Çiftleşme ve tetrad Ayırma Chlamydomonas reinhardtii Genetik Analiz
Summary
Çiftleşme ve tetrad ayrılması genetik analiz için gerekli olan<em> Chlamydomonas reinhardtii</em>. Burada gametogenezis, çiftleşme, zigot çimlenme ve tetrad diseksiyon için standart yöntemler göstermektedir. Bu protokol daha az aşina olan bilim adamları genetik yaklaşımlar müsait hale getirecek adımların takip edilmesi kolay bir serisi<em> Chlamydomonas</em>.
Abstract
Tek hücreli yeşil alg<em> Chlamydomonas reinhardtii</em> (<em> Chlamydomonas</em>), Basit bir yaşam döngüsü nedeniyle, hücre biyolojisi ve genetik çeşitli alanlarda araştırma için popüler bir organizma haline gelmiştir, genetik analiz, genomik kaynakları ve çekirdeğinde, transformability ve her iki organelleri büyüme ve manipülasyon kolaylığı. Çiftleşme suşlarının genetik yaklaşımlar kullanıldığında yaygın bir uygulamadır<em> Chlamydomonass</em> Hâkimiyet analizi için vejetatif diploitler oluşturmak ya da tespit nükleer vs organel miras tetrad diseksiyonu aşağıdaki allelism test etmek, epistasy analiz etmek veya harita tabanlı klonlama amaçlı nüfus oluşturmak için. Ayrıca, genetik haçlar rutin organel genotipleri özellikle nükleer genotipleri ile birleştirmek için kullanılır. Burada gametogenezis, çiftleşme, zigot çimlenme ve tetrad ayrılması için standart yöntemler göstermektedir. Bu protokol daha az aşina olan bilim adamları genetik yaklaşımlar müsait hale getirecek adımların takip edilmesi kolay bir serisi<em> Chlamydomonas</em>. Temel parametreleri ve sorunlu noktalar açıklanmıştır. Son olarak, daha fazla bilgi ve alternatif yöntemleri için kaynaklar sağlanmaktadır.
Protocol
Discussion
Genetik analiz Chlamydomonas basit, ama özellikle teknikleri gamet ve ayrı tetrad döl oluşturmak için gereklidir. Sağlıklı soylarının teknikleri kolayca elde edilir. Bazı mutant suşları ile bir sanat daha fazla olur ve okuyucular, tarihsel notlar ve pratik ipuçları yakın zamanda yayınlanan Chlamydomonas Kaynak Kitabı, Cilt 1 bakmalıdır. Ayrıca, bu temel tema çok varyasyon Zigot dağıtım ve diseksiyon desen, indükleyici gametogenezis yöntemi arasında değişen, yukarıda açı…
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Bu protokol, Institut de biologie fiziko-Chimique, Paris, Fransa'da Francis-André Wollman laboratuvarda öğrenilen teknikleri dayanmaktadır. Yazarların aslında Chlamydomonas genetik teknikleri DBS tanıttı Jacqueline Girard-Bascou, şükran borçluyuz. Yazarların laboratuar Chlamydomonas araştırma, Ulusal Bilim Vakfı ödülü MCB-0646350 tarafından destekleniyor .
Materials
| Material Name | Typ | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| CC-125 | Mating type plus strain | Chlamydomonas Stock Center | ||
| CC-124 | Mating type minus strain | Chlamydomonas Stock Center | ||
| Tris-Acetate-Phosphate (TAP) | Growth medium | |||
| N10 | Growth medium | |||
| Difco agar | Reagent | |||
| Fisherbrand Stainless-Steel Blades | Tools | Fisher Scientific | 08-916-5B | |
| BD Surgical Blade Handles | Tools | Fisher Scientific | 08-914-5 | |
| Fisherbrand Metal Scalpels | Tools | Fisher Scientific | 08-920A |
Referenzen
- Harris, E. H. The Chlamydomonas Sourcebook: Introduction to Chlamydomonas and Its Laboratory Use. Conf Proc IEEE Eng Med Biol Soc. , 119-273 (2005).
