Fareler ve Reeves 'munçağı Deer için Süt Toplama Yöntemleri
Summary
Milk collection from animal models facilitates various research avenues: understanding passive immunity, identifying pathogens responsible for vertical transmission and, through the use of transgenic mice, even commercial production of proteins found in human breast milk. Here we illustrate a simple method for milk collection in mice and Reeves’ muntjac deer.
Abstract
Animal models are commonly used throughout research laboratories to accomplish what would normally be considered impractical in a pathogen’s native host. Milk collection from animals allows scientists the opportunity to study many aspects of reproduction including vertical transmission, passive immunity, mammary gland biology, and lactation. Obtaining adequate volumes of milk for these studies is a challenging task, especially from small animal models. Here we illustrate an inexpensive and facile method for milk collection in mice and Reeves’ muntjac deer that does not require specialized equipment or extensive training. This particular method requires two researchers: one to express the milk and to stabilize the animal, and one to collect the milk in an appropriate container from either a Muntjac or mouse model. The mouse model also requires the use of a P-200 pipetman and corresponding pipette tips. While this method is low cost and relatively easy to perform, researchers should be advised that anesthetizing the animal is required for optimal milk collection.
Introduction
Hayvan modelleri in vitro analizi ile elde edilemez hastalığı patolojisi içgörü sağlayabilir. En etkili sonuçlar elde etmek için, yakından hastalığın ve ilgili türler ile ilgili bir hayvan modeli kullanmak önemlidir. Örneğin, Reeves 'muntjac (Muntiacus reevesi), cervid prion proteini (CerTgPrP) 3 eksprese eden bir küçük Asya geyik 1,2, ve transjenik farenin cervid türleri için yararlı hayvan modelleridir. Her iki tür de yıl boyunca üreme izin polyestrous ve bu nedenle gebelikle ilgili dokular ve sıvılar için tutarlı bir kaynak cervid biyolojide belirli mekanizmaları incelemek için. Süt çalışmalar insanlarda daha hayvan modellerinde gerçekleştirilebilir daha basit (ve pahalı olmayan) olan uygulamaların geniş bir dizi vardır. Araştırmacılar 1) bulaşıcı hastalık bulaşma potansiyel bir kaynağı olarak süt ve kolostrum araştırmak olabilir, develo yavrular anneden aktarılan 2) immünglobülinlerpasif bağışıklık 4 ve 3) laktoferrinin pment, araştırmacılar şu anda çalışıyorsunuz pasif bağışıklık yer anne sütünde bulunan bir protein ticari 5 üretirler.
Küçük hayvanlardan süt önemli bir miktarı toplamak zor bir görev olarak kanıtlamak olabilir. Rogers daha sonra farelerde kullanılan sıçanlarda 6, süt toplamak için bir yaklaşım önerdi. DePeters Hovey ve daha sonra bir vakum kaynağına bağlı bir sağma birimi (yapımını gerektiren süt toplama, bir Pasteur pipetine bağlı bir lastik pipet ampul tarafından üretilen bir el ile oluşturulan vakum kullanılarak bir ve ikinci için iki yöntem önerilen bu fare süt 7 hasat bir musluk) olarak. Burada fareler ve sadece hazır laboratuvar ekipmanı ve temel teknik beceri gerektirir Reeves 'munçağı geyik, hem süt toplamak için basit, düşük maliyetli bir yöntem öneriyoruz. Bizim yöntem çeşitli süt, yeterli miktarda veriruygulamaları.
Protocol
Representative Results
Discussion
Fare
1 dahil olmak üzere bir fare süt toplama dikkate alınması gereken çeşitli faktörler,) toplanması için ayrılan süreyi, oksitosin 2) doz, 3) baraj şu anda hemşirelik ve 4) miktarı kaç yavrular vardır toplama sırasında doğumdan bu yana geçen zaman. Kurallar olarak önceki çalışmaları kullanarak, süt verimi için koşulları optimize etmek için yola çıktı.
Önceki araştırmalar, doğrudan çöp boyutu 8 i…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
These experiments were funded by the NIH grant #RAI093634A. We express immense gratitude to Jenny Powers, DVM, PhD, for her assistance in muntjac milking.
Materials
| Materials-Mouse | |||
| Name of Material/Reagent | Vendor | Catalog Number | Comments |
| Ketamine (KetaVed 100 mg/mL) (dose: 80-100 mg/kg) | MWI/Vedco | 011075 | |
| Xylazine (TranquiVed 100 mg/ml) (dose:5-10 mg/kg) | MWI/Vedco | NADA 139236 | |
| Eye lubricant | MWI/Apexa | 701013 | |
| Oxytocin (2 IU/kg) | Vet One | 501013 | |
| Materials- Muntjac | |||
| Name of Material/Reagent | Vendor | Catalog Number | Comments |
| Midazolam (1-2 mg/kg) | Amerisource Bergen Drug Corp | 924326 | optional: researcher can either use Midazolam on its own or BAM combination as an anesthetic |
| Butorphanol tartrate (Torbugesic) (0.45 mg/kg) | Fort Dodge Animal Health | NADA 135-780 | |
| Azaperone tartrate (0.25 mg/kg) | ZooPharm | ||
| Medetomadine HCl (0.07 mg/kg) | ZooPharm | ||
| Antipamezol hydrochloride (Antisedan) (dose: 0.25 mg/kg) | Orion Corporation | NADA 141-033 | |
| Oxytocin (10 IU/kg) | Vet One | 501013 | |
| Equipment- Mouse | |||
| Name of Equipment | Vendor | Catalog Number | Comments |
| P-200 Pipetman | Gilson | F123601 | |
| 200 μL pipette tips | Light Labs | B-2004-SH | |
| 1 ml syringes | MWI | 005427 | |
| 27 gauge needles | MWI | 002031 | |
| Equipment- Muntjac | |||
| Name of Equipment | Vendor | Catalog Number | Comments |
| 15 ml conical tubes | VWR | 21008-918 | |
| 22 gauge needles | MWI | 873 | |
| 3 ml luer lock syringes | MWI | 001377 |
Referencias
- Dueling, S. . Muntiacus reevesi. Animal Diversity Web. , (2004).
- Pei, K., Taber, R., O’Gara, B., Wang, Y. Breeding cycle of the Formosan Reeves muntjac (Muntiacus reevesi micrurus) in northern Taiwan, Republic of China. Mammalia. 59 (2), 223-228 (1995).
- Browning, S. R. Transmission of prions from mule deer and elk with chronic wasting disease to transgenic mice expressing cervid PrP. J. Virol. 78 (23), 13345-13350 (2004).
- Van de perre, P. Transfer of antibody via mother’s milk. Vaccine. 21 (24), 3374-3376 (2003).
- Maden, C. Genetically modified mice produce human milk protein. BioNews. , (2009).
- Rodgers, C. T. Practical aspects of milk collection in the rat. Lab. Anim. 29 (4), 450-455 (1995).
- Depeters, E. J., Hovey, R. C. Methods for collecting milk from mice. J. Mammary Gland Biol. Neoplasia. 14 (4), 397-400 (2009).
- Knight, C. H., Maltz, E., Docherty, A. H. Milk yield and composition in mice: effects of litter size and lactation. 84 (1), 127-133 (1986).
- Hedrich, H. J., Bullock, G. R. The laboratory mouse. , 735-736 (2004).
- Nishimori, K., Young, L. J., Guo, Q., Wang, Z., Insel, T. R., Matzuk, M. M. Oxytocin is required for nursing but is not essential for parturition or reproductive behavior. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 93 (21), 11699-11704 (1996).
- Miller, B. F., Osborn, D. A., Lance, W. R., Howze, M. M., Warren, R. J., Miller, K. V. Butorphanol-azaperone-medetomidine for immobilization of captive white-tailed deer. 45 (2), 457-467 (2009).
