마우스 및 꿰 문착 사슴 우유 수집 방법
Summary
Milk collection from animal models facilitates various research avenues: understanding passive immunity, identifying pathogens responsible for vertical transmission and, through the use of transgenic mice, even commercial production of proteins found in human breast milk. Here we illustrate a simple method for milk collection in mice and Reeves’ muntjac deer.
Abstract
Animal models are commonly used throughout research laboratories to accomplish what would normally be considered impractical in a pathogen’s native host. Milk collection from animals allows scientists the opportunity to study many aspects of reproduction including vertical transmission, passive immunity, mammary gland biology, and lactation. Obtaining adequate volumes of milk for these studies is a challenging task, especially from small animal models. Here we illustrate an inexpensive and facile method for milk collection in mice and Reeves’ muntjac deer that does not require specialized equipment or extensive training. This particular method requires two researchers: one to express the milk and to stabilize the animal, and one to collect the milk in an appropriate container from either a Muntjac or mouse model. The mouse model also requires the use of a P-200 pipetman and corresponding pipette tips. While this method is low cost and relatively easy to perform, researchers should be advised that anesthetizing the animal is required for optimal milk collection.
Introduction
동물 모델은 체외 분석에 의해 얻어 질 수없는 질병의 병리에 대한 통찰력을 제공합니다. 가장 효과적인 결과를 제공하기 위해, 밀접 질환 및 그와 관련된 종의 동물 모델을 사용하는 것이 중요하다. 예를 들어, 꿰 문착 (Muntiacus reevesi에), cervid 프리온 단백질 (CerTgPrP)를 3 표현하는 작은 아시아 사슴 1, 2, 형질 전환 마우스는 cervid 종에 유용한 동물 모델입니다. 두 종은 연중 번식을 허용 polyestrous이며, 따라서 임신 관련 조직과 체액에 대한 일관성있는 소스는 cervid 생물학의 특정 메커니즘을 연구 할 수 있습니다. 우유의 연구는 인간보다 동물 모델에서 수행 더 간단하게 (저렴하게)있는 응용 프로그램의 광대 한 배열이있다. 연구원은 1) 전염성 질병 전파의 잠재적 인 소스로 우유와 초유를 조사 수, 개발까지의 자손에게 어머니로부터 전송 2) 면역 글로불린수동 면역 4, 3) 락토페린의 pment 연구자가 현재 시도하고 수동 면역에 관련된 인간의 모유에서 발견되는 단백질은 상업적으로 5를 생산하고 있습니다.
작은 동물에서 우유의 상당한 양을 수집하는 것은 어려운 작업이 될 증명할 수 있습니다. 로저스는 이후 마우스에 사용 된 쥐 6에서 우유를 수집하는 방법을 제안했다. DePeters 및 호비는 진공 원에 부착 착유 유닛 (의 구성을 필요로 우유 컬렉션, 파스퇴르 피펫에 부착 된 고무 피펫 전구에 의해 생성 수동으로 생성 된 진공을 이용 하나, 그리고 제 두 가지 방법을 제안 그러한 마우스 우유 7을 수확 할 수있는 수도꼭지) 등. 여기에서 우리는 마우스 만 쉽게 사용할 실험실 장비 및 기본적인 기술 능력을 필요로 꿰 문착 사슴, 양에서 우유를 수집하기위한 간단하고 저렴한 방법을 제안한다. 우리의 방법은 다양한 우유의 충분한 볼륨을 생성응용 프로그램.
Protocol
Representative Results
Discussion
마우스
1 등의 마우스에서 우유를 수집 할 때 고려해야 할 여러 가지 요인이) 수집을 위해 따로 시간의 양, 투여 옥시토신 2) 용량, 3) 댐은 간호 4) 양이 얼마나 많은 새끼가 있습니다 컬렉션의 분만시 이후 경과 된 시간. 지침으로 이전의 연구를 사용하여, 우리는 우유 생산 조건을 최적화하기 위해 밖으로 설정합니다.
이전 연구는 직접 산자 …
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
These experiments were funded by the NIH grant #RAI093634A. We express immense gratitude to Jenny Powers, DVM, PhD, for her assistance in muntjac milking.
Materials
| Materials-Mouse | |||
| Name of Material/Reagent | Vendor | Catalog Number | Comments |
| Ketamine (KetaVed 100 mg/mL) (dose: 80-100 mg/kg) | MWI/Vedco | 011075 | |
| Xylazine (TranquiVed 100 mg/ml) (dose:5-10 mg/kg) | MWI/Vedco | NADA 139236 | |
| Eye lubricant | MWI/Apexa | 701013 | |
| Oxytocin (2 IU/kg) | Vet One | 501013 | |
| Materials- Muntjac | |||
| Name of Material/Reagent | Vendor | Catalog Number | Comments |
| Midazolam (1-2 mg/kg) | Amerisource Bergen Drug Corp | 924326 | optional: researcher can either use Midazolam on its own or BAM combination as an anesthetic |
| Butorphanol tartrate (Torbugesic) (0.45 mg/kg) | Fort Dodge Animal Health | NADA 135-780 | |
| Azaperone tartrate (0.25 mg/kg) | ZooPharm | ||
| Medetomadine HCl (0.07 mg/kg) | ZooPharm | ||
| Antipamezol hydrochloride (Antisedan) (dose: 0.25 mg/kg) | Orion Corporation | NADA 141-033 | |
| Oxytocin (10 IU/kg) | Vet One | 501013 | |
| Equipment- Mouse | |||
| Name of Equipment | Vendor | Catalog Number | Comments |
| P-200 Pipetman | Gilson | F123601 | |
| 200 μL pipette tips | Light Labs | B-2004-SH | |
| 1 ml syringes | MWI | 005427 | |
| 27 gauge needles | MWI | 002031 | |
| Equipment- Muntjac | |||
| Name of Equipment | Vendor | Catalog Number | Comments |
| 15 ml conical tubes | VWR | 21008-918 | |
| 22 gauge needles | MWI | 873 | |
| 3 ml luer lock syringes | MWI | 001377 |
Referencias
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