Técnicas de muestreo de sangre no terminal en los conejillos de Indias
Summary
Aunque un modelo conocido, el conejillo de indias en la actualidad representa un nicho en las ciencias experimentales en animales y datos limitados está disponible en la ejecución de la mayoría de los procedimientos. Aquí presentamos cuatro enfoques diferentes para no terminal en las técnicas de muestreo de sangre in vivo, ya sea en cobayas conscientes o anestesiados.
Abstract
Los conejillos de indias poseen varias similitudes biológicas a los seres humanos y se validan los modelos animales experimentales 1-3. Sin embargo, el uso de conejillos de indias actualmente representa un área relativamente estrecha de datos de investigación y descriptivos sobre la metodología específica es correspondientemente escasa. Las características anatómicas de los conejillos de Indias son un poco diferente de otros modelos de roedores, por lo tanto, la modulación de las técnicas de muestreo para dar cabida a las diferencias específicas de cada especie, por ejemplo., En comparación con los ratones y las ratas, son necesarias para obtener muestras suficientes y de alta calidad. Como tanto a largo como a corto plazo en los estudios in vivo a menudo requieren repetir el muestreo de sangre la elección de la técnica debe ser bien considerado con el fin de reducir el estrés y el malestar en los animales, sino también para asegurar la supervivencia, así como el cumplimiento de los requisitos de tamaño de la muestra y la accesibilidad. Muestras de sangre venosa se pueden obtener en un número de sitios en los conejillos de indias por ejemplo., La safena y yugularvenas, cada técnica que contiene tanto ventajas como desventajas 4,5. A continuación, presentamos cuatro técnicas de muestreo de sangre diferentes, ya sea para cobayas conscientes o anestesiados. Los procedimientos son los procedimientos no terminales siempre que los volúmenes de muestra y número de muestras no exceden las directrices para la recogida de sangre en animales de laboratorio 6. Todos los métodos descritos han sido probados y solicitado repetido en el muestreo de sangre in vivo en los estudios dentro de nuestro centro de investigación a fondo.
Introduction
La cobaya es un modelo animal experimental valiosa y validado debido a un número de similitudes biológicas a los seres humanos, tales como un requisito para un suministro dietético de la vitamina C, la lipoproteína de plasma comparables enzimas metabolizadoras y perfiles de lipoproteínas, así como similitudes compartidas con placentación humana y 1-3,7,8 desarrollo prenatal. Esto hace que el conejillo de indias un modelo atractivo y conveniente para efectos de las enfermedades asociadas a la dieta tales como la enfermedad no alcohólica del hígado graso, las enfermedades cardiovasculares y los efectos putativos de la deficiencia de vitamina C, sino también el efecto de, por ejemplo estudiando., Intervención dietética materna en el desarrollo descendencia.
Muestreo de sangre repetida a menudo se requiere tanto a largo como a corto plazo en los estudios in vivo. Debido a las diferencias anatómicas específicas de las especies es necesaria la modulación de la técnica de muestreo para obtener muestras de sangre en los conejillos de indias en comparación con otros modelos de roedores <sup> 4,5. Esto incluye la variación en el curso de las venas y arterias, y también que los conejillos de indias no tienen una cola, por lo tanto tiene diferentes requisitos y opciones tanto para el muestreo y la manipulación. El muestreo de la safena o vena tarsal, induce mínimas molestias y el estrés en el animal y no requiere anestesia 3,9. Esta técnica permite que las muestras de pequeñas cantidades de sangre (100-400 l), por ejemplo repitió., Para determinar los marcadores bioquímicos en el plasma. Si un tamaño de muestra incluso más pequeño es suficiente (50-100 l), esto con bastante facilidad puede obtenerse por punción de la vena de la oreja. Esta técnica también se puede llevar a cabo en animales conscientes y es útil por ejemplo cuando se mide la glucosa en sangre 10,11. El muestreo de la vena yugular permite colección de grandes cantidades de sangre (1-2 ml), pero requiere anestesia.
A continuación, presentamos cuatro técnicas de muestreo de sangre diferentes, ya sea para cobayas conscientes o anestesiados. El procedures son todos los procedimientos no terminales siempre que los volúmenes de muestra y número de muestras no exceden las directrices para la recogida de sangre en animales de laboratorio 6. Es en interés de la buena ciencia, así como de bienestar de los animales que el estrés se debe mantener a un mínimo. En consecuencia, sólo bien entrenado y personal competente debe realizar los procedimientos con animales.
Protocol
Representative Results
Discussion
En comparación con los ratones y las ratas, conejillos de Indias son temerosos por naturaleza y deben ser abordados con calma y manejados correctamente para reducir el estrés. Desde el punto de vista del bienestar animal, actuando con cuidado es naturalmente una prioridad; Sin embargo, esto también reducirá el riesgo de efectos de ansiedad asociada a los datos recogidos por ej., aumento de los niveles sanguíneos de corticosteroides y glucosa 12. Del mismo modo, la manipulación diaria habituar a…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Reconocemos la asistencia en un crack de Annie B. Kristensen, Elisabeth V. Andersen, Belinda B. Bringtoft y los cuidadores de animales en el Departamento de Medicina Experimental, Frederiksberg Campus de la Facultad de Salud y Ciencias Médicas de la Universidad de Copenhague, Dinamarca. Jacob Lønholdt se dio las gracias por su excelente asistencia técnica en la filmación de los procedimientos. Este estudio fue apoyado en parte por el Centro LifePharm en vivo y Farmacología de la Universidad de Copenhague.
Materials
| Name of Material/ Equipment | Company | Catalog Number | Comments/Description |
| Electric shaver | Wella (Contura), Denmark | 273207 | Alternative product may be used. Multiple suppliers |
| Syringes | B.Braun-Omnifix-F, Germany | 9161406V | Alternative product may be used. Multiple suppliers |
| Needles | BD Microlance,Spain | 301156 | Alternative product may be used. Multiple suppliers |
| Microvette collection tube | Sarstedt, D-51588Nümbrecht, Germany | 201,288,100 | Alternative product may be used. Multiple suppliers |
| Accu-Check analyzer | Roche A/S Diagnostics, Denmark | Alternative product may be used. Multiple suppliers | |
| Heparin 5000 IE/ml | LEO Pharma, Denmark | Alternative product may be used. Multiple suppliers | |
| Anesthesia | Zoletil 50, Chemvet, Denmark | Alternative product may be used. Multiple suppliers | |
| Anesthesia | Narcoxyl vet 20 mg/ml, Intervet, Denmark | Alternative product may be used. Multiple suppliers | |
| Anesthesia | Torbugesic vet 10 mg/ml, Scanvet, Denmark | Alternative product may be used. Multiple suppliers | |
| Neutral eye ointment | Alternative product may be used. Multiple suppliers | ||
| Gauze or a cotton swab | Alternative product may be used. Multiple suppliers | ||
| Disinfectant (70% alcohol) | Alternative product may be used. Multiple suppliers |
References
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