التحديد الكمي لخروج الكريات البيض عن طريق الأوعية اللمفاوية من الجلد مورين والأورام
Summary
هنا، علينا أن نظهر الأساليب في فيفو التقييم الكمي لخروج الكريات البيض من السذاجة، ملتهبة، والجلد مورين الخبيثة. نقوم بمقارنة وجها لوجه بين نموذجين: فوتوكونفيرسيون التطبيق و في الموقع فيتك عبر الجلد. وعلاوة على ذلك، علينا أن نظهر الأداة المساعدة فوتوكونفيرسيون لتعقب خروج الكريات البيض من الأورام الجلدية.
Abstract
خروج الكريات البيض من الأنسجة المحيطة بالغدد الليمفاوية تجفيف ليس فقط الحرجة لمراقبة محصنة وبدء بل تسهم أيضا في القرار ردود الأنسجة المحيطية. بينما يتم استخدام مجموعة متنوعة من أساليب لقياس خروج الكريات البيض من الأنسجة غير اللمفاوية، والأجهزة الطرفية، والآليات الخلوية والجزيئية التي تنظم خروج تعتمد على السياق تظل غير مفهومة. هنا، نحن تصف الاستخدام في الموقع فوتوكونفيرسيون للتحليل الكمي لخروج الكريات البيض من الجلد مورين والأورام. فوتوكونفيرسيون يسمح بمباشرة العلامات من الكريات البيضاء المقيمين داخل الأنسجة الجلدية. على الرغم من تعرض الجلد للضوء فوق البنفسجي يستحث المحلية التحريضية الردود تتسم تتسرب الكريات البيض ويجتازها الأوعية الدموية، في مقارنة وجها لوجه مع التطبيق عبر الجلد لتتبع الفلورسنت، فوتوكونفيرسيون على وجه التحديد تسمية الخلية الجذعية هجرة السكان، وفي نفس الوقت تمكين التحديد الكمي لخروج النقوي واللمفاوية من ميكرونفيرونمينتس الجلدية والأورام. آليات خروج الكريات البيض تظل عنصرا مفقوداً في فهمنا لتعقيد الكريات البيض إينتراتومورال، وهكذا تطبيق الأدوات المبينة في هذا التقرير سوف توفر فريدة من التبصر في ديناميات الورم ميكرونفيرونمينتس محصنة على حد سواء في استقرار الدولة واستجابة للعلاج.
Introduction
الاستجابات المناعية الأنسجة المحيطية تتشكل ليس فقط بتجنيد الكريات البيض إلى المواقع الالتهاب ولكن أيضا بالآليات التي تنظم الاحتفاظ بها بعد ذلك. وهكذا، تمليه الحصانة الواقية التراكمي الآليات الخلوية والجزيئية التي تحدد عما إذا كان يدخل الكريات البيض، يبقى داخل، أو بالأحرى يهاجر خارج الأنسجة الطرفية عبر الأوعية اللمفاوية. الأهم من ذلك، أن الميل للكريات البيضاء للخروج من الأنسجة عن طريق الأوعية اللمفاوية (يطلق عليها الخروج) مرتبط بوظائفها المتخصصة. الخلايا الجذعية (DC) اكتساب سلوك الهجرة استجابة لإشارات النضج مما يؤدي إلى نقل مستضد والعرض التقديمي في تجفيف الغدد الليمفاوية (دلن)، هي عملية ضرورية لمناعة التكيفية1. مسح الخلايا النقوي، مثل الضامة والعدلات، تعمل على إزالة الأنقاض apoptotic عن طريق البلعمه. خلال العدوى البكتيرية، العَدلات خروج الأنسجة والخضوع في نهاية المطاف للمبرمج في دلنس2 ونموذج لالتهاب القولون المستحثة بمفاجآت صيف دبي، والبيانات تدعم الفرضية القائلة بأن خروج بلعم ضروري لحل التهاب المحلية3. ومع ذلك، ما إذا كان يحدث خروج العَدلات وبلعم في جميع السياقات التحريضية، غير معروف. أدلة اللمفاويات T الخروج من حالة ثابتة4،5،،من67و المصابين8ملتهبة4،،من910، 11،12 الأنسجة الطرفية غير اللمفاوية، ويشير إلى أن أوافيكم بنشاط خلايا تي، على الرغم من الإشارات المستندة إلى الأنسجة التي تدفع هذا الخروج ما زالت غير مفهومة. وقد حددت عدة دراسات خروج الإشارات الضرورية للهجرة الاتجاه نحو تجفيف الشعيرات اللمفاوية واللاحقة بما في ذلك يجند chemokine (عزر ج ج) 21 (CCL21) ولها مستقبلات، CCR7،من411 13, يجند chemokine (عزر ج-س-ج) 12 (CXCL12) ومستقبلات CXCR42،14، وسفينجوسيني-1-فوسفات (S1P)10،،من1516. بيد أن هذه الآليات ليست نشطة في جميع السياقات، وعما إذا كانت هي تحديد الخروج من جميع أنواع الخلايا تبقى مسألة مفتوحة. الأهم من ذلك، يتطلب أعمق للآليات التي تحكم متدفقة وأهميتها الوظيفية في المرض زيادة الكمية في فيفو أساليب التحليل.
وقد استخدمت عدة طرق التحديد الكمي للخروج في عدة نماذج حيوانية في الجسم الحي بما في ذلك كانوليشن مباشرة من الأوعية اللمفاوية، التبني نقل السابقين فيفو المسمى الكريات البيضاء، التطبيق عبر الجلد لتتبع الفلورسنت، حقن الجسيمات المسمى، و في فيفو فوتوكونفيرسيون17،18. كانولاتيون المباشر للأوعية اللمفاوية الماوس الزبائ صعبة ومحدودة في الحيوانات الصغيرة بكميات السوائل التي يمكن جمعها. وبالتالي، إلى حد كبير أداء كانوليشن في الحيوانات الكبيرة (على سبيل المثال.، الأغنام) التي تكون فيها مثل هذه المعالجات الجراحية العملية. وتوفر هذه الدراسات أدلة مباشرة لوجود خلايا اللمفاوية سواء النقوي في الليمفاوية10،،من1920. وعلاوة على ذلك، تكشف نماذج الأغنام أن الالتهاب الحاد والمزمن زاد وجود اللمفاويات في الليمفاوية 100-fold حوالي10،21.
التبني نقل الخلايا الليمفاوية المسماة ومحوره وراثيا كشفت الأهم من ذلك أن CCR7 مطلوب للخروج من خلايا CD4 خلايا+ ر من حدة التهاب الجلد5،11، أثناء المعالجة الأولية للخلايا اللمفية مع جزيء صغير S1P مستقبلات مؤثر، يمنع FTY720، إلا بصورة جزئية عن خروج10. من المثير للاهتمام، الخروج من الخلايا الليمفاوية المحولة من التهاب مزمن في الجلد مستقلة CCR710، لكن قد تتطلب جزئيا CXCR49. تجارب نقل التبني، ومع ذلك، توصيل أرقام غير الفسيولوجية السابقين فيفو لمفاوية المنشط والمسمى إلى الأنسجة عن طريق الحقن، مما يغير البيئة النشاط الحيوي للأنسجة والضغوط السائل الخلالي مرتفعة أن فتح الشعيرات اللمفاوية الأولية، وتغيير خصائص النقل على22. كبديل، تطبيق عبر الجلد من fluorescein isothiocyanate (فيتك) في وجود أو عدم وجود المهيجات الجلدية (مثلاً.، والفثالات الفثالات، دبة) أو العدوى23،24 يسمح بالتتبع خلايا متجولة التي تتراكم الراسم وتهاجر إلى دلنس. وبالمثل، المسمى فلوريسسينتلي الأورام توفر وسيلة لتتبع الخلايا البلعمية التي تجتاح الورم المواد25. ووفرت هذه الأساليب الهامة من التبصر في الآليات التي تحكم العاصمة خروج13،14،17،،من2627 ولكن غير قادر على تتبع غير متجولة الخلايا الليمفاوية، وتفسير يمكن تعقدت اللمفاوي خالية من فيتك القابلة للذوبان وبالتالي وضع العلامات غير المهاجرة، LN المقيم وحدات تحكم المجال Dc.
وبدلاً من ذلك، الفحص المجهري إينترافيتال هو أداة قوية تسمح بتتبع في فيفو السكان الكريات البيض فسيولوجيا ذات الصلة في الوقت الحقيقي28،29. المستخدمة في تركيبة مع مراسل الفئران والقائم على جسم في فيفو إيمونوفلوريسسينت العلامات، إينترافيتال مجهرية كشف المجمع المكاني والزماني ديناميات المناعي الخلية الاتجار بالأشخاص، بما في ذلك الهجرة فراغي30 ، التهجير عبر البطانة اللمفاوية، ومرور داخل التجويف اللمفاوية، والهجرة على LN دخول28،31. محدود بالمصروفات، الخبرة الفنية اللازمة لإعداد، اعتماد واسع النطاق لتقنيات التصوير إينترافيتال ومحدودة الإنتاجية للتحديد الكمي لأنواع متعددة من الخلايا. لا يزال، اقتران الأساليب الكمية أن تحليل الديناميات السكانية الأنسجة مع تصوير إينترافيتال سوف توفر البصيرة ميكانيكية إضافية وهامة فيما يخص آليات حركية والهجرة نحو وداخل الشعيرات الدموية اللمفية 18 , 31 , 32.
ونتيجة لذلك، في فيفو فوتوكونفيرسيون برز كوسيلة تسمح الموقع في وضع العلامات، مستقل لنشاط متجولة، والتحديد الكمي لخروج الكريات البيض الفسيولوجية (عندما يقترن بالتدفق الخلوي) في غياب أو وجود التحدي. مؤثرا عن الفئران كايد تيمبل بروتين المعزولة من المرجان ستوني أن يسلك الفلورية الخضراء (كايد الأخضر) حتى تتعرض للضوء فوق البنفسجي، بعدها أنه يحول لا رجعة فيه للأسفار أحمر (كايد أحمر)33. يمكن تعقب الخلايا فوتوكونفيرتيد كما أنها خروج من مواقع الأنسجة المحيطية، وتتراكم في دلنس. وكشفت هذه وأخرى مماثلة فوتوكونفيرتيبلي الماوس نماذج34،35 البيولوجيا الهامة بما في ذلك خروج المكونة من خلايا تي التنظيمية من الجلد36، تعتمد على CXCR4 خلية بالخروج من البقع في بييير37 , تعبئة خلايا الذاكرة المقيم T عند إعادة تحدي الببتيد38، وخروج الكريات البيض واسعة من ورم ميكرونفيرونمينتس39. هنا، نحن إجراء مقارنة وجها لوجه من فوتوكونفيرسيون مع التطبيق فيتك عبر الجلد في سياق الالتهابات الجلدية والعدوى تسمح بإجراء مقارنة مباشرة للبيانات الموجودة باستخدام أسلوب فوتوكونفيرتيبلي. وعلاوة على ذلك، نحن تثبت فوتوكونفيرسيون في أورام مزروع ووصف كفاءة التحويل وخروج انتقائية من ورم ميكرونفيرونمينتس. على هذا النحو، يمكننا القول بأن تطبيق هذه الأساليب المزيد من توضيح بيولوجيا حاسمة لخروج الكريات البيض من الأورام، والتي سيكون لها آثار كبيرة على تفسير intratumoral الكريات البيض التعقيد، الحصانة المضادة للورم، و واستجابة للعلاج.
Protocol
Representative Results
Discussion
على الرغم من أن خروج الكريات البيض من الأنسجة المحيطية، غير اللمفاوية أمر حاسم لبدء والقرار من الاستجابات المناعية، هي غير مفهومة الآليات الجزيئية التي تنظم متدفقة. هذه الفجوة في المعرفة إلى حد كبير بسبب توفر أدوات للقياس الكمي في فيفو. هنا، يمكننا وصف استخدام الفئران فوتوكونفيرتيب?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
الكتاب يود أن يشكر الدكتور ماركوس بوثينبيرج لتوفير YUMM 1.1 و YUMM 1.7 الميلانوما مورين خطوط والدكتورة ديبورا ج. فول لتوفير B6. Cg-Tg(CAG-tdKaede) 15Utr الفئران باﻻتفاق مع BRC بتبريد عن طريق بيو الموارد الوطنية من يأمرون، اليابان.
Materials
| Collagenase D | Roche | 11088866001 | |
| DNase | Roche | 4536282001 | |
| Silver-LED-405B light source with optical fiber and collimtor | Prizmatix Ltd | V8144 | |
| Fluorescein isothiocyanate isomer I | Sigma-Aldrich | F4274 | |
| dibutyl phthalate | Sigma-Aldrich | 524980 | |
| acetone | Macron Fine Chemicals | 2440-02 | |
| 29-guage syringes | Exel International | 26029 | |
| Evans Blue | Sigma-Aldrich | E2129 | |
| 70 um cell strainers | VWR | 732-2758 | |
| paraformaldehyde | Sigma-Aldrich | P6148 | |
| HBSS | Caisson | HBL06 | |
| LIVE/DEAD Fixable Aqua Dead Cell Stain Kit | Invitrogen | L34966 | |
| Purified Anti-mouse CD16/CD32 | Tonbo Biosciences | 70-0161-M001 | |
| BV605 CD11c (clone N418) | Biolegend | 117334 | |
| PerCP-Cy5.5 MHCII (clone M5/114.15.2) | BD Pharmingen | 562363 | |
| BV421 CD3e (clone 145-2C11) | Biolegend | 100341 | |
| APC CD8a (clone 53-6.7) | TonBo Biosciences | 20-0081-u100 | |
| APC-Cy7 CD45 (clone 30-F11) | Biolegend | 103116 | |
| BV650 CD19 (clone 6D5) | Biolegend | 115541 | |
| PercCP-Cy5.5 Ly6C (clone HK1.4) | Biolegend | 128011 | |
| Alexa Fluor 647 F4/80 (clone BM8) | Biolegend | 123121 | |
| APC-Cy7 Ly6G (clone 1A8) | Biolegend | 127623 | |
| BV711 CD11b (clone M1/70) | Biolegend | 101241 | |
| BV605 CD45 (clone 30-F11) | Biolegend | 103155 | |
| BV711 CD4 (clone RM4-5) | BD Biosciences | 563726 | |
| Bovine serum albumin (Fraction V) | Fisher Scientific | BP1600-100 | |
| Anit-Rat and Anti-Hamster Igk / Negative Control Compensation Particle Set | BD Biosciences | 552845 | |
| Fortessa Flow Cytometer | BD Biosciences | ||
| FlowJo v10 Software | FlowJo |
References
- Banchereau, J., Steinman, R. M. Dendritic cells and the control of immunity. Nature. 392 (6673), 245-252 (1998).
- Hampton, H. R., Bailey, J., Tomura, M., Brink, R., Chtanova, T. Microbe-dependent lymphatic migration of neutrophils modulates lymphocyte proliferation in lymph nodes. Nature Communications. 6, 7139 (2015).
- D’Alessio, S., et al. VEGF-C-dependent stimulation of lymphatic function ameliorates experimental inflammatory bowel disease. Journal of Clinical Investigation. 124 (9), 3863-3878 (2014).
- Debes, G. F., et al. Chemokine receptor CCR7 required for T lymphocyte exit from peripheral tissues. Nature Immunology. 6 (9), 889-894 (2005).
- Bromley, S. K., Yan, S., Tomura, M., Kanagawa, O., Luster, A. D. Recirculating memory T cells are a unique subset of CD4+ T cells with a distinct phenotype and migratory pattern. Journal of Immunology. 190 (3), 970-976 (2013).
- Tomura, M., et al. Activated regulatory T cells are the major T cell type emigrating from the skin during a cutaneous immune response in mice. Journal of Clinical Investigation. 120 (3), 883-893 (2010).
- Tomura, M., Itoh, K., Kanagawa, O. Naive CD4+ T lymphocytes circulate through lymphoid organs to interact with endogenous antigens and upregulate their function. Journal of Immunology. 184 (9), 4646-4653 (2010).
- Jennrich, S., Lee, M. H., Lynn, R. C., Dewberry, K., Debes, G. F. Tissue exit: a novel control point in the accumulation of antigen-specific CD8 T cells in the influenza a virus-infected lung. Journal of Virology. 86 (7), 3436-3445 (2012).
- Geherin, S. A., Wilson, R. P., Jennrich, S., Debes, G. F. CXCR4 is dispensable for T cell egress from chronically inflamed skin via the afferent lymph. PLoS One. 9 (4), e95626 (2014).
- Brown, M. N., et al. Chemoattractant receptors and lymphocyte egress from extralymphoid tissue: changing requirements during the course of inflammation. Journal of Immunology. 185 (8), 4873-4882 (2010).
- Bromley, S. K., Thomas, S. Y., Luster, A. D. Chemokine receptor CCR7 guides T cell exit from peripheral tissues and entry into afferent lymphatics. Nature Immunology. 6 (9), 895-901 (2005).
- Gomez, D., Diehl, M. C., Crosby, E. J., Weinkopff, T., Debes, G. F. Effector T Cell Egress via Afferent Lymph Modulates Local Tissue Inflammation. Journal of Immunology. 195 (8), 3531-3536 (2015).
- Ohl, L., et al. CCR7 governs skin dendritic cell migration under inflammatory and steady-state conditions. Immunity. 21 (2), 279-288 (2004).
- Kabashima, K., et al. CXCL12-CXCR4 engagement is required for migration of cutaneous dendritic cells. American Journal of Pathology. 171 (4), 1249-1257 (2007).
- Cyster, J. G., Schwab, S. R. Sphingosine-1-phosphate and lymphocyte egress from lymphoid organs. Annual Review of Immunology. 30, 69-94 (2012).
- Matloubian, M., et al. Lymphocyte egress from thymus and peripheral lymphoid organs is dependent on S1P receptor 1. Nature. 427 (6972), 355-360 (2004).
- Teijeira, A., Rouzaut, A., Melero, I. Initial afferent lymphatic vessels controlling outbound leukocyte traffic from skin to lymph nodes. Frontiers in Immunology. 4, 433 (2013).
- Hunter, M. C., Teijeira, A., Halin, C. T Cell Trafficking through Lymphatic Vessels. Frontiers in Immunology. 7, 613 (2016).
- Bujdoso, R., Hopkins, J., Dutia, B. M., Young, P., McConnell, I. Characterization of sheep afferent lymph dendritic cells and their role in antigen carriage. Journal of Experimental Medicine. 170 (4), 1285-1301 (1989).
- Young, A. J. The physiology of lymphocyte migration through the single lymph node in vivo. Seminars in Immunology. 11 (2), 73-83 (1999).
- Seabrook, T., et al. The traffic of resting lymphocytes through delayed hypersensitivity and chronic inflammatory lesions: a dynamic equilibrium. Seminars in Immunology. 11 (2), 115-123 (1999).
- Swartz, M. A., et al. Mechanics of interstitial-lymphatic fluid transport: theoretical foundation and experimental validation. Journal of Biomechanics. 32 (12), 1297-1307 (1999).
- Macatonia, S. E., Knight, S. C., Edwards, A. J., Griffiths, S., Fryer, P. Localization of antigen on lymph node dendritic cells after exposure to the contact sensitizer fluorescein isothiocyanate. Functional and morphological studies. Journal of Experimental Medicine. 166 (6), 1654-1667 (1987).
- Robbiani, D. F., et al. The leukotriene C(4) transporter MRP1 regulates CCL19 (MIP-3beta, ELC)-dependent mobilization of dendritic cells to lymph nodes. Cell. 103 (4), 757-768 (2000).
- Roberts, E. W., et al. Critical Role for CD103(+)/CD141(+) Dendritic Cells Bearing CCR7 for Tumor Antigen Trafficking and Priming of T Cell Immunity in Melanoma. Cancer Cell. 30 (2), 324-336 (2016).
- Forster, R., et al. CCR7 coordinates the primary immune response by establishing functional microenvironments in secondary lymphoid organs. Cell. 99 (1), 23-33 (1999).
- Johnson, L. A., Jackson, D. G. The chemokine CX3CL1 promotes trafficking of dendritic cells through inflamed lymphatics. Journal of Cell Science. 126, 5259-5270 (2013).
- Teijeira, A., et al. T Cell Migration from Inflamed Skin to Draining Lymph Nodes Requires Intralymphatic Crawling Supported by ICAM-1/LFA-1 Interactions. Cell Reports. 18 (4), 857-865 (2017).
- Kilarski, W. W., et al. Intravital immunofluorescence for visualizing the microcirculatory and immune microenvironments in the mouse ear dermis. PLoS One. 8 (2), e57135 (2013).
- Overstreet, M. G., et al. Inflammation-induced interstitial migration of effector CD4(+) T cells is dependent on integrin alphaV. Nature Immunology. 14 (9), 949-958 (2013).
- Russo, E., et al. Intralymphatic CCL21 Promotes Tissue Egress of Dendritic Cells through Afferent Lymphatic Vessels. Cell Reports. 14 (7), 1723-1734 (2016).
- Steven, P., Bock, F., Huttmann, G., Cursiefen, C. Intravital two-photon microscopy of immune cell dynamics in corneal lymphatic vessels. PLoS One. 6 (10), e26253 (2011).
- Tomura, M., et al. Monitoring cellular movement in vivo with photoconvertible fluorescence protein "Kaede" transgenic mice. Proceedings of the National Academy of Sciences of the USA. 105 (31), 10871-10876 (2008).
- Shand, F. H., et al. Tracking of intertissue migration reveals the origins of tumor-infiltrating monocytes. Proceedings of the National Academy of Sciences of the USA. 111 (21), 7771-7776 (2014).
- Tomura, M., et al. Tracking and quantification of dendritic cell migration and antigen trafficking between the skin and lymph nodes. Scientific Reports. 4, 6030 (2014).
- Moran, A. E., et al. T cell receptor signal strength in Treg and iNKT cell development demonstrated by a novel fluorescent reporter mouse. Journal of Experimental Medicine. 208 (6), 1279-1289 (2011).
- Schmidt, T. H., Bannard, O., Gray, E. E., Cyster, J. G. CXCR4 promotes B cell egress from Peyer’s patches. Journal of Experimental Medicine. 210 (6), 1099-1107 (2013).
- Beura, L. K., et al. T Cells in Nonlymphoid Tissues Give Rise to Lymph-Node-Resident Memory T Cells. Immunity. 48 (2), 327-338 (2018).
- Torcellan, T., et al. In vivo photolabeling of tumor-infiltrating cells reveals highly regulated egress of T-cell subsets from tumors. Proceedings of the National Academy of Sciences of the USA. 114 (22), 5677-5682 (2017).
- Khan, T. N., Mooster, J. L., Kilgore, A. M., Osborn, J. F., Nolz, J. C. Local antigen in nonlymphoid tissue promotes resident memory CD8+ T cell formation during viral infection. Journal of Experimental Medicine. 213 (6), 951-966 (2016).
- Loo, C. P., et al. Lymphatic Vessels Balance Viral Dissemination and Immune Activation following Cutaneous Viral Infection. Cell Reports. 20 (13), 3176-3187 (2017).
- Radu, M., Chernoff, J. An in vivo assay to test blood vessel permeability. Journal of Visualized Experiments. (73), e50062 (2013).
- Morton, A. M., et al. Endoscopic photoconversion reveals unexpectedly broad leukocyte trafficking to and from the gut. Proceedings of the National Academy of Sciences of the USA. 111 (18), 6696-6701 (2014).
- Meeth, K., Wang, J. X., Micevic, G., Damsky, W., Bosenberg, M. W. The YUMM lines: a series of congenic mouse melanoma cell lines with defined genetic alterations. Pigment Cell Melanoma Research. 29 (5), 590-597 (2016).
- Demkowicz, W. E., Littaua, R. A., Wang, J., Ennis, F. A. Human cytotoxic T-cell memory: long-lived responses to vaccinia virus. Journal of Virology. 70 (4), 2627-2631 (1996).
- Stewart, A. J., Devlin, P. M. The history of the smallpox vaccine. Journal of Infection. 52 (5), 329-334 (2006).
- Hammarlund, E., et al. Duration of antiviral immunity after smallpox vaccination. Nature Medicine. 9 (9), 1131-1137 (2003).
- Lund, A. W., et al. Lymphatic vessels regulate immune microenvironments in human and murine melanoma. Journal of Clinical Investigation. 126 (9), 3389-3402 (2016).
- Tomura, M., Kabashima, K. Analysis of cell movement between skin and other anatomical sites in vivo using photoconvertible fluorescent protein "Kaede"-transgenic mice. Methods in Molecular Biology. , 279-286 (2013).
- Bellingan, G. J., Caldwell, H., Howie, S. E., Dransfield, I., Haslett, C. In vivo fate of the inflammatory macrophage during the resolution of inflammation: inflammatory macrophages do not die locally, but emigrate to the draining lymph nodes. Journal of Immunology. 157 (6), 2577-2585 (1996).
- Gautier, E. L., Ivanov, S., Lesnik, P., Randolph, G. J. Local apoptosis mediates clearance of macrophages from resolving inflammation in mice. Blood. 122 (15), 2714-2722 (2013).
- Abadie, V., et al. Neutrophils rapidly migrate via lymphatics after Mycobacterium bovis BCG intradermal vaccination and shuttle live bacilli to the draining lymph nodes. Blood. 106 (5), 1843-1850 (2005).
- Beauvillain, C., et al. CCR7 is involved in the migration of neutrophils to lymph nodes. Blood. 117 (4), 1196-1204 (2011).
- Rigby, D. A., Ferguson, D. J., Johnson, L. A., Jackson, D. G. Neutrophils rapidly transit inflamed lymphatic vessel endothelium via integrin-dependent proteolysis and lipoxin-induced junctional retraction. Journal of Leukocyte Biology. 98 (6), 897-912 (2015).
- Hanahan, D., Coussens, L. M. Accessories to the crime: functions of cells recruited to the tumor microenvironment. Cancer Cell. 21 (3), 309-322 (2012).
- Binnewies, M., et al. Understanding the tumor immune microenvironment (TIME) for effective therapy. Nature Medicine. 24 (5), 541-550 (2018).
