交配和四分体分离衣藻遗传分析
Summary
交配和四分体分离的遗传分析<em>衣藻</em>。在这里，我们展示了标准方法对配子，交配，合子萌发和四分体夹层。该协议包括一个易于遵循的一系列步骤，这将使科学家所不熟悉的遗传方法适合<em>衣</em>。
Abstract
单细胞绿藻<em>衣藻</em>（<em>衣</em>）已成为一个流行的有机体，在不同的领域，由于其简单的生命周期，细胞生物学和遗传学的研究，缓解遗传分析，基因资源，原子核transformability和两个细胞器的增长和操纵。当遗传的方法是使用在交配菌株是一种常见的做法<em> Chlamydomonass</em创建主导地位的营养分析二倍体，或四分体夹层，以确定核与细胞器的继承，测试等位，分析epistasy，或生成的图位克隆的目的的人群。此外，遗传杂交经常使用结合起来，特别是核基因型的细胞器基因型。在这里，我们展示了标准方法对配子，交配，合子萌发和四分体分离。该协议包括一个易于遵循的一系列步骤，这将使科学家所不熟悉的遗传方法适合<em>衣</em>。关键参数和故障点的解释。最后，提供进一步的信息和替代方法的资源。
Protocol
Discussion
遗传分析是简单的在衣 ，但它需要特别的技术，以产生配子和独立的四分体后代。与健康株，这些技术很容易掌握。一些突变株，它成为一门艺术，和读者应参考最近出版的衣历史笔记的原始资料和实用提示第1卷。此外，应该指出的是，有许多变化的基本主题，如上所述，从方法诱导配子，受精卵分布和解剖模式。最终，每个研究员认为自己的舒适区，或适应实验室专用协?…
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
该协议是基于在实验室研究所生物学物理化学公司，巴黎，法国的弗朗西斯，安德烈沃尔曼学到的技术。作者欠报恩韦芝Bascou，原本星展，以基因工程技术生产的衣，衣在作者实验室的研究是由美国国家科学基金会奖MCB – 0646350的支持。
Materials
| Material Name | Typ | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| CC-125 | Mating type plus strain | Chlamydomonas Stock Center | ||
| CC-124 | Mating type minus strain | Chlamydomonas Stock Center | ||
| Tris-Acetate-Phosphate (TAP) | Growth medium | |||
| N10 | Growth medium | |||
| Difco agar | Reagent | |||
| Fisherbrand Stainless-Steel Blades | Tools | Fisher Scientific | 08-916-5B | |
| BD Surgical Blade Handles | Tools | Fisher Scientific | 08-914-5 | |
| Fisherbrand Metal Scalpels | Tools | Fisher Scientific | 08-920A |
Referenzen
- Harris, E. H. The Chlamydomonas Sourcebook: Introduction to Chlamydomonas and Its Laboratory Use. Conf Proc IEEE Eng Med Biol Soc. , 119-273 (2005).
