マウスおよびリーブス」キョン鹿のためのミルク収集方法
Summary
Milk collection from animal models facilitates various research avenues: understanding passive immunity, identifying pathogens responsible for vertical transmission and, through the use of transgenic mice, even commercial production of proteins found in human breast milk. Here we illustrate a simple method for milk collection in mice and Reeves’ muntjac deer.
Abstract
Animal models are commonly used throughout research laboratories to accomplish what would normally be considered impractical in a pathogen’s native host. Milk collection from animals allows scientists the opportunity to study many aspects of reproduction including vertical transmission, passive immunity, mammary gland biology, and lactation. Obtaining adequate volumes of milk for these studies is a challenging task, especially from small animal models. Here we illustrate an inexpensive and facile method for milk collection in mice and Reeves’ muntjac deer that does not require specialized equipment or extensive training. This particular method requires two researchers: one to express the milk and to stabilize the animal, and one to collect the milk in an appropriate container from either a Muntjac or mouse model. The mouse model also requires the use of a P-200 pipetman and corresponding pipette tips. While this method is low cost and relatively easy to perform, researchers should be advised that anesthetizing the animal is required for optimal milk collection.
Introduction
動物モデルは、 インビトロ分析によって得られることができない疾患病理への洞察を提供しています。最も有効な結果を提供するためには、疾患および対象の種と密接に関連して動物モデルを使用することが重要である。たとえば、リーブス」キョン（ キョン ）、小アジアの鹿1,2、およびシカのプリオンタンパク質（CerTgPrP）3を発現するトランスジェニックマウスは、シカ科の種のための有用な動物モデルである。両種は、年間を通して繁殖が可能、多発情性のある、したがって、妊娠関連組織および体液のための一貫性のあるソースは、シカ科生物学の特定のメカニズムを研究する。牛乳の研究では、ヒトより動物モデルで達成より簡単に（かつ安価に）されているアプリケーションの広大な配列を持っている。研究者たちは、1）感染症伝達の潜在的な原因として、牛乳や初乳を調査できた、develoの中で子孫に母親から転送された2）免疫グロブリン受動免疫4および3）ラクトフェリンのpment、研究者は、現在、商業的に5を生産しようとしている、受動免疫に関与するヒトの母乳中に見出されるタンパク質。
小さな動物から牛乳のかなりの量を収集することは困難な作業であることを証明することができます。ロジャースは、その後、マウスを使用したラット6からミルクを収集するための手法を提案した。 DePeters及びハービ次いで真空源に取り付けられた搾乳ユニット（の構築を必要とする牛乳の収集、パスツールピペットに取り付けられたゴム製のピペット球によって産生さ手動生成された真空を用いたもの、及び第二の2つの方法を提案し、このようなマウスのミルク7を収穫する蛇口）など。ここでは、マウスだけで容易に利用可能な実験装置と基本的な技術的なスキルを必要としリーブス」キョン鹿、両方からミルクを収集するためのシンプルで低コストの方法を提案する。我々の方法は、様々なミルクの十分なボリュームをもたらすアプリケーション。
Protocol
Representative Results
Discussion
マウス
1を含むマウスの乳を収集するとき考慮すべきいくつかの要因が、）は、コレクションのために取っておく時間の量、投与オキシトシンの2）の投与量、3）ダムは現在、看護や4）の量でどのように多くの子犬があります収集時に分娩から経過した時間。ガイドラインとしてこれまでの研究を用いて、乳量のための条件を最適化するために設定してくだ…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
These experiments were funded by the NIH grant #RAI093634A. We express immense gratitude to Jenny Powers, DVM, PhD, for her assistance in muntjac milking.
Materials
| Materials-Mouse | |||
| Name of Material/Reagent | Vendor | Catalog Number | Comments |
| Ketamine (KetaVed 100 mg/mL) (dose: 80-100 mg/kg) | MWI/Vedco | 011075 | |
| Xylazine (TranquiVed 100 mg/ml) (dose:5-10 mg/kg) | MWI/Vedco | NADA 139236 | |
| Eye lubricant | MWI/Apexa | 701013 | |
| Oxytocin (2 IU/kg) | Vet One | 501013 | |
| Materials- Muntjac | |||
| Name of Material/Reagent | Vendor | Catalog Number | Comments |
| Midazolam (1-2 mg/kg) | Amerisource Bergen Drug Corp | 924326 | optional: researcher can either use Midazolam on its own or BAM combination as an anesthetic |
| Butorphanol tartrate (Torbugesic) (0.45 mg/kg) | Fort Dodge Animal Health | NADA 135-780 | |
| Azaperone tartrate (0.25 mg/kg) | ZooPharm | ||
| Medetomadine HCl (0.07 mg/kg) | ZooPharm | ||
| Antipamezol hydrochloride (Antisedan) (dose: 0.25 mg/kg) | Orion Corporation | NADA 141-033 | |
| Oxytocin (10 IU/kg) | Vet One | 501013 | |
| Equipment- Mouse | |||
| Name of Equipment | Vendor | Catalog Number | Comments |
| P-200 Pipetman | Gilson | F123601 | |
| 200 μL pipette tips | Light Labs | B-2004-SH | |
| 1 ml syringes | MWI | 005427 | |
| 27 gauge needles | MWI | 002031 | |
| Equipment- Muntjac | |||
| Name of Equipment | Vendor | Catalog Number | Comments |
| 15 ml conical tubes | VWR | 21008-918 | |
| 22 gauge needles | MWI | 873 | |
| 3 ml luer lock syringes | MWI | 001377 |
Referencias
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