غير الطرفية تقنيات أخذ العينات الدم في غينيا الخنازير
Summary
على الرغم من نموذج معروف، خنزير غينيا يمثل حاليا مكانة في العلوم التجريبية والحيوان هو البيانات المحدود المتاح على تنفيذ معظم الإجراءات. هنا نقدم أربعة أساليب مختلفة لغير محطة في تقنيات أخذ العينات الدموية في الجسم الحي واعية إما مخدرة أو خنازير غينيا.
Abstract
خنازير غينيا تمتلك العديد من أوجه التشابه البيولوجية للإنسان ويتم التحقق من صحة النماذج الحيوانية التجريبية 1-3. ومع ذلك، فإن استخدام خنازير غينيا يمثل حاليا منطقة ضيقة نسبيا من البيانات البحثية وصفية حول منهجية محددة نادرة في المقابل. الميزات التشريحية للخنازير غينيا مختلفة قليلا عن نماذج القوارض الأخرى، وبالتالي تعديل تقنيات أخذ العينات لاستيعاب الاختلافات أنواع محددة، على سبيل المثال، مقارنة مع الفئران والجرذان، ضرورية للحصول على عينات كافية وعالية الجودة. على حد سواء طويلة وقصيرة الأجل في الدراسات المجراة في كثير من الأحيان تتطلب أخذ عينات الدم تتكرر اختيار تقنية ينبغي النظر جيدا من أجل الحد من التوتر وعدم الراحة في الحيوانات ولكن أيضا لضمان بقاء فضلا عن الامتثال مع متطلبات حجم العينة وسهولة الوصول إليها. ويمكن الحصول على عينات من الدم الوريدي في عدد من المواقع في خنازير غينيا على سبيل المثال.، والصافن والوريدالأوردة، كل تقنية تحتوي على كل مزايا وعيوب 4،5. هنا، نقدم أربع تقنيات مختلفة لأخذ عينات الدم إما واعية أو مخدرة خنازير غينيا. الإجراءات يتم توفير جميع الإجراءات غير الطرفية التي أحجام العينة وعدد العينات لا تتجاوز المبادئ التوجيهية لجمع الدم في الحيوانات المختبرية 6. تم اختبارها بدقة كل الأساليب المذكورة وتطبيقها لاخذ عينات من الدم المتكررة في الجسم الحي في الدراسات داخل منشأة أبحاثنا.
Introduction
خنزير غينيا هو نموذج حيوانات التجارب قيما والتحقق من صحتها بسبب وجود عدد من أوجه التشابه البيولوجية للإنسان مثل شرط وجود امدادات الغذائية من فيتامين C، البروتين الدهني البلازما مقارنة تأييض البروتين الدهني الانزيمات وملامح، وكذلك أوجه الشبه المشتركة مع المشيمة البشرية و وضع ما قبل الولادة 1-3،7،8. هذا يجعل خنزير غينيا نموذج جذاب ومناسب لدراسة آثار الأمراض المرتبطة الحمية مثل مرض غير الكحولية الكبد الدهني وأمراض القلب والأوعية الدموية والآثار المفترضة من نقص فيتامين C ولكن أيضا تأثير على سبيل المثال، التدخل الغذائي الأمهات في البلدان النامية ذرية.
وغالبا ما يتطلب أخذ عينات الدم المتكررة في كل من المدى القصير والطويل في الدراسات المجراة. بسبب الاختلافات التشريحية أنواع محددة من تعديل أسلوب أخذ العينات ضروري من أجل الحصول على عينات من الدم في خنازير غينيا بالمقارنة مع نماذج القوارض الأخرى <sup> 4،5. ويشمل هذا الاختلاف في مجرى الأوردة والشرايين، وأيضا أن الخنازير الغينية ليس لها ذيل، وبالتالي لديها متطلبات وخيارات مختلفة لكلا أخذ العينات والتعامل معها. أخذ العينات من الوريد الصافن أو الرصغي، يدفع الحد الأدنى من الراحة والإجهاد في الحيوان و لا يتطلب التخدير 3،9. هذه التقنية تسمح تكرار عينات من كميات صغيرة من الدم (100-400 ميكرولتر)، على سبيل المثال، لتحديد العلامات الكيميائية الحيوية في البلازما. إذا كان حجم أصغر عينة كافية (50-100 ميكرولتر)، وهذا يمكن بسهولة الحصول عليها عن طريق الوريد ثقب الأذن. ويمكن أيضا أن تتم هذه التقنية في الحيوانات واعية ومفيد على سبيل المثال عند قياس مستوى السكر في الدم 10،11. أخذ العينات من حبل الوريد تسمح لجمع كميات أكبر من الدم (1-2 مل) ولكنها تتطلب التخدير.
هنا، نقدم أربع تقنيات مختلفة لأخذ عينات الدم إما واعية أو مخدرة خنازير غينيا. بروكedures يتم توفير جميع الإجراءات غير الطرفية التي أحجام العينة وعدد العينات لا تتجاوز المبادئ التوجيهية لجمع الدم في الحيوانات المختبرية 6. هو في مصلحة العلم الجيد وكذلك الرفق بالحيوان أن الإجهاد يجب أن تبقى إلى أدنى حد ممكن. بالتالي، فقط المدربين تدريبا جيدا والشخصية المختصة أن تؤدي الإجراءات الحيوانية.
Protocol
Representative Results
Discussion
بالمقارنة مع الفئران والجرذان والخنازير الغينية هي مخيفة بطبيعتها ويجب أن اقتربت بهدوء والتعامل معها بشكل صحيح من أجل الحد من التوتر. من نقطة الرفق بالحيوان نظر، يتصرف بحذر هو بطبيعة الحال على سبيل الأولوية؛ ومع ذلك، وهذا أيضا يقلل من خطر الآثار المصاحبة للقلق على ا…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
نعترف المساعدة الماهرة من آني B. كريستنسن، إليزابيث V. أندرسن، بليندا B. Bringtoft ومقدمي الرعاية الحيوانية في وزارة الطب التجريبي، كوبنهاجن الحرم الجامعي، كلية الصحة والعلوم الطبية، جامعة كوبنهاغن، الدنمارك. يعقوب Lønholdt وشكره على مساعدته التقنية الممتازة في تصوير إجراءات. وأيد هذه الدراسة في جزء من مركز LIFEPHARM لفي الجسم الحي الصيدلة وجامعة كوبنهاغن.
Materials
| Name of Material/ Equipment | Company | Catalog Number | Comments/Description |
| Electric shaver | Wella (Contura), Denmark | 273207 | Alternative product may be used. Multiple suppliers |
| Syringes | B.Braun-Omnifix-F, Germany | 9161406V | Alternative product may be used. Multiple suppliers |
| Needles | BD Microlance,Spain | 301156 | Alternative product may be used. Multiple suppliers |
| Microvette collection tube | Sarstedt, D-51588Nümbrecht, Germany | 201,288,100 | Alternative product may be used. Multiple suppliers |
| Accu-Check analyzer | Roche A/S Diagnostics, Denmark | Alternative product may be used. Multiple suppliers | |
| Heparin 5000 IE/ml | LEO Pharma, Denmark | Alternative product may be used. Multiple suppliers | |
| Anesthesia | Zoletil 50, Chemvet, Denmark | Alternative product may be used. Multiple suppliers | |
| Anesthesia | Narcoxyl vet 20 mg/ml, Intervet, Denmark | Alternative product may be used. Multiple suppliers | |
| Anesthesia | Torbugesic vet 10 mg/ml, Scanvet, Denmark | Alternative product may be used. Multiple suppliers | |
| Neutral eye ointment | Alternative product may be used. Multiple suppliers | ||
| Gauze or a cotton swab | Alternative product may be used. Multiple suppliers | ||
| Disinfectant (70% alcohol) | Alternative product may be used. Multiple suppliers |
References
- DeOgburn, R., et al. Effects of increased dietary cholesterol with carbohydrate restriction on hepatic lipid metabolism in Guinea pigs. Comp.Med. 62 (2), 109-115 (2012).
- Fernandez, M., Volek, J. S. Guinea pigs a suitable animal model to study lipoprotein metabolism, atherosclerosis and inflammation. Nutr Metab (Lond). 3 (17), (2006).
- Frikke-Schmidt, H., Tveden-Nyborg, P., Birck, M. M., Lykkesfeldt, J. High dietary fat and cholesterol exacerbates chronic vitamin C deficiency in guinea pigs. Br J Nutr. 105 (1), 54-61 (2011).
- Hem, A., Smith, A. J., Solberg, P. Saphenous vein puncture for blood sampling of the mouse, rat, hamster, gerbil, guinea pig, ferret and mink. Lab Anim. 32 (4), 364-368 (1998).
- Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. Blood sample collection in small laboratory animals. J Pharmacol Pharmacother. 1 (2), 87-93 (2010).
- Guillen, J. FELASA guidelines and recommendations. J Am Assoc Lab Anim Sci. 51 (3), 311-321 (2012).
- Ye, P., Cheah, I. K., Halliwell, B. High fat diets and pathology in the guinea pig Atherosclerosis or liver damage. Biochim Biophys Acta. 1832 (2), 355-364 (2013).
- Tveden-Nyborg, P., et al. Maternal vitamin C deficiency during pregnancy persistently impairs hippocampal neurogenesis in offspring of guinea pigs. PLoS One. 7 (10), 12-18391 (2012).
- Schjoldager, J. G., Tveden-Nyborg, P., Lykkesfeldt, J. Prolonged maternal vitamin C deficiency overrides preferential fetal ascorbate transport but does not influence perinatal survival in guinea pigs. Br J Nutr. 110 (9), 1573-1579 (2013).
- Greulich, S., et al. Secretory products of guinea pig epicardial fat induce insulin resistance and impair primary adult rat cardiomyocyte function. J Cell Mol Med. 15 (11), 2399-2410 (2011).
- Swifka, J., Weiss, J., Addicks, K., Eckel, J., Rosen, P. Epicardial fat from guinea pig a model to study the paracrine network of interactions between epicardial fat and myocardium. Cardiovasc Drugs Ther. 22 (2), 107-114 (2008).
- Pilny, A. A. Clinical hematology of rodent species. Vet.Clin North Am Exot Anim Pract. 11 (3), 523-vii (2008).
- Franco, N. H., Olsson, I. A. Scientists and the 3Rs: attitudes to animal use in biomedical research and the effect of mandatory training in laboratory animal science. Lab Anim. 48 (1), 50-60 (2014).
- Van, L. J., et al. eAssessing the application of the 3Rs a survey among animal welfare officers in The Netherlands. Lab Anim. 47 (3), 210-219 (2013).
- Sloan, R. C., et al. High doses of ketamine-xylazine anesthesia reduce cardiac ischemia-reperfusion injury in guinea pigs. J Am Assoc Lab Anim Sci. 50 (3), 349-354 (2011).
- Jacobson, C. A. A novel anaesthetic regimen for surgical procedures in guinea pigs. Lab Anim. 35 (3), 271-276 (2001).
- Saha, J. K., Xia, J., Grondin, J. M., Engle, S. K., Jakubowski, J. A. Acute hyperglycemia induced by ketamine xylazine anesthesia in rats mechanisms and implications for preclinical models. Exp Biol Med(Maywood). 230 (10), 777-784 (2005).
