Non-Terminal techniques d'échantillonnage de sang chez les cobayes
Summary
Même si un modèle connu, le cochon de Guinée représente actuellement un créneau en sciences des animaux de laboratoire et des données limitées sont disponibles sur l'exécution de la plupart des procédures. Ici, nous présentons quatre approches différentes pour non-terminal dans les techniques de prélèvement sanguin in vivo chez soit des cobayes conscients ou anesthésiés.
Abstract
Les cochons d'Inde possèdent plusieurs similitudes biologiques pour les humains et sont validés modèles animaux expérimentaux 1-3. Cependant, l'utilisation de cobayes représente actuellement une zone relativement étroite des données de recherche et descriptives sur la méthodologie spécifique est proportionnellement rares. Les caractéristiques anatomiques de cobayes sont un peu différent des autres modèles de rongeurs, d'où la modulation des techniques d'échantillonnage pour tenir compte des différences spécifiques de l'espèce, par exemple., Par rapport à des souris et des rats, sont nécessaires pour obtenir des échantillons de qualité suffisantes et élevés. Comme la fois court et long terme dans les études in vivo souvent besoin de sang répété échantillonner le choix de la technique doit être bien pris en compte afin de réduire le stress et l'inconfort chez les animaux, mais aussi pour assurer la survie ainsi que la conformité avec les exigences de taille de l'échantillon et de l'accessibilité. Des prélèvements sanguins peuvent être obtenus à un certain nombre de sites de cobayes par exemple., La saphène et jugulaireveines, chaque technique contenant à la fois des avantages et des inconvénients de 4,5. Ici, nous présentons quatre techniques différentes de prélèvement sanguin soit pour des cobayes conscients ou anesthésiés. Les procédures sont toutes les procédures non-terminaux à condition que les volumes d'échantillon et le nombre d'échantillons ne pas dépasser les lignes directrices pour la collecte de sang chez les animaux de laboratoire 6. Toutes les méthodes décrites ont été soigneusement testés et demandé répétée dans le prélèvement de sang dans les études in vivo au sein de notre centre de recherche.
Introduction
Le cochon de Guinée est un modèle animal expérimental précieux et validé en raison d'un certain nombre de similitudes biologiques pour les humains tels que l'exigence d'un apport alimentaire en vitamine C, lipoprotéines plasmatiques comparables enzymes métabolisant et profils de lipoprotéines, ainsi que les similitudes partagées avec placentation humaine et développement prénatal 1-3,7,8. Cela rend le cochon de Guinée un modèle attrayant et adapté aux effets de maladies liés à l'alimentation tels que la non-stéatose hépatique, les maladies cardiovasculaires et les effets supposés de la carence en vitamine C, mais aussi l'effet par exemple de l'étude., Intervention alimentaire de la mère sur le développement progéniture.
Prélèvement de sang répétée est souvent nécessaire à la fois court et long terme dans les études in vivo. En raison des différences anatomiques spécifiques à l'espèce modulation de la technique d'échantillonnage est nécessaire afin d'obtenir des échantillons de sang chez les cobayes par rapport à d'autres modèles de rongeurs <sup> 4,5. Cela inclut la variation au cours des veines et des artères, et aussi que les cochons d'Inde n'ont pas de queue, ont donc des besoins différents et des options à la fois pour l'échantillonnage et la manipulation. L'échantillonnage de la saphène ou veine du tarse, induit un minimum d'inconfort et de stress chez l'animal et ne nécessite pas d'anesthésie 3,9. Cette technique permet d'échantillons de petites quantités de sang (100 à 400 ul), par exemple, répété., Pour déterminer les marqueurs biochimiques dans le plasma. Si un échantillon de taille encore plus petite est suffisante (50-100 pi), ce qui peut très facilement être obtenu par ponction de la veine de l'oreille. Cette technique peut également être réalisée chez des animaux conscients et est utile par exemple lorsque l'on mesure la glycémie 10,11. L'échantillonnage de la veine jugulaire permet la collecte de plus grandes quantités de sang (1-2 ml) mais nécessite une anesthésie.
Ici, nous présentons quatre techniques différentes de prélèvement sanguin soit pour des cobayes conscients ou anesthésiés. Le procedures sont toutes les procédures non-terminaux à condition que les volumes d'échantillon et le nombre d'échantillons ne pas dépasser les lignes directrices pour la collecte de sang chez les animaux de laboratoire 6. Il est dans l'intérêt de la bonne science, ainsi que de bien-être animal que l'accent devrait être maintenu à un minimum. Par conséquent, seul bien formé et personnel compétent doit effectuer les procédures sur les animaux.
Protocol
Representative Results
Discussion
Par rapport à des souris et des rats, cochons d'Inde sont craintifs par nature et doivent être abordés calmement et correctement traitées afin de réduire le stress. D'un point de vue de la protection des animaux, agissant avec soin est naturellement une priorité; Toutefois, ce sera aussi réduire le risque d'effets de l'anxiété associée sur les données recueillies par ex., l'augmentation des taux de corticostéroïdes dans le sang et glucose 12. De même, la gestion quot…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Nous reconnaissons l'aide habile de Annie B. Kristensen, Elisabeth V. Andersen, Belinda B. Bringtoft et les gardiens d'animaux au Département de médecine expérimentale, Frederiksberg Campus, Faculté de la santé et des sciences médicales de l'Université de Copenhague, Danemark. Jacob Lønholdt est remercié pour son excellente assistance technique pour filmer les procédures. Cette étude a été financée en partie par le Centre LIFEPHARM pour pharmacologie in vivo et de l'Université de Copenhague.
Materials
| Name of Material/ Equipment | Company | Catalog Number | Comments/Description |
| Electric shaver | Wella (Contura), Denmark | 273207 | Alternative product may be used. Multiple suppliers |
| Syringes | B.Braun-Omnifix-F, Germany | 9161406V | Alternative product may be used. Multiple suppliers |
| Needles | BD Microlance,Spain | 301156 | Alternative product may be used. Multiple suppliers |
| Microvette collection tube | Sarstedt, D-51588Nümbrecht, Germany | 201,288,100 | Alternative product may be used. Multiple suppliers |
| Accu-Check analyzer | Roche A/S Diagnostics, Denmark | Alternative product may be used. Multiple suppliers | |
| Heparin 5000 IE/ml | LEO Pharma, Denmark | Alternative product may be used. Multiple suppliers | |
| Anesthesia | Zoletil 50, Chemvet, Denmark | Alternative product may be used. Multiple suppliers | |
| Anesthesia | Narcoxyl vet 20 mg/ml, Intervet, Denmark | Alternative product may be used. Multiple suppliers | |
| Anesthesia | Torbugesic vet 10 mg/ml, Scanvet, Denmark | Alternative product may be used. Multiple suppliers | |
| Neutral eye ointment | Alternative product may be used. Multiple suppliers | ||
| Gauze or a cotton swab | Alternative product may be used. Multiple suppliers | ||
| Disinfectant (70% alcohol) | Alternative product may be used. Multiple suppliers |
References
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