Summary

Yetişkin Zebra balığı Tüm Böbrek İliği Nakli

Published: February 25, 2007
doi:

Summary

Abstract

Hematopoetik kök hücrelerin (HSC) bir organizmanın hayatı boyunca tüm farklılaştırılmış kan soy korumak pluripotent hücreler nadir bir nüfus. HSC işlevsel tanımı sulandırmak ışınlanmış bir alıcı, uzun vadeli tüm kan soy yeteneği olan bir nakledilen hücre. Bu atama memeli sistemlerinde seminal çalışma yıllardır tarafından kurulmuştur. Hematopoetik hücre transplantasyonu (HCT) ve fareyi ters genetik manipülasyonları kullanarak, HSC biyolojinin temel düzenleyici faktörleri açıkladı başlıyor, ama hala büyük ölçüde altında incelenmiştir. Son zamanlarda, Zebra balığı omurgalı hematopoez çalışmak için güçlü bir genetik model olarak ortaya çıkmıştır. Zebrafish içinde HCT kurulması bilim adamları HSC yönetmelik altında yatan yeni mekanizmalar ortaya zebrafish mevcut büyük ölçekli genetik ve kimyasal tarama metodolojileri kullanmak için izin verecektir. Bu makalede, biz yetişkin zebrafish HCT gerçekleştirmek için bir yöntem ortaya koymaktadır. Biz zebrafish tüm böbrek iliği diseksiyon ve hazırlık zebrafish yetişkin hematopoez site, bu donör hücreleri ışınlanmış alıcı balık intrakardiyak enjeksiyon yoluyla dolaşıma giriş ve göstermektedir. Ayrıca, uzun vadeli sağlık artırmak için bir "YB" balık nakil sonrası bakım açıklar. Balık genel, nazik bakım öncesinde, esnasında ve sonrasında nakli, uzun vadeli değerlendirme (<3 ay) engraftman için gerekli bir aydan fazla Aşağıdaki prosedür, hayatta balık sayısını artırmak için kritik öneme sahiptir. Bu protokol kurmak için kullanılan deneysel veriler başka bir yerde ilan edilecektir. Bu protokolün kurulması, büyük ölçekli zebrafish genetik ve nakli biyoloji birleşme için izin verecektir.

Protocol

Işınlama Transplantasyon öncesi 25Gy 2 gün ışın tedavisi WT balık Böbrek diseksiyonu Tricaine (~ 100ml 4mg/ml Tricaine balık su / litre) (500.000 hücreler donör balık başına ortalama) uygun sayıda floresan donörlerin Kurban 0.9X PBS +% 5 FCS +% 1 Penn strep (PBS + ") tüp içine böbrek Isolate 18 1 / 2 G iğne ile, daha sonra 10 ml şırınga ile 1 ml pipetlemeyin Break ile Konik 50ml içine aktarın ve PBS ile do…
check_url/kr/159?article_type=t

Play Video

Cite This Article
LeBlanc, J., Venezia Bowman, T., Zon, L. Transplantation of Whole Kidney Marrow in Adult Zebrafish. J. Vis. Exp. (2), e159, doi:10.3791/159 (2007).

View Video