Maya hücreleri Mitokondri saflaştırılması
Summary
Biz maya mitokondri arıtma için hızlı ve etkili bir yöntem tarif<em> Saccharomyces cerevisiae</em>. Bu yöntem aslında diğer organeller tarafından kontaminasyon ücretsiz ve kendi arıtma sonrası yapısal ve fonksiyonel bütünlüğünü korumak saf mitokondri yüksek verimli izolasyon sağlar.
Abstract
Mitokondri, ATP üretimi ana site ökaryotik olmayan fotosentetik hücrelerde aerobik metabolizma sırasında<sup> 1</sup>. Bu kompleks organellere apoptotik hücre ölümü de önemli rol oynamaktadır<sup> 2</sup> Hücre sağkalım<sup> 3</sup> Memeli gelişme<sup> 4</sup> Nöronal gelişimi ve işlevi<sup> 4</sup>, Hücre içi sinyal<sup> 5</sup> Ve uzun ömürlü düzenleme<sup> 6</sup>. Mitokondri tarafından kontrol edilen bu karmaşık biyolojik süreçlerin anlayışımız, morfoloji, protein ve lipid bileşimi, onların DNA bütünlüğünü ve sayısız hayati fonksiyonlarını değerlendirmek için sağlam yöntemler dayanmaktadır. Maya<em> Saccharomyces cerevisiae</em> Açıklamalı genomu ve iyi tanımlanmış proteom, genetik ve biyokimyasal manipulable tek hücreli ökaryot mitokondri temel biyolojik fonksiyonları altında yatan moleküler ve hücresel mekanizmaları çalışmak için değerli bir model. Bu tür çalışmalar için, son derece saf mitokondri sahip olmak çok önemlidir. Burada mitokondri maya arıtma için hızlı ve etkili bir yöntemin ayrıntılı bir açıklama mevcut. Bu yöntem aslında diğer organeller tarafından kontaminasyon ücretsiz ve kendi arıtma sonrası yapısal ve işlevsel bütünlüğü korumak son derece saf mitokondri izolasyonu sağlar. Bu yöntem ile arındırılmış Mitokondri hücre sulandırıldıktan temel mitokondriyal süreçleri için uygundur ve mitokondriyal yapı ve işlevleri, mitokondriyal proteom ve lipidome ve mitokondriyal DNA analizi için kullanılabilir.
Protocol
Discussion
Bu yöntem, maya hücreleri saf mitokondri yüksek verimli izolasyon sağlar. Bu yöntemi ile saflaştırılmış Mitokondri kontaminasyon diğer organellerin aslında ücretsiz ve kendi arıtma sonrası yapısal ve fonksiyonel bütünlüğünü korumak. Temel mitokondriyal süreçlerin hücre sulandırıldıktan için uygun olan mitokondri açıklanan yöntem verim. Bu son derece saf mitokondri mitokondriyal yapı ve işlevleri, mitokondriyal proteom ve lipidome ve mitokondriyal DNA analizi için de kullanılabilir.
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Bu çalışma CIHR ve Kanada NSERC hibe ile desteklendi. VIT CIHR Yeni Araştırmacı ve Genomik Concordia Üniversitesi Araştırma Başkanı, Hücre Biyolojisi ve Yaşlanma.
References
- Voet, D., Voet, J. G. Biochemistry. , (2004).
- Suen, D. -. F., Norris, K. L., Youle, R. J. Mitochondrial dynamics and apoptosis. Genes Dev. 22, 1577-1590 (2008).
- Cheng, W. C., Berman, S. B., Ivanovska, I., Jonas, E. A., Lee, S. J., Chen, Y., Kaczmarek, L. K., Pineda, F. &. a. m. p. ;. a. m. p., Hardwick, J. M. Mitochondrial factors with dual roles in death and survival. Oncogene. 25, 4697-4705 (2006).
- Detmer, S. A., Chan, D. C. Functions and dysfunctions of mitochondrial dynamics. Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 8, 870-879 (2007).
- McBride, H. M., Neuspiel, M., Wasiak, S. Mitochondria: more than just a powerhouse. Curr. Biol. 16, R551-R560 (2006).
- Balaban, R. S., Nemoto, S., Finkel, T. Mitochondria, oxidants, and aging. Cell. 120, 483-495 (2005).
