Summary

モルモットにおける非ターミナル採血テクニック

Published: October 11, 2014
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Summary

既知のモデルが、モルモットは、現在、実験動物科学のニッチを表し、限られたデータは、ほとんどのプロシージャの実行でのみ使用できます。ここでは、意識的または麻酔したモルモットのどちらかの生体内の血液サンプリング技術における非末端4つの異なるアプローチを提示します。

Abstract

モルモットは、ヒトへのいくつかの生物学的類似性を有し、実験動物モデル1-3検証されます。具体的な方法論は相応に乏しい上しかし、モルモットの使用は、現在の研究と記述データの比較的狭い領域を表す。モルモットの解剖学的特徴は、マウスとラットと比較して、従ってサンプリング技術の変調は、例えば 、種特異的な違いに適応するように、他のげっ歯類モデルとは若干異なって十分な高品質のサンプルを得るために必要である。 インビボ研究における長期および短期の両方は、多くの場合、技術の選択をサンプリング繰り返し血液を必要とするだけでなく、動物にストレスや不快感を軽減するだけでなく、生存ならびにサンプルサイズとアクセシビリティの要件への準拠を保証するために考慮されるべきである。静脈血サンプルを、モルモットの部位、例えば数で得ることができる、伏在静脈および頸静静脈、長所と短所の両方を含む各手法4,5。ここでは、意識的または麻酔したモルモットのどちらかのための4つの異なる血液サンプリング技術を提示する。手順は、サンプル量、サンプルの数が、実験動物6の採血のためのガイドラインを超えないことを提供されるすべての非末端手順である。すべての記載されている方法は、徹底的にテストされ、私たちの研究施設内で ​​の研究で、生体内血液サンプリング繰り返しのために適用されている。

Introduction

モルモットは、人間の胎盤を持つ貴重なビタミンCの栄養供給のための要件として人間に起因する生物学的類似点の数に実験動物モデルを検証し、酵素およびリポタンパク質プロファイルの代謝匹敵する血漿リポタンパクだけでなく、共有の類似点で、出生前の開発1-3,7,8。現像このモルモットなどの非アルコール性脂肪肝疾患、心血管疾患およびビタミンCの欠乏はなく、 例えば、の効果の推定上の効果として、食事関連疾患の影響を研究するための魅力的で適切なモデルとなる。母体食事介入子孫。

繰り返し採血は、多くの場合、 インビボ研究両方において長期および短期のに必要とされる。による種特異的な解剖学的な違いにサンプリング技術の変調は他の齧歯動物モデルと比べてモルモットの血液サンプルを得るために必要である<sup> 4,5。これは静脈と動脈の過程の変化を含んでおり、また、そのモルモットは尾を持っていない、したがって、サンプリングおよび取り扱いの両方のためのさまざまな要件とオプションを持っている。伏在または足根静脈からのサンプリング、動物に最小限の不快感やストレスを誘導し、3,9麻酔を必要としません。この技術は、血液(100〜400μl)を、 例えば、少量のサンプルを繰り返し可能にする、血漿中の生化学的マーカーを決定する。より小さなサンプルサイズが(50〜100μl)のに十分である場合、これは非常に簡単に耳静脈を穿刺することによって得ることができる。この技術は、意識のある動物で行い、血糖10,11を測定する場合などに便利であることができる。頸静脈から採取は、血液の大量の(1-2)溶液の回収を可能にするが、麻酔を必要とします。

ここでは、意識的または麻酔したモルモットのどちらかのための4つの異なる血液サンプリング技術を提示する。 PROCeduresは、サンプル量、サンプルの数は、実験動物6の採血のためのガイドラインを超えないことを提供されるすべての非末端手順である。それは、ストレスを最小限に維持されるべきであることが動物福祉のと同様に優れた科学の利益になる。その結果、唯一の十分な訓練を受けた有能個人、動物の手順を実行する必要があります。

Protocol

示す手順は食料·農業·水産省の下にデンマークの動物実験検査官によって承認されたプロトコルに従って行った。 横伏在または足根静脈から1血液サンプリング麻酔と1研究者、モルモットを扱う一つであり、サンプルを採取1の助けを借りずにこの手順を実行してください。 静脈が表示されるまで電気シェーバーで後肢の足根域を剃る。エリアは、穿刺部?…

Representative Results

意識的または麻酔したモルモットのいずれかで非末端の生体内の血液サンプリング技術の4つの異なるアプローチが提示されている。 図1は、モルモットと可能な穿刺部位の横伏在と足根静脈のコースを示しています。モルモットの耳の背側表面上の目に見える耳の静脈は、非常に小さい体積が必要とされる場合、これらの静脈は、血液採取のために使用することができる<s…

Discussion

マウスとラットと比較して、モルモットは本質的に恐れていると冷静に近づき、ストレスを軽減するために、正しく処理されなければならない。ビューの動物福祉の観点から、注意して作用する、自然優先事項である。しかし、これはまた、収集されたデータに不安に関連した副作用のリスクを減少させる、コルチコステロイドおよびグルコース12の血中濃度を増加させた。…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

私たちは、アニーB.クリステンセン、エリザベスV.アンデルセン、ベリンダB. Bringtoftと実験医学、フレデリックスキャンパス、保健医療学部、コペンハーゲン、デンマークの大学の学部での動物の世話人の巧みな支援を認める。ヤコブLønholdtは手続きを撮影中の彼の優れた技術支援のために感謝している。この研究は、in vivoでの薬理とコペンハーゲン大学のためLIFEPHARMセンターによって部分的にサポートされていました。

Materials

Name of Material/ Equipment Company Catalog Number Comments/Description
Electric shaver Wella (Contura), Denmark 273207 Alternative product may be used. Multiple suppliers
Syringes  B.Braun-Omnifix-F, Germany 9161406V Alternative product may be used. Multiple suppliers
Needles BD Microlance,Spain 301156 Alternative product may be used. Multiple suppliers
Microvette collection tube  Sarstedt, D-51588Nümbrecht, Germany 201,288,100 Alternative product may be used. Multiple suppliers
Accu-Check analyzer Roche A/S Diagnostics, Denmark Alternative product may be used. Multiple suppliers
Heparin 5000 IE/ml LEO Pharma, Denmark Alternative product may be used. Multiple suppliers
Anesthesia Zoletil 50, Chemvet, Denmark Alternative product may be used. Multiple suppliers
Anesthesia Narcoxyl vet 20 mg/ml, Intervet, Denmark Alternative product may be used. Multiple suppliers
Anesthesia Torbugesic vet 10 mg/ml, Scanvet, Denmark Alternative product may be used. Multiple suppliers
Neutral eye ointment Alternative product may be used. Multiple suppliers
Gauze or a cotton swab  Alternative product may be used. Multiple suppliers
Disinfectant (70% alcohol) Alternative product may be used. Multiple suppliers

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Cite This Article
Birck, M. M., Tveden-Nyborg, P., Lindblad, M. M., Lykkesfeldt, J. Non-Terminal Blood Sampling Techniques in Guinea Pigs. J. Vis. Exp. (92), e51982, doi:10.3791/51982 (2014).

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