后皮肤微移植生成一个新的方法解聚表征的组织
Summary
该协议描述了一种新的方法来分解人体组织和创建自体微移植，与胶原蛋白海绵相结合，引起人体生物复合物准备皮损的治疗使用。另外，该系统保持在机械解聚后不同时间的微移植物的细胞生存力。
Abstract
几种新的方法，已经开发了生物技术在手术过程中，得到的自体细胞的悬浮液的领域中，为了对急性和慢性皮肤损害提供一个步骤的治疗方法。而且，从创伤，糖尿病，感染和其他原因引起的慢性而且急性伤口的管理，仍然具有挑战性。在这项研究中，我们描述了一个新的方法来创建从单个患者的皮肤组织及其临床应用自体微移植。此外，还进行体外皮肤，去epidermized真皮（DED）和多器官和/或多组织捐助者的真皮源性皮肤组织的生物学特性。所有组织被这个新协议分类的，使我们能够得到可行的微移植物。特别是，我们报道了这一创新协议是能够创建自体微移植物和胶原海绵准备上皮损要施加由生物复合物。在克里尼上的腿病变自体生物复合物的校准应用也有报告，表示再epitalization过程和病变的柔软性两者的改进。此外，我们的体外模型表明，该系统机械解聚后的细胞活力保持在一段时间内培养可达七（7）天。我们还观察到，通过流式细胞术分析，从解聚获得的细胞的池是由几个细胞类型，包括间质干细胞，即施加在组织再生和修复的方法中的一个关键的作用，对它们的高的再生潜力。最后，我们表现出体外 ，在琼脂培养的菜时，此过程中保持微移植的不育。总之，我们的结论是这种新的再生方法可以是一个有希望的工具，临床医师在一个步骤上可行，无菌的，并且准备使用，可以单独或组合使用最常见的生物scaffo施加微移植物获得LDS。
Introduction
在过去的几年中，一些新的方法，已经开发了生物技术在手术过程中，得到的自体细胞的悬浮液的领域中，以治疗急性和慢性皮肤损伤提供一步法治疗。而且，从创伤，糖尿病，感染和其他原因造成的急性，但主要是慢性伤口的管理，仍然具有挑战性。有越来越多的证据表明，慢性伤口已成为严重的全球性健康问题，引起全世界对1的医疗保健系统巨大的财政负担。
为了增加在皮肤损伤的治疗成功率，缺乏广泛操纵（包括蜂窝增强）和无菌条件下的维护是必要的，以创建可以在的受损区域被立即施加一个细胞悬浮液患者中，从而避免在洁净室较长的处理，如细胞工厂。圣从小皮肤活检，研磨，离心等分离方法（ 例如，酶或机械）arting，经常用于获得一个细胞悬浮液，其可在生长培养基中培养。所有的这些方法通常需要执行的很长一段时间，强调细胞结构，并导致降低细胞生存力的。另一个显著方面是获得准备好由临床医师可使用自体的细胞悬浮液，例如，以修复受损的区域。此外，众所周知，自体组织移植物存活的过户手续于通过感应和传导2,3的原则接收站点，最终生存下来。理想的移植组织应该随时可用并具有低抗原性和供区的发病率4。
这些证据的基础上，本研究的第一个目的是创建适合自体生物复合物在组织修复的临床应用。为此，我们描述了一个新的方法，以从被这个协议分类的皮肤组织开始自体微移植。案例呈现在本文中也描述为临床应用该协议结合胶原蛋白海绵获得自体微移植。这种方法已被报道为在人组织5的机械分解效率，并已用于临床移植物和真皮组织6,7的再生以及用于在口腔颌面外科8-10结缔组织再生疗法。
此外，本研究的第二个目的是皮肤组织的本协议其分解后的生物学特性。为此目的，皮肤组织的不同的同源样品来自不同的多器官的躯干区衍生和/或多组织捐赠者进行了处理上的收获，加工下列国家的规则和分配在艾米利亚 – 罗马涅地区的皮肤银行移植组织（CNT 2013年）。
病例报告：
显示由于车祸复杂外伤35岁的女病人被送往医院安科纳的重症监护病房。病人表现的腿感染，由于一个开放的伤口，并用外固定稳定复合骨折。两个病灶清除，实施时间与伤口成为负压治疗（VAC疗法）后的清洁和骨膜出现了健康，我们就从恢复两个月后，应用的协议。这个系统分解后，得到了微移植物被用来创建生物复合物胶原海绵这些建议后来为了植入，调查其对病灶修复功效。
Protocol
Representative Results
Discussion
这一初步研究表明，通过该协议得到微移植物可与胶原海绵结合，如已经报道了其它临床应用中，以优化微移植物的植入物9的效力，10，特别是，本研究中报道的生物的能力-complexes，通过微移植物和胶原海绵构成的，之后，从临床应用30天佐剂的腿病变的伤口愈合。此外， 在体外结果提供的证据有关此协议的有效性来分解三个不同的皮肤组织，保持可观的细胞存活率?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
作者要感谢费德里卡Zanzottera博士对促进执行流式细胞分析研究。
Materials
| Rigenera Machine | Human Brain Wave | 79210R | |
| Rigeneracons | Human Brain Wave | 79450S | |
| MTT | Roche Diagnostic GmbH | 11465007001 | |
| RPMI medium | PBI International | 733-2292 | |
| DMEM medium | PBI International | F 0415 | |
| Antibiotics | Biological Industries PBI | 03-038-1 | |
| Antibodies for FACS Analysis | eBiosciences | code 12-1469 for CD146-P; code 17-0349 for CD34-APC | |
| Columbia agar | BioMerieux Company | 43041 | |
| Condress® | Abiogen Pharma | collagen sponge used for bio-complexes | |
| DMSO | Bioniche Pharma USA LLC, Lake Forest, IL | ||
| NaCl solution | Fresenius Kabi, Bad Homburg, Germany | ||
| Xylene | Carlo Erba |
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