Rep. 1 (3), 3 (2014).
- Aimetti, M., Ferrarotti, F., Cricenti, L., Mariani, G. M., Romano, F. Autologous dental pulp stem cells in periodontal regeneration: a case report. Int J Periodontics Restorative Dent. 34 (3), s27-s33 (2014).
- Graziano, A., Carinci, F., Scolaro, S., D’Aquino, R. Periodontal tissue generation using autologous dental ligament micro-grafts: case report with 6 months follow-up. AOMS. 1 (2), 20 (2013).
- Brunelli, G., Motroni, A., Graziano, A., D’Aquino, R., et al. Sinus lift tissue engineering using autologous pulp micro-grafts: A case report of bone density evaluation. J Indian Soc Periodontol. 17 (5), 644-647 (2013).
- Ellner, P. D., Stoessel, C. J., Drakeford, E., Vasi, F. A new culture medium for medical bacteriology. Am J Clin Pathol. 45, 502-504 (1966).
