אפיון רקמות לאחר שיטה חדשה חלוקה לעור מיקרו שתלי הדור
Summary
הפרוטוקול מתאר שיטה חדשה disaggregate ברקמות אדם ליצור-שתל מייקרו עצמי, וזה ביחד עם ספוגי קולגן, להצמיח-מתחמים ביו אדם מוכנים לשימוש בטיפול נגעים בעור. יתר על כן, מערכת זו שומרת כדאיות התא של שתלי מיקרו בזמנים שונים לאחר חלוקה מכני.
Abstract
כמה שיטות חדשות פותחו בתחום הביוטכנולוגיה להשיג השעיות הסלולר עצמיות במהלך ניתוח, על מנת לספק טיפולי צעד אחד עבור נגעי עור כרוניים וחמורים. יתר על כן, ההנהלה כרוני אלא גם פצעים חריפים כתוצאה מטראומה, סוכרת, זיהומים וכן גורמים נוספים, נותרת מאתגרת. במחקר זה אנו מתארים שיטה חדשה ליצירה-שתל מייקרו עצמי מרקמות עורית של חולה יחיד היישום הקליני שלהם. יתר על כן, במבחנה ביולוגית ואפיון של רקמות עורית נגזרו עור, הדרמיס-epidermized דה (Ded) ו הדרמיס של באיברים רבים ו / או תורמים רבות רקמות גם בוצע. כל הרקמות היו מפוצל על פי הפרוטוקול החדש, המאפשר לנו להשיג-שתלי מיקרו קיימא. בפרט, דיווחנו כי פרוטוקול חדשני זו הוא מסוגל ליצור ביו-מתחמים שהלחינו שתלי-מייקרו עצמי וקולגן ספוגים מוכן להיות מיושם על פצעים בעור. cliniיישום קאל של מתחמי ביו עצמיים על נגע ברגלו נמסר גם, מראה שיפור של שני תהליך מחדש epitalization ורכות של הנגע. בנוסף, המודל במבחנה שלנו הראה כי כדאיויות תא לאחר חלוקה מכאנית עם מערכת זו נשמרות לאורך זמן עד שבעה (7) ימים של התרבות. אנחנו גם ציינו, על ידי ניתוח תזרים cytometry, כי ברכת תאים המתקבלים חלוק מורכבת של תאים מסוגים שונים, כוללים בתאי גזע mesenchymal, כי להפעיל תפקיד מרכזי בתהליכי התחדשות ותיקון רקמות, עבור פוטנציאל ההתחדשות הגבוה שלהם. לבסוף, הראינו במבחנה כי נוהל זה שומר על סטריליות של שתלי מיקרו כאשר בתרבית במנות אגר. לסיכום, אנו מגיעים למסקנה כי גישת משובים חדשה זו יכולה להיות כלי מבטיח עבור קלינאים להשיג בצעד אחד קיימא, סטרילי ומוכנה לשימוש-שתל מייקרו שניתן ליישם לבד או בשילוב עם מרבית scaffo הביולוגי המשותףLDS.
Introduction
בשנים האחרונות, מספר שיטות חדשות פותחו בתחום הביוטכנולוגיה להשיג השעיות הסלולר עצמיות במהלך ניתוח על מנת לספק טיפולי צעד אחד עבור נגעי עור כרוניים וחמורים. יתר על כן, את הניהול של פצעים חריפים אבל בעיקר כרוניים כתוצאה מטראומה, סוכרת, זיהומים, וכן גורמים נוספים, נותר מאתגר. יש ראיות גוברות כי בפצעים כרוניים הפכו בעיה בריאותית עולמית רצינית, ועלולים ליצור ניטל כספי עצום על מערכות בריאות ברחבי עולם 1.
כדי להגדיל את שיעור ההצלחה בטיפול נגעים בעור, בהיעדר המניפולציה נרחבת (כולל שיפור הסלולר) והשמירה על תנאים סטריליים חיוניים, כדי ליצור השעיה הסלולר שניתן ליישם באופן מיידי על האזור הפגוע של חולים, ובכך להימנע עיבוד יותר מן החדרים הנקיים כגון מפעלי סלולרי. רחובarting ביופסיות עור קטנים, טחינה, צנטריפוגה ושיטות הפרדה אחרות (למשל, אנזימטי או מכאני), משמשים לעתים קרובות כדי לקבל השעיה הסלולר, אשר יכול להיות מתורבתת במדיום גידול. כל השיטות האלה דורשים בדרך כלל זמן רב של ביצוע, והדגיש מבני התא, מה שמוביל לירידה של כדאיויות תא. היבט נוסף משמעותי הוא להשיג השעיה הסלולר עצמית מוכנה להיות בשימוש על ידי רופאים, למשל, כדי לתקן אזורים פגועים. יתר על כן, היא מבוססת היטב כי שתל רקמה עצמית לשרוד את נהלי ההעברה בסופו של דבר לשרוד האתר המקבל על פי העקרונות של אינדוקציה וחוטים 2, 3. רקמת השתל האידיאלית צריכה להיות זמינה ויש antigenicity נמוך באתר תורם לתחלואה 4.
על בסיס עדויות אלה, המטרה הראשונה של המחקר הנוכחי הייתה ליצור מתחמי ביו עצמיים מתאימיםיישום קליני בתיקון רקמות. לשם כך, אנו מתארים שיטה חדשה לקבלה-שתל מייקרו עצמי החל רקמות עורית שהיו מפוצלות על פי פרוטוקול זה. הצגה מקרה גם מתוארת במסמך זה כיישום קליני של שתלי מייקרו העצמיים מתקבלים על ידי פרוטוקול זה בשילוב עם ספוגי קולגן. גישה זו כבר דווחה להיות יעיל החלוקה המכאנית של רקמות אנושיות 5 וזה כבר בשימוש קליני עבור שתלים והתחדשות של רקמות עורי 6,7 וכן עבור טיפולים רגנרטיבית של רקמות חיבור בכירורגיה אוראלית ולסת 8-10 .
בנוסף, המטרה השנייה של המחקר היה ביולוגי והאפיון של הרקמות עורית לאחר החלוקה שלהם על ידי פרוטוקול זה. לשם כך, דגימות הומולוגיות שונות של רקמות עורית נגזרו באזור תא המטען של באיברים רבים שוניםו / או תורמים רבות רקמות עובד הבאים חוקים לאומיים קציר, עיבוד והפצה של רקמות להשתלה (CNT 2013) ב Skin אמיליה רומניה האזורית בנק.
הצגת מקרה:
מטופלת 35 בן מראה טראומה מורכבת בשל תאונת דרכים אושפז ביחידה לטיפול נמרץ של בית החולים אנקונה. החולה הראה זיהום על הרגל בשל פצע פתוח שבר מסובך התייצב עם קיבוע חיצוני. שנייה הטריה רדיקלית בוצעה וכאשר הפצע הפך נקי לאחר טיפול בלחץ שלילי (טיפול VAC) ואת קרום העצם ונראה בריא, אנחנו מוחלים הפרוטוקול לאחר חודשי התאוששות. לאחר חלוקה עם מערכת זו, מיקרו-שתלי השיג שימשו כדי ליצור ביו-קומפלקסים עם ספוג קולגן אשר הושתלו מכן על מנת לחקור את יעילותם על תיקון הנגע.
Protocol
Representative Results
Discussion
מחקר ראשוני מראה כי שתלי מיקרו-מתקבל על ידי פרוטוקול זה יכול להיות משולב עם ספוגים קולגן, כפי שכבר דווח ביישומים קליניים אחרים, כדי לייעל את היעילות של שתלים מיקרו שתלי 9, 10. בפרט, מחקר זה דיווח על קיבולת של ביו -complexes, היווה ידי שתלים-מייקרו וספוגי קולגן, כדי adjuvant ל…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
המחברים מבקשים הודות ד"ר פדריקה Zanzottera לתרום לחקר ביצוע ניתוח תזרים cytometry.
Materials
| Rigenera Machine | Human Brain Wave | 79210R | |
| Rigeneracons | Human Brain Wave | 79450S | |
| MTT | Roche Diagnostic GmbH | 11465007001 | |
| RPMI medium | PBI International | 733-2292 | |
| DMEM medium | PBI International | F 0415 | |
| Antibiotics | Biological Industries PBI | 03-038-1 | |
| Antibodies for FACS Analysis | eBiosciences | code 12-1469 for CD146-P; code 17-0349 for CD34-APC | |
| Columbia agar | BioMerieux Company | 43041 | |
| Condress® | Abiogen Pharma | collagen sponge used for bio-complexes | |
| DMSO | Bioniche Pharma USA LLC, Lake Forest, IL | ||
| NaCl solution | Fresenius Kabi, Bad Homburg, Germany | ||
| Xylene | Carlo Erba |
References
- Sen, C. K., et al. Human skin wounds: a major and snowballing threat to public health and the economy. Wound Repair Regen. 17, 763-771 (2009).
- Ellis, E., Sinn, D. Use of homologous bone grafts in maxillofacial surgery. J Oral Maxillofac Surg. 51, 1181-1193 (1993).
- Nguyen, A., Pasyk, K. A., Bouvier, T. N., Hassett, C. A., Argenta, L. C. Comparative study of survival of autologous adipose tissue taken and transplanted by different techniques. Plast Reconstr Sur. 85, 378-389 (1990).
- Abuzeni, P. Z., Alexander, R. W. Enhancement of Autologous Fat Transplantation With Platelet Rich Plasma. AJCS. 18 (2), 59-70 (2001).
- Trovato, L., et al. A New Medical Device Rigeneracons Allows to Obtain Viable Micro-Grafts from Mechanical Disaggregation of Human Tissues. J Cell Physiol. , (2015).
- Zanzottera, F., Lavezzari, E., Trovato, L., Icardi, A., Graziano, A. Adipose Derived Stem Cells and Growth Factors Applied on Hair Transplantation Follow-Up of Clinical Outcome. JCDSA. 4 (4), 268-274 (2014).
- Giaccone, M., Brunetti, M., Camandona, M., Trovato, L., Graziano, A. A New Medical Device, Based on Rigenera Protocol in the Management of Complex Wounds. J Stem Cells Res, Rev & Rep. 1 (3), 3 (2014).
- Aimetti, M., Ferrarotti, F., Cricenti, L., Mariani, G. M., Romano, F. Autologous dental pulp stem cells in periodontal regeneration: a case report. Int J Periodontics Restorative Dent. 34 (3), s27-s33 (2014).
- Graziano, A., Carinci, F., Scolaro, S., D’Aquino, R. Periodontal tissue generation using autologous dental ligament micro-grafts: case report with 6 months follow-up. AOMS. 1 (2), 20 (2013).
- Brunelli, G., Motroni, A., Graziano, A., D’Aquino, R., et al. Sinus lift tissue engineering using autologous pulp micro-grafts: A case report of bone density evaluation. J Indian Soc Periodontol. 17 (5), 644-647 (2013).
- Ellner, P. D., Stoessel, C. J., Drakeford, E., Vasi, F. A new culture medium for medical bacteriology. Am J Clin Pathol. 45, 502-504 (1966).
