번식과 Tetrad 분리 Chlamydomonas reinhardtii 유전자 분석을위한
Summary
교미 및 tetrad 분리는 유전자 분석을 위해 필요합니다<em> Chlamydomonas reinhardtii</em>. 여기 gametogenesis, 짝짓기, 접합자 발아 및 tetrad의 해부에 대한 표준 방법을 보여줍니다. 이 프로토콜은 덜 익숙한 과학자 유전 방식을받을 수있는 것입 단계의 쉬운 따라 시리즈로 구성되어 있습니다<em> Chlamydomonas</em>.
Abstract
단세포 녹색 알가<em> Chlamydomonas reinhardtii</em> (<em> Chlamydomonas</em>) 때문에 간단한 생활주기의 세포 생물학과 유전학의 다양한 분야에서 연구 인기 유기체되어, 유전자 분석, 게놈 자원, 그리고 핵의 transformability 두 organelles을위한 성장과 조작의 용이성. 유전자 접근 방법을 사용하는 경우 짝짓기 변종은 일반적인 관행입니다<em> Chlamydomonass</em> 지배력 분석을위한 식물 diploids를 만들거나 확인할 핵 대 organellar 상속에 tetrad 절개를 따라 allelism를 테스트, epistasy을 분석하거나,지도를 기반 복제의 목적을 위해 인구를 생성합니다. 또한, 유전자 십자가는 정기적으로 특정 핵 genotypes와 organellar genotypes을 결합하는 데 사용됩니다. 여기 gametogenesis, 짝짓기, 접합자 발아 및 tetrad 분리에 대한 표준 방법을 보여줍니다. 이 프로토콜은 덜 익숙한 과학자 유전 방식을받을 수있는 것입 단계의 쉬운 따라 시리즈로 구성되어 있습니다<em> Chlamydomonas</em>. 주요 매개 변수와 문제가 장소가 설명되어 있습니다. 마지막으로, 자세한 내용 및 다른 방법에 대한 자료를 제공합니다.
Protocol
Discussion
유전자 분석 Chlamydomonas에서 간단하지만, 그것은 특정 기술이 gametes와 별도 tetrad의 자손을 생성해야합니다. 건강 변종과 함께, 기술은 쉽게 찾았습니다. 일부 돌연변이 변종으로, 그것은 예술의 더되고, 독자들은 역사 노트와 실용적인 힌트에 대한 최근 출판 Chlamydomonas의 Sourcebook의 볼륨 1을 참조해야합니다. 또한, 그것은 기본적인 테마에 많은 변화 접합자 유통 및 해부의 패턴, 유도 …
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 프로토콜은 인스티투트 드 Biologie Physico – Chimique, 파리, 프랑스의 프란시스 – 엉드헤 Wollman의 실험실에서 배운 기술을 기반으로합니다. 저자는 원래 Chlamydomonas 유전자 기술에 DBS를 도입 재클린 지라 – Bascou에 분께. 저자 실험실에서 Chlamydomonas 연구는 국립 과학 재단 (National Science Foundation)의 상을 MCB – 0646350에서 지원됩니다.
Materials
| Material Name | Typ | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| CC-125 | Mating type plus strain | Chlamydomonas Stock Center | ||
| CC-124 | Mating type minus strain | Chlamydomonas Stock Center | ||
| Tris-Acetate-Phosphate (TAP) | Growth medium | |||
| N10 | Growth medium | |||
| Difco agar | Reagent | |||
| Fisherbrand Stainless-Steel Blades | Tools | Fisher Scientific | 08-916-5B | |
| BD Surgical Blade Handles | Tools | Fisher Scientific | 08-914-5 | |
| Fisherbrand Metal Scalpels | Tools | Fisher Scientific | 08-920A |
Referenzen
- Harris, E. H. The Chlamydomonas Sourcebook: Introduction to Chlamydomonas and Its Laboratory Use. Conf Proc IEEE Eng Med Biol Soc. , 119-273 (2005).
