Milchauffangmethoden für Mäuse und Reeves Muntjac Deer
Summary
Milk collection from animal models facilitates various research avenues: understanding passive immunity, identifying pathogens responsible for vertical transmission and, through the use of transgenic mice, even commercial production of proteins found in human breast milk. Here we illustrate a simple method for milk collection in mice and Reeves’ muntjac deer.
Abstract
Animal models are commonly used throughout research laboratories to accomplish what would normally be considered impractical in a pathogen’s native host. Milk collection from animals allows scientists the opportunity to study many aspects of reproduction including vertical transmission, passive immunity, mammary gland biology, and lactation. Obtaining adequate volumes of milk for these studies is a challenging task, especially from small animal models. Here we illustrate an inexpensive and facile method for milk collection in mice and Reeves’ muntjac deer that does not require specialized equipment or extensive training. This particular method requires two researchers: one to express the milk and to stabilize the animal, and one to collect the milk in an appropriate container from either a Muntjac or mouse model. The mouse model also requires the use of a P-200 pipetman and corresponding pipette tips. While this method is low cost and relatively easy to perform, researchers should be advised that anesthetizing the animal is required for optimal milk collection.
Introduction
Tiermodelle geben Einblick in Krankheitspathologie, die nicht durch in vitro-Analyse gewonnen werden können. Um die wirksamsten Ergebnisse zu erzielen, ist es wichtig, ein Tiermodell, das eng mit der Krankheit und verwandte Spezies von Interesse verwendet wird. Zum Beispiel, die Reeves 'muntjac (Muntiacus reevesi), eine kleine asiatische Hirsche 1,2 und transgenen Mäusen, die Hirsch Prion-Protein (CerTgPrP) 3 exprimieren sind nützlich, Tiermodelle für Hirscharten. Beide Arten sind polyestrous, so dass das ganze Jahr über Zucht, und somit eine konsistente Quelle für schwangerschaftsbedingten Gewebe und Flüssigkeiten, um spezifische Mechanismen in Hirsch Biologie zu studieren. Untersuchungen von Milch haben eine breite Palette von Anwendungen, die einfach (und kostengünstig) sind in Tiermodellen erreicht als beim Menschen. Forscher könnten Milch und Kolostrum als eine potenzielle Quelle von 1) Übertragung von Infektionskrankheiten zu untersuchen, 2) Immunglobuline von Mutter zu Kind in die Entwicklungs übertragenpment der passiven Immunität 4 und 3) Lactoferrin, ein Protein in der menschlichen Muttermilch in passive Immunität, die Forscher versuchen derzeit, beteiligt gefunden kommerziell produzieren 5.
Sammeln eine erhebliche Menge an Milch von Kleintieren kann sich als eine schwierige Aufgabe sein. Rogers vorgeschlagen, einen Ansatz für die Milch von Ratten 6, die anschließend in Mäuse verwendet wurde, zu sammeln. DePeters und Hovey vorgeschlagen zwei Verfahren zur Milchsammlung, eine mit einer manuell erzeugten Unterdruck durch ein Gummipipettenkolben in eine Pasteur-Pipette befestigt erzeugt, und einem zweiten, das den Aufbau einer Melkeinheit, die dann an eine Vakuumquelle angeschlossen (wie erforderlich wie einen Wasserhahn), um Maus Milch 7 ernten. Hier schlagen wir eine einfache, kostengünstige Methode zur Erfassung von Milch von Mäusen und Reeves 'muntjac Rehe, die nur leicht verfügbaren Laborausstattung und grundlegende technische Fähigkeiten erfordert. Unsere Methode liefert ausreichend Milchmengen für verschiedeneAnwendungen.
Protocol
Representative Results
Discussion
Maus
Es gibt mehrere Faktoren zu berücksichtigen, wenn das Sammeln Milch von einer Maus zu machen, einschließlich 1) die Zeit, die für die Sammlung beiseite gesetzt, 2) die Dosis von Oxytocin verabreicht, 3), wie viele Jungtiere die Mutter ist derzeit Pflege und 4) die Menge der Zeit, die seit der Geburt zum Zeitpunkt der Sammlung durchlaufen hat. Mit früheren Studien als Richtlinien, machten wir uns um die Bedingungen für die Milchleistung zu optimieren.
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The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
These experiments were funded by the NIH grant #RAI093634A. We express immense gratitude to Jenny Powers, DVM, PhD, for her assistance in muntjac milking.
Materials
| Materials-Mouse | |||
| Name of Material/Reagent | Vendor | Catalog Number | Comments |
| Ketamine (KetaVed 100 mg/mL) (dose: 80-100 mg/kg) | MWI/Vedco | 011075 | |
| Xylazine (TranquiVed 100 mg/ml) (dose:5-10 mg/kg) | MWI/Vedco | NADA 139236 | |
| Eye lubricant | MWI/Apexa | 701013 | |
| Oxytocin (2 IU/kg) | Vet One | 501013 | |
| Materials- Muntjac | |||
| Name of Material/Reagent | Vendor | Catalog Number | Comments |
| Midazolam (1-2 mg/kg) | Amerisource Bergen Drug Corp | 924326 | optional: researcher can either use Midazolam on its own or BAM combination as an anesthetic |
| Butorphanol tartrate (Torbugesic) (0.45 mg/kg) | Fort Dodge Animal Health | NADA 135-780 | |
| Azaperone tartrate (0.25 mg/kg) | ZooPharm | ||
| Medetomadine HCl (0.07 mg/kg) | ZooPharm | ||
| Antipamezol hydrochloride (Antisedan) (dose: 0.25 mg/kg) | Orion Corporation | NADA 141-033 | |
| Oxytocin (10 IU/kg) | Vet One | 501013 | |
| Equipment- Mouse | |||
| Name of Equipment | Vendor | Catalog Number | Comments |
| P-200 Pipetman | Gilson | F123601 | |
| 200 μL pipette tips | Light Labs | B-2004-SH | |
| 1 ml syringes | MWI | 005427 | |
| 27 gauge needles | MWI | 002031 | |
| Equipment- Muntjac | |||
| Name of Equipment | Vendor | Catalog Number | Comments |
| 15 ml conical tubes | VWR | 21008-918 | |
| 22 gauge needles | MWI | 873 | |
| 3 ml luer lock syringes | MWI | 001377 |
Referencias
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- Pei, K., Taber, R., O’Gara, B., Wang, Y. Breeding cycle of the Formosan Reeves muntjac (Muntiacus reevesi micrurus) in northern Taiwan, Republic of China. Mammalia. 59 (2), 223-228 (1995).
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- Van de perre, P. Transfer of antibody via mother’s milk. Vaccine. 21 (24), 3374-3376 (2003).
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- Miller, B. F., Osborn, D. A., Lance, W. R., Howze, M. M., Warren, R. J., Miller, K. V. Butorphanol-azaperone-medetomidine for immobilization of captive white-tailed deer. 45 (2), 457-467 (2009).
