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OP-IVM: Combiner la maturation in vitro après le prélèvement d’ovocytes avec la chirurgie gynécologique

Published: May 9, 2021 doi: 10.3791/61647
Automatic Translation
*1,2,3,4,5, *1,2,3,4,5, *1,2,3,4,5, 1,2,3,4,5, 1,2,3,5, 1,2,3,4,5, 1,2,3,4,5, 1,2,3,4,5
1Center for Reproductive Medicine, Department of Obstetrics and Gynecology, Peking University Third Hospital, 2National Clinical Research Center for Obstetrics and Gynecology, 3Key Laboratory of Assisted Reproduction, Ministry of Education, 4Beijing Key Laboratory of Reproductive Endocrinology and Assisted Reproduction, 5Research Units of Comprehensive Diagnosis and Treatment of Oocyte Maturation Arrest, Chinese Academy of Medical Sciences
* These authors contributed equally

ERRATUM NOTICE

Summary

La maturation in vitro (MIV) avant opération gynécologique (OP-IVM) combine la MIV après prélèvement d’ovocytes avec la chirurgie gynécologique de routine et sert d’extension des applications conventionnelles de la MIV pour la préservation de la fertilité.

Abstract

L’utilisation de la maturation in vitro (MIV) avant opération gynécologique (OP-IVM) est une extension de la MIV conventionnelle qui combine la MIV après prélèvement d’ovocytes avec la chirurgie gynécologique de routine. OP-IVM convient aux patientes subissant une chirurgie gynécologique bénigne qui ont besoin de la préservation de la fertilité (PF) ou de traitements de l’infertilité tels que la fécondation in vitro et le transfert d’embryons (FIV-ET). Dans la salle d’opération, les patientes subissant une chirurgie gynécologique bénigne sont d’abord anesthésiées et reçoivent un traitement par aspiration foliculaire immature guidée par échographie (IMFA). Au fur et à mesure que la chirurgie gynécologique ultérieure est effectuée, les complexes cumulus-ovocytes (COC) sont examinés et les COC immatures sont transférés dans le milieu IVM et cultivés pendant 28 à 32 heures dans le laboratoire de FIV. Après évaluation, les ovocytes matures au stade MII seront sélectionnés et cryoconservés dans de l’azote liquide pour la FP ou fécondés par injection intracytoplasmique de spermatozoïdes (ICSI) pour la FIV-ET. En combinant la MIV avec la chirurgie gynécologique, les ovocytes immatures qui auraient été jetés peuvent être sauvés et utilisés pour la technologie de procréation assistée (TAR). La procédure, l’importance et les aspects critiques de l’OP-IVM sont décrits dans cet article.

Introduction

La MIV est un TAR dans lequel des ovocytes immatures humains sont cultivés in vitro jusqu’à maturation pour la FIV-ET ou FP. Dans la MIV, les médicaments d’induction de l’ovulation ne sont pas utilisés, réduisant ainsi la douleur, le fardeau financier et les complications telles que le syndrome d’hyperstimulation ovarienne (SHO)1,2. En outre, la MIV est particulièrement adaptée à la PF des patientes atteintes de cancer et au traitement de l’infertilité des patientes hormono-sensibles qui peuvent être incapables ou n’avoir pas le temps de recevoir un traitement d’induction de l’ovulation3. Par conséquent, bien que le nombre d’ovocytes prélevés, le taux de grossesse clinique (RCR) et le taux de naissances vivantes (LBR) soient inférieurs à ceux de la FIV4,5,la MIV a ses propres avantages uniques.

Les patientes infertiles présentant des lésions de l’endomètre, de l’hydrosalpinx ou des kystes ovariens ont généralement subi une chirurgie gynécologique avant le traitement par TAR, et leurs ovocytes sont généralement immatures. OP-IVM utilise l’échographie transvaginale guidée pour récupérer les ovocytes immatures et les cultiver in vitro jusqu’à maturation pour la FIV-ET ou FP. OP-IVM combine IVM après prélèvement d’ovocytes et chirurgie gynécologique, réduisant ainsi les complications courantes dans les cycles d’hyperstimulation ovarienne contrôlée et économisant du temps et de l’argent. Pour les patientes fertiles, OP-IVM pourrait servir d'«assurance fertilité » tout en subissant une chirurgie gynécologique de routine.

En outre, les dommages causés par les chirurgies gynécologiques, telles que l’électrocautérisation6,7 et la résection de la tumeur ovarienne, pourraient être réduits par le prélèvement d’ovocytes avant la chirurgie gynécologique. Par conséquent, par rapport à la chirurgie gynécologique de routine, OP-IVM pourrait réduire le nombre d’opérations pendant le traitement de l’infertilité et prévenir la perte d’ovocytes fonctionnels pendant la chirurgie ovarienne.

Une étude antérieure a montré que la procédure supplémentaire de prélèvement d’ovocytes n’augmenterait pas les complications chirurgicales et les issues défavorables de la grossesse, ni ne prolongerait le séjour à l’hôpital8. Certaines patientes ont donné naissance vivante par OP-IVM8,ce qui indique la faisabilité de cette méthode. Cet article décrit les caractéristiques des patients qui peuvent bénéficier de l’OP-IVM ainsi que les procédures et les points critiques de l’OP-IVM et discute de l’évaluation de la maturité des ovocytes humains.

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Protocol

NOTE: Les études liées à la méthode OP-IVM ont été approuvées par le comité d’examen institutionnel (CISR) du troisième hôpital de l’Université de Pékin et le comité d’éthique de l’Université de Pékin (2014S2004). Un résumé de l’OP-IVM est illustré à la figure 1. La procédure étape par étape sera présentée dans la section suivante.

1. Introduction de l’OP-IVM aux patients appropriés

  1. Identifier les patients potentiels qui pourraient bénéficier de l’OP-IVM tels que ceux décrits aux étapes 1.1.1-1.1.3.:
    1. Patients atteints du syndrome des ovaires polykystiques (SOPK) présentant une résistance au clomifène qui ont besoin d’une chirurgie de forage ovarien laparoscopique.
    2. Les patientes infertiles qui ont besoin de chirurgies gynécologiques bénignes, telles que la myomectomie hystéroscopique, la polypectomie, la résection transcervicale du septum et la chirurgie tubaire laparoscopique, et l’ovariectomie, avant le traitement par TAR.
    3. Patients atteints d’un cancer ou d’une maladie hématologique qui reçoivent une chimiothérapie ou une radiothérapie.

2. Consentement éclairé

  1. Fournir des informations complètes aux patients, y compris les raisons pour lesquelles l’OP-IVM peut être bénéfique, sa procédure, les utilisations des ovocytes IVM (FIV-ET ou cryoconservation), les CPR et les LPR estimés et les complications possibles. Demandez aux patients de donner leur consentement éclairé en signant le formulaire de consentement.

3. Préparer les étiquettes et le milieu ovocytaire IVM

  1. Imprimez des étiquettes d’identification (ID) avec le nom du patient et les dates pour les plats et les tubes de culture.
  2. Ajouter 0,5 mL de milieu IVM complété par 0,075 UI/mL d’hormone folliculo-stimulante (FSH) et 0,075 UI/mL d’hormone lutéinisante (LH) à chaque puits d’une plaque de 4 puits. Couvrir le milieu avec de l’huile.
    REMARQUE: Effectuez toutes ces procédures dans des bancs propres à flux laminaire.
  3. Préchasser la plaque à 4 puits avec un milieu ovocytaire IVM à 37 °C dans de l’air humidifié contenant 5 % de CO2 et 5 % d’O2 au moins 6 h avant utilisation.

4. Administrer l’anesthésie dans une salle d’opération

  1. Vérifiez le nom du patient avant d’administrer l’anesthésie.
  2. Anesthésie intraveineuse du patient par anesthésiste.

5. Effectuer le prélèvement d’ovocytes

  1. Marquez les étiquettes avec le nom, la date et l’ID sur les plats et les tubes de culture.
  2. Placez le patient dans la position de lithotomie de la vessie; désinfectez, drapez et frottez constamment le vagin avec une solution saline chaude.
  3. Placez la sonde à ultrasons à l’intérieur du vagin; scanner et enregistrer le nombre de follicules dans les deux ovaires. Trouvez l’emplacement le plus proche de l’ovaire comme site de ponction et évitez l’intestin, la vessie et les gros vaisseaux sanguins.
  4. Aspirer le liquide folliculaire.
    1. Laver l’aiguille avec un milieu de manipulation au pH stable avant de la perforer (voir tableau des matériaux).
    2. Injecter l’aiguille d’aspiration de 19 G à une seule lumière dans les ovaires sous la direction d’une échographie.
    3. Perforez des follicules plus grands avec des limites claires les plus proches de la sonde. En position basse, injecter rapidement la solution de rinçage complétée par 25 U/mL d’héparine. Aspirer le liquide folliculaire avec l’aiguille sous une pression de 80-90 mmHg, en faisant pivoter légèrement l’aiguille pour aspirer autant de liquide folliculaire que possible. Perforez d’autres follicules du côté proche au côté éloigné sur ce plan.
      REMARQUE: Pendant l’aspiration, le liquide folliculaire contenant des ovocytes s’écoulera dans un tube à essai stérile de 10 mL sous pression négative. L’héparine peut réduire la viscosité du liquide folliculaire pour faciliter le processus d’aspiration.
    4. Retirez l’aiguille de l’ovaire (gardez l’aiguille dans la paroi vaginale). Ajustez la direction de la sonde à ultrasons et perforez les follicules restants sur d’autres plans. Essayez d’aspirer tous les follicules d’un diamètre d’environ 5 à 9 mm.
      REMARQUE: Ajustez la position de la sonde pour la garder au plus près des ovaires en tout temps. Appuyez sur le fornix vaginal avec la force appropriée pour réduire les blessures et les saignements.
    5. Retirez l’aiguille après avoir fini dans un ovaire, lavez l’aiguille avec le milieu de manipulation et perforez l’autre côté en utilisant la même méthode.
      REMARQUE: Aspiration complète du follicule dans les 25-30 minutes.
  5. Transférez le liquide folliculaire de la salle d’opération au laboratoire de FIV quelques minutes après avoir confirmé le nom et l’identité du patient.
    REMARQUE: Transférer le liquide folliculaire aspiré au banc de laboratoire de FIV dès que possible pour éviter la coagulation.
  6. Détecter l’hémorragie active dans la cavité pelvienne avec l’échographie en mode B après avoir perforé tous les follicules. Insérez un spéculum et pointez la pointe vers le fornix postérieur pour détecter un saignement actif au site de ponction.
    REMARQUE: Aucun saignement actif ne doit être observé au site de ponction vaginale si la position de l’ovaire est normale et si le prélèvement d’ovocytes est effectué avec soin. Pour les saignements légers qui se poursuivent même après la compression, gardez une compresse de gaze stérile dans le vagin pendant 2-4 h. Contrôlez les saignements excessifs des petites artères à l’aide de pinces avec pinces vasculaires pendant 2 à 4 h. Les saignements dans la cavité pelvienne ou l’ovaire, qui se produisent rarement, doivent être contrôlés par électrocoagulation par chirurgie laparoscopique.

6. Chirurgie gynécologique

  1. En fonction du besoin et de l’état de la patiente, effectuer une chirurgie gynécologique appropriée après le prélèvement d’ovocytes.
    1. Effectuer une chirurgie de forage ovarien laparoscopique pour les patientes atteintes du syndrome des ovaires polykystiques (SOPK) présentant une résistance au clomifène.
    2. Effectuer une chirurgie gynécologique bénigne pour les patientes infertiles avant le traitement par TAR, comme la myomectomie hystéroscopique, la polypectomie, la résection transcervicale du septum et la chirurgie laparoscopique des trompes, et l’ovariectomie.
    3. Effectuer une ovariectomie pour la cryoconservation de la fertilité des patients atteints d’un cancer ou d’une maladie hématologique qui ont besoin de recevoir une chimioradiothérapie.
      REMARQUE: Ces chirurgies gynécologiques sont des opérations cliniques de base et standardisées. Les directives opérationnelles dans divers pays et hôpitaux devraient être relativement similaires.

7. Effectuer une IVM

REMARQUE: Effectuez l’ensemble du processus de GIV sur un plat homothermique à 37 ° C.

  1. Filtrer le liquide follicule aspiré avec une passoire à cellules en nylon de 70 μm. Rincer à plusieurs reprises le tube de culture et la passoire avec un milieu de manipulation préchauffé au pH stable. Assurez-vous que tous les COC immatures sont complètement transférés dans le plat de culture. Recueillir le liquide filtré, rincer et mettre en culture dans une boîte de Petri de 100 x 15 mm.
  2. Examinez les COC(Figure 2)sous le stéréoscope avec un grossissement de 40x. Transférer rapidement les immatures dans un milieu ovocytaire MIV préchauffé.
    REMARQUE: Choisissez un grossissement approprié en fonction de l’habitude de l’opérateur.
  3. Enregistrez le nombre de COC immatures cultivés.
  4. Informez le patient du nombre de COC cultivés. Discutez de la collecte de sperme avec les patients et leurs partenaires. Effectuer l’extraction de sperme selon la procédure normale.
  5. Culture des COC immatures à 37 °C dans de l’air humidifié contenant 5 % de CO2 et 5 % d’O2 pendant 28-32 h.
  6. Évaluer la maturité des ovocytes.
    1. Dénude les cellules du cumulus par pipetage répété à l’aide d’une pipette Pasteur en verre sous le stéréoscope avec un grossissement de 40x. Examiner l’extrusion du corps polaire (PB) pour identifier le stade de développement des ovocytes. Voir la figure 2 pour des images représentatives des ovocytes dans les COC, la métaphase II (MII), la métaphase I (MI) et les vésicules germinales (GV) avec des caractéristiques morphologiques claires.
      REMARQUE : Utilisez une flamme verticale (p. ex. d’un brûleur Bunsen) pour ajuster le diamètre de la pipette Pasteur en verre à la taille d’un ovocyte.
    2. Comptez les ovocytes MII et enregistrez le nombre.
    3. Choisissez des ovocytes matures pour la FIV ou la vitrification.
      REMARQUE: Prélever les spermatozoïdes le jour où les ovocytes mûrissent pour la FIV, mais pas pour la vitrification des ovocytes.
    4. Culture des ovocytes immatures au stade GV et MI dans le milieu de culture IVM d’origine avec des cellules de cumulus pendant encore 10-14 h. Répétez les étapes 7.6.2 à 7.6.3.

8. Effectuer une ICSI ou une vitrification ovocytaire

  1. Suivez la procédure standard du centre de reproduction8.

9. Culture d’embryons et cryoconservation d’embryons

  1. Suivez la procédure standard du centre de reproduction8.

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Representative Results

Jusqu’en décembre 2019, l’OP-IVM était utilisé pour la préservation de la fertilité de 274 patients. Les résultats embryologiques et reproductifs de 158 patients entre 2014 et 2016 ont été publiés dans un article précédent8. L’exemple suivant décrit la procédure suivie pour un patient sopK recevant op-IVM en 2016. Le patient est un jeune homme de 28 ans diagnostiqué avec une infertilité primaire, un kyste annexique gauche et le SOPK. Elle a reçu une cystectomie laparoscopique et une OP-IVM le 28septembre2016; 27 COC immatures ont été obtenus. Après une culture de 28 h, 7 ovocytes au stade MII ont été sélectionnés et fécondés par ICSI. Le nombre de 2 pro-noyaux (2PN) de bonne qualité au jour 1 et d’embryons au jour 3 et au jour 5 était de 6, 6 et 2, respectivement. Les blastocystes obtenus le jour 5 (4octobre2016) ont été congelés. Le 14février 2017, un blastocyste a été décongelé. Cette blastula décongelée était vivante et transférée dans l’utérus le14février 2017. Les résultats d’un test sanguin de gonadotrophine chorionique humaine (hCG) ont été positifs, et l’échographie a montré une grossesse précoce intra-utérine. La patiente a accouché d’une fille en bonne santé par césarienne à 40 semaines le 2novembre2017.

Figure 1
Figure 1: Organigramme OP-IVM. Avant la chirurgie gynécologique, sous guidage échographique transvaginal, le liquide folliculeux est aspiré par IMFA. Le liquide follicule obtenu est transféré dans le laboratoire de FIV, filtré et rincé. Les COC immatures sont transférés dans une solution de culture IVM pré-avertie et cultivés pendant 28 à 32 h. Les ovocytes matures avec PB sont utilisés pour la cryoconservation ou la FIV-ET. Abréviations : IMFA = aspiration de follicules immatures; FIV = fécondation in vitro; FIV-ET = FIV et transfert d’embryons; COC = complexes cumulus-ovocytes; IVM = maturation in vitro; OP-IVM = IVM avant une opération gynécologique; GV = vésicule germinale; MI = métaphase I; ICSI = injection intracytoplasmique de spermatozoïdes; PB = corps polaire; PN = pro-noyau; J1 = jour 1. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

Figure 2
Figure 2: Caractéristiques morphologiques des images représentatives des ovocytes. (A) COCs, (B) MII, (C) MI, (D) stade GV. Abréviations : COCs = complexes cumulus-ovocytes ; GV = vésicule germinale; MI = métaphase I; MII = métaphase II. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

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Discussion

La méthode OP-IVM décrite dans cet article s’étend aux applications conventionnelles de la MIV et combine la MIV après prélèvement d’ovocytes avec une chirurgie gynécologique de routine. Les ovocytes qui auraient été perdus lors de la chirurgie gynécologique peuvent maintenant être utilisés pour la FIV-ET ou la FP sans risques chirurgicaux supplémentaires. OP-IVM a d’abord été utilisé pour récupérer des ovocytes avant le forage ovarien chez les patientes atteints du SOPK. Son application s’est rapidement étendue aux patients infertiles qui ont besoin d’une chirurgie gynécologique bénigne et aux patients atteints de cancer ou de maladies hématologiques qui ont besoin d’une chimiothérapie. En raison du risque potentiel de métastases, OP-IVM n’est pas approprié ou recommandé pour les patients atteints de tumeurs malignes. Sur la base de l’OP-IVM, un nouveau mode chinois de banque d’ovules pour le PF des patients infertiles et des patients atteints de cancer a été mis en place dans cette institution.

Pour OP-IVM, l’urgence de la chirurgie gynécologique et le potentiel d’obtenir un plus grand nombre d’ovocytes doivent être pris en compte. En général, le résultat de la MIV est positivement corrélé avec le nombre d’ovocytes immatures obtenus lors de la récupération d’ovocytes9. Les follicules dominants peuvent inhiber la croissance des follicules plus petits environnants et provoquer une atrésie10, entraînant une réduction du nombre d’ovocytes immatures récupérés. Par conséquent, si la chirurgie gynécologique n’est pas urgente, la meilleure fenêtre pour OP-IVM est lorsqu’un plus grand nombre de petits follicules avec peu de follicules dominants sont observés par échographie en mode B. En outre, l’hormone anti-mullérienne (AMH) peut être utilisée comme paramètre pour prédire la réserve ovarienne car le nombre d’ovocytes prélevés est significativement corrélé positivement avec AMH11,12. Dans les cas où l’opération gynécologique a été priorisée, autant d’ovocytes immatures doivent être récupérés autant que possible. Dans les opérations d’urgence, le prélèvement d’ovocytes et la MIV doivent être soigneusement évalués en fonction de l’état et de la volonté de la patiente.

IMFA sous guidage échographique transvaginal est une méthode utilisée pour récupérer les ovocytes qui peuvent réduire les dommages à la fonction ovarienne13,14. La ponction ovarienne laparoscopique pour aspirer les ovocytes immatures est également utilisée dans certaines études15. Cependant, par rapport à la laparoscopie, l’IMFA sous échographie transvaginale prend moins de temps, est moins invasive, est plus facile à effectuer16,17et peut obtenir une aspiration folinaire plus ciblée. Par conséquent, pour minimiser l’impact sur la réserve ovarienne et augmenter la précision de l’aspiration, l’IMFA sous guidage échographique transvaginal est recommandé comme une meilleure méthode de prélèvement d’ovocytes dans OP-IVM. Cependant, l’ICSI est recommandée pour la fécondation. Des études antérieures ont montré que la zone pellucide durcit après avoir été cultivée in vitro pendant de longues périodes, ce qui entraîne une réduction du taux de fécondation réussie18. Il a été démontré que l’ICSI améliore efficacement le taux de fécondation des ovocytes IVM dans les cycles naturels19,20. Bien que des études récentes aient montré des taux de fécondation similaires pour l’ICSI et la FIV21,22, l’ICSI présente l’avantage d’utiliser des cycles naturels au lieu de la stimulation ovarienne. Les embryons collectés sont congelés en raison d’un endomètre non préparé, et le transfert d’embryons peut être effectué plus tard selon la procédure standard dans chaque centre.

Le but du TAR est de traiter l’infertilité et d’accoucher de bébés en bonne santé. Des recherches antérieures sur les résultats reproductifs de l’OP-IVM ont montré que le nombre d’ovocytes récupérés et les taux de maturation des ovocytes sont comparables à ceux observés pour les cycles de MIV conventionnels utilisant la FSH et l’hCG. Cependant, OP-IVM a une RCR inférieure et un LBR inférieur à celui de l’IVM conventionnelle8,23,24,25. Cela peut s’expliquer par une maturation ovocytaire limitée en raison du faible potentiel de développement des ovocytes immatures dans les cycles naturels. Cependant, la stimulation hormonale n’est pas une option pour certains patients qui sont incapables ou qui n’ont pas le temps de recevoir le traitement. De plus, la vitrification peut endommager le potentiel de développement des ovocytes, entraînant de faibles CR et LR26,27.

De plus, les gonadotrophines peuvent agrandir les ovaires et augmenter le risque de saignement pendant le prélèvement d’ovocytes, ce qui affecte négativement l’exposition des champs opératoires lors de la laparoscopie. Le LBR de la méthode OP-IVM est relativement faible. D’autres études sont nécessaires pour examiner le meilleur moment opératoire et modifier le système de culture de la MIV afin d’améliorer les résultats de l’OP-IVM. Dans l’ensemble, OP-IVM combine la MIV avec la chirurgie gynécologique afin que les ovocytes immatures qui auraient été endommagés ou jetés puissent être sauvés et utilisés pour le TAR. OP-IVM a l’avantage d’éviter les complications causées par les médicaments stimulant l’ovaire et de réduire le nombre d’opérations pour le traitement de l’infertilité. Par conséquent, l’OP-IVM devrait être considérée comme une méthode de traitement potentiellement utile pour certains patients et étudiée plus en profondeur pour mieux comprendre ses effets et ses résultats.

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Disclosures

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Acknowledgments

Ce travail a été soutenu par des subventions du China National Key R&D Program (n° 2017YFC1002000, 2018YFC1004001, 2019YFA0801400), de la National Science Foundation of China (n° 81571386, 81730038), du Fonds d’innovation CAMS pour les sciences médicales (2019-I2M-5-001) et du Projet spécial de recherche sur le développement de la santé des capitaux chinois (2018-2-4095).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
19 G single-lumen aspiration needles Cook, Australia K-OPS-7035-REH-ET
4-well plate Corning
70 μm nylon cell strainer Falcon, USA 352350
CO2 Incubator Thermo
Culture oil Vitrolife, Sweden 10029,OVOIL  Step 3.2.
FSH & LH Ferring Reproductive Health, Germany MENOPUR®
Glass Pasteur pipette Hilgenberg GmbH, Germany 3154102-26
G-MOPS medium pH-stable handling medium for washing the needle before puncturing
IVM medium Origio, Denmark ART-1600-B
Laminar Flow Clean Benches ESCO
Petri dish Thermo Fisher Scientific, Denmark 263991
pH stable handing media designed to support the handling and manipulation of oocytes and embryos outside the incubator Vitrolife, Sweden 10130, G-MOPS PLUS Step 7.1.
Rinse solution Cook, Australia K-SIFB-100
Stereoscope Nikon

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Médecine Numéro 171 MIV préservation de la fertilité récupération transvaginale procédures gynécologiques endoscopiques SOPK

Erratum

Formal Correction: Erratum: OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery
Posted by JoVE Editors on 06/26/2023. Citeable Link.

An erratum was issued for: OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery. The Protocol and Representative Results sections were updated.

Step 3.2 of the Protocol was updated from:

Add 0.5 mL of IVM medium supplemented with 0.075 IU/mL of follicle-stimulating hormone (FSH) and 0.075 IU/mL of luteinizing hormone (LH) to each well of a 4-well plate. Cover the medium with oil.

to:

Add 0.5 mL of IVM medium supplemented with 0.75 IU/mL of follicle-stimulating hormone (FSH) and 0.75 IU/mL of luteinizing hormone (LH) to each well of a 4-well plate. Cover the medium with oil.

The legend for Figure 2 was updated from:

Figure 2: Morphological characteristics of representative images of oocytes. (A) COCs, (B) MII, (C) MI, (D) GV stage. Abbreviations: COCs = cumulus-oocyte complexes; GV = germinal vesicle; MI = metaphase I; MII = metaphase II.

to:

Figure 2: Morphological characteristics of representative images of oocytes. (A) COCs, (B) GV, (C) MI, (D) MII stage. Abbreviations: COCs = cumulus-oocyte complexes; GV = germinal vesicle; MI = metaphase I; MII = metaphase II.

OP-IVM: Combiner la maturation in vitro après le prélèvement d’ovocytes avec la chirurgie gynécologique
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Liu, T., Song, X., Zheng, X., Yan,… More

Liu, T., Song, X., Zheng, X., Yan, L., Ma, C., Li, R., Yan, J., Qiao, J. OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery. J. Vis. Exp. (171), e61647, doi:10.3791/61647 (2021).

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