Summary

Трансплантация почки Всего мозга у взрослых данио рерио

Published: February 25, 2007
doi:

Summary

Abstract

Гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) являются редкой популяции плюрипотентных клеток, которые поддерживают все дифференцированных линий крови на протяжении всей жизни организма. Функциональное определение HSC является пересаженные ячейки, имеет возможность восстановить всю кровь происхождений облученных получателя долгосрочной перспективе. Это назначение было установлено десятилетий плодотворной работы в млекопитающих. Использование трансплантации гемопоэтических (HCT) и обратного генетических манипуляций в мышь, основные регуляторные факторы ГСК биологии начала будет открыт, но все еще в значительной степени под-изучены. В последнее время данио стала мощная генетическая модель для изучения позвоночных кроветворения. Создание HCT в данио позволит ученым использовать крупномасштабные генетического и химического скрининга методологий в данио выявить новые механизмы, лежащие HSC регулирования. В этой статье мы продемонстрируем метод для выполнения HCT во взрослых рыбок данио. Мы показываем, вскрытие и подготовка данио весь мозг почки, сайт взрослых гемопоэз у данио рерио, и введение этих донорских клеток в кровоток облученного рыбы получателя через внутрисердечной инъекции. Кроме того, мы расскажем после трансплантации уход рыбы в "реанимации", чтобы увеличить их здоровье в долгосрочной перспективе. В общем, нежная забота о рыбе до, во время и после пересадки имеет решающее значение для увеличения количества рыбы, которая переживет не один месяц в соответствии с процедурой, которая необходима для оценки долгосрочной перспективе (<3 месяца) приживления. Экспериментальные данные используются для установления этого протокола будет опубликовано в другом месте. Создание этого протокола позволит слияния крупных генетики данио и трансплантации биологии.

Protocol

Облучение Радиация WT рыбу 25Gy за 2 дня до пересадки Почки рассечение Жертва соответствующего количества флуоресцентного доноров в tricaine (~ 100 мл 4mg/ml Tricaine / литр рыба) (в среднем 500 000 клеток на донора рыба) Изолировать почек в 0,9 x PBS + 5% FCS + 1% Пенн стрептококк (&…
check_url/kr/159?article_type=t

Play Video

Cite This Article
LeBlanc, J., Venezia Bowman, T., Zon, L. Transplantation of Whole Kidney Marrow in Adult Zebrafish. J. Vis. Exp. (2), e159, doi:10.3791/159 (2007).

View Video