E16ラット胚の子宮内での脳室内注入とエレクトロポレーションで

Abstract

– 子宮内で胎児ラットの新皮質の生体内注射とエレクトロポレーションは、側脳室の壁の内側を覆う個々の前駆細胞を操作するための強力なツールが用意されています。この手法は、今や広く過剰発現や遺伝子をノックダウンし、細胞増殖、遊走、分化への影響を観察することによってcorticogenesisに関与するプロセスを研究するために使用されます。伝統的なノックアウト戦略と比較して、子宮内エレクトロポレーションは、特定の時間ウィンドウの間に細胞の集団を操作する迅速な手段を提供します。このビデオプロトコルでは、我々は、手術のためにラットを準備laporatomyを通して子宮角を露出、胚の側脳室内にDNAを注入し、横方向の壁を裏打ちする前駆細胞にDNAをelectroporating、および動物の世話のために実験方法の概要を説明後手術。当研究室ではこのビデオで示すようにしかしそれは最も一般的にE16で行われ、E15 – E21ラットの手術のためにこのプロトコルを使用します。