该视频协议说明在约翰森实验室中使用的壁球技术准备<em>果蝇</em>聚乙烯抗体标记染色体。
果蝇一直喜爱的模型系统研究由于聚乙烯染色体三龄幼虫的巨大唾液腺提供细胞学优势的染色质结构和基因调控之间的关系。在这个组织中的染色体在细胞分工上升到约1000份的情况下进行多轮的复制。的DNA仍然大大扩大提供一个独特的机会,到相关的特定蛋白质的本地化染色质形态的染色体复制后每个周期相一致。因此,出现了一个高水平的界定目前在不同的基因的表观遗传修饰和转录过程的不同阶段的兴趣。为此类研究的重要工具,是与抗体的酶标记的聚乙烯染色体,转录因子,或感兴趣的组蛋白修饰。这个视频协议说明,在约翰森实验室用于制备抗体标记果蝇多线染色体的壁球技术。
包含在传统壁球固定协议的醋酸和乳酸,有利于带间的决议和染色体臂蔓延,但不幸的是,一些抗原决定簇不生存之本治疗。这样一个抗原表位的一个例子是H3S10ph( 蔡等 ,2008) 。由于酸的治疗也有它的缺点是淬火GFP标记的蛋白质,DiMario等固有荧光。 (2006年)最近开发的基于甲醛的“无酸壁球技术”,允许无酸敏感的抗原决定簇的抗体检测GFP抗体标记以及GFP融合蛋白聚乙烯染色?…
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